用于PCR检测植物病害的内参基因的引物及其应用

    公开(公告)号:CN102367485B

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201110388017.5

    申请日:2011-11-30

    Abstract: 本发明提供了一种用于PCR检测植物病害的内参基因的引物及其应用,属于生物工程技术领域。所述内参基因为rbcL基因,所述引物为:正向:5’TATCTTGGCAGCATTCCGAGTA3’,反向:5’ACCCTCTTCAAATAGGTCTAATGG3’,所述引物特异性的扩增rbcL基因的228bp的DNA片段,用于出入境植物寄生病害检测过程中PCR模板的评价。本发明首次提出在植物病害定性PCR检测中建立通用的内参基因;首次提出将植物叶绿体的rbcL基因作为内参基因应用于植物病害定性PCR检测;本发明提出的检测引物,克服了针对一种植物一个内参基因的缺陷,大大的提高了检测效率、缩短了检测时间。

    用于PCR检测植物病害的内参基因的引物及其应用

    公开(公告)号:CN102367485A

    公开(公告)日:2012-03-07

    申请号:CN201110388017.5

    申请日:2011-11-30

    Abstract: 本发明提供了一种用于PCR检测植物病害的内参基因的引物及其应用,属于生物工程技术领域。所述内参基因为rbcL基因,所述引物为:正向:5’TATCTTGGCAGCATTCCGAGTA3’,反向:5’ACCCTCTTCAAATAGGTCTAATGG3’,所述引物特异性的扩增rbcL基因的228bp的DNA片段,用于出入境植物寄生病害检测过程中PCR模板的评价。本发明首次提出在植物病害定性PCR检测中建立通用的内参基因;首次提出将植物叶绿体的rbcL基因作为内参基因应用于植物病害定性PCR检测;本发明提出的检测引物,克服了针对一种植物一个内参基因的缺陷,大大的提高了检测效率、缩短了检测时间。

    一种检测甘蔗中寄生白条病菌的实时荧光定量PCR方法

    公开(公告)号:CN102312015A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110316556.8

    申请日:2011-10-18

    Abstract: 本发明涉及一种检测甘蔗中寄生白条病菌拷贝数的实时荧光定量PCR方法。首先提供了一种利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗中寄生白条病菌的引物及探针,所述的引物为以下序列的引物对:正向引物序列5’-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3’,反向引物序列5’-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3’,探针序列是FAM-5-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3-TAMRA,然后采集和处理甘蔗蔗汁并提取总DNA,利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗中感染的白条病菌HrpB基因,通过扩增过程生成的Ct值,代入标准曲线方程,转换成起始反应的DNA分子拷贝数,从而达到定量检测甘蔗中感染白条病菌数量的目的。

    一种提高甘蔗愈伤组织繁殖系数的方法

    公开(公告)号:CN101560493B

    公开(公告)日:2011-09-21

    申请号:CN200910111896.X

    申请日:2009-06-03

    Abstract: 本发明涉及一种提高甘蔗愈伤组织繁殖系数的方法,具体是通过添加一定体积的椰乳大幅度提高甘蔗愈伤组织的分化率和培育壮苗。该发明的设计方案是:将处理过的甘蔗茎尖心叶经过诱导产生愈伤组织后,在分化阶段往培养基中添加5%~20%体积的椰乳,可以极显著地提高愈伤组织分化率,一般比对照提高100%,并且培育壮苗。该方法解决了甘蔗组织培养中某些品种能够正常诱导愈伤组织但分化困难的问题,有效完善了甘蔗组培再生体系,极显著提高愈伤组织分化率,促进组织培养在良种快繁中的广泛应用。

    单花粉全基因组扩增库的快速制备方法

    公开(公告)号:CN101328491A

    公开(公告)日:2008-12-24

    申请号:CN200810071435.X

    申请日:2008-07-23

    Abstract: 植物单花粉全基因组扩增库的快速制备方法,具体涉及植物单花粉的分离、快速裂解和全基因组复制扩增。本发明的技术方案是:在载玻片上将花粉染色、干燥,制备花粉粒玻片;应用一种显微解剖镊子在显微镜下分离单个花粉,放入PCR管中,在碱和表面活性剂溶液中裂解后用TE缓冲溶液中和。裂解混合液直接作为模板在试剂盒Genomiphi DNA Amplification Kit方法中工作,将单个花粉的DNA复制扩增出大量全基因组,该方法能应用于大批量单花粉收集并制备全基因组,为植物单倍体遗传规律分析和通过单倍体染色体制图提供了一种新的途径。

    甘蔗割手密种不同组织荧光定量内参基因的筛选和应用

    公开(公告)号:CN116064919A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211521380.4

    申请日:2022-11-30

    Abstract: 本发明公开了甘蔗割手密种不同组织荧光定量内参基因的筛选和应用。本发明所述的内参基因来源于割手密种全基因组水平上的不同组织的转录组数据库,与以往的其他物种的内参基因相比,本发明所开发的内参基因WDR比通用内参基因(eEf‑1ɑ,GAPDH和Actin)具有组成型表达、表达量适中、稳定性好等优点。因此本发明为割手密种基因不同组织的表达分析、筛选、验证工作提供了有效的、准确的、均一性的内参基因。此外,新开发的内参基因不仅丰富了植物内参基因的种类和数量,而且也对甘蔗属及其近缘属(蔗茅属和芒属)植物基因表达量校正提供了重要的候选基因资源。

    一种区分甘蔗种间二号染色体遗传背景的SSR标记与应用

    公开(公告)号:CN111663002B

    公开(公告)日:2022-10-11

    申请号:CN202010672153.6

    申请日:2020-07-14

    Abstract: 本发明公开了一种区分甘蔗高贵种和割手密种二号染色体遗传背景的微卫星分子标记及应用,包括四对位于甘蔗高贵种二号染色体的SSR分子标记核心引物对,研究基于甘蔗高贵种和割手密种全基因组数据,设计、合成SSR标记引物,并在5份高贵种材料、4份割手密种材料、2份栽培种材料中进行聚丙烯酰胺凝胶电泳验证。筛选出的4对引物具有扩增结果稳定、电泳条带清晰可辨的特点,可以分清SSR所在甘蔗高贵种和割手密种的染色体位置,证实所述SSR标记重复性和多态性较高,可用于甘蔗遗传分析和品种鉴定。

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