一种抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效的方法

    公开(公告)号:CN103571794B

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201310306002.9

    申请日:2013-07-19

    Inventor: 程涛 李彦欣

    Abstract: 本发明提供一种抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效的方法,包括以下步骤:(1)PUMA-/-(PUMA基因敲除)小鼠或PUMA-/+小鼠成纤维细胞MEF的制备、传代、冻存;(2)DH5α大肠杆菌株转化质粒PMX-Oct4、PMX-Sox2、PMX-c-Myc和PMX-KLF4,并进行质粒小提和质粒大提;(3)逆转录病毒的包装、滴度测定与冻存;(4)PUMA基因敲除小鼠或PUMA-/+小鼠胚胎成纤维细胞MEF的重编程;(5)敲降PUMA功能的人成纤维细胞的重编程。本发明的有益效果是通过在体细胞重编程步骤中抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效,同时能够保护iPS细胞基因组稳定性。

    一种检测SETD2基因突变的试剂盒

    公开(公告)号:CN103215352B

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201310107889.9

    申请日:2013-03-29

    Abstract: 本发明涉及一种检测SETD2基因突变的试剂盒,该试剂盒包括扩增SETD2基因的试剂和检测SETD2基因突变的试剂。所述扩增SETD2基因的试剂包括扩增SETD2基因的PCR引物及相应的PCR反应试剂,其中所述扩增SETD2基因的PCR引物为针于SETD2基因21个外显子设计的PCR引物,所述PCR引物序列包括SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:64的序列。所述检测SETD2基因突变的试剂包括用于检测SETD2突变的测序引物,所述测序引物序列包括SEQ ID NO:65-SEQ ID NO:103的序列。本发明试剂盒可以对SETD2基因所有已知或未知的突变进行筛选和检测。

    一种抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效的方法

    公开(公告)号:CN103571794A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201310306002.9

    申请日:2013-07-19

    Inventor: 程涛 李彦欣

    Abstract: 本发明提供一种抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效的方法,包括以下步骤:(1)PUMA-/-(PUMA基因敲除)小鼠或PUMA-/+小鼠成纤维细胞MEF的制备、传代、冻存;(2)DH5α大肠杆菌株转化质粒PMX-Oct4、PMX-Sox2、PMX-c-Myc和PMX-KLF4,并进行质粒小提和质粒大提;(3)逆转录病毒的包装、滴度测定与冻存;(4)PUMA基因敲除小鼠或PUMA-/+小鼠胚胎成纤维细胞MEF的重编程;(5)敲降PUMA功能的人成纤维细胞的重编程。本发明的有益效果是通过在体细胞重编程步骤中抑制PUMA功能改善iPS细胞建立功效,同时能够保护iPS细胞基因组稳定性。

    一种检测STED2基因突变的试剂盒

    公开(公告)号:CN103215352A

    公开(公告)日:2013-07-24

    申请号:CN201310107889.9

    申请日:2013-03-29

    Abstract: 本发明涉及一种检测STED2基因突变的试剂盒,该试剂盒包括扩增STED2基因的试剂和检测STED2基因突变的试剂。所述扩增STED2基因的试剂包括扩增STED2基因的PCR引物及相应的PCR反应试剂,其中所述扩增STED2基因的PCR引物为针于STED2基因21个外显子设计的PCR引物,所述PCR引物序列包括SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:64的序列。所述检测STED2基因突变的试剂包括用于检测STED2突变的测序引物,所述测序引物序列包括SEQ ID NO:65-SEQ ID NO:103的序列。本发明试剂盒可以对STED2基因所有已知或未知的突变进行筛选和检测。

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