公开(公告)号：CN106124599A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610526872.0

申请日：2016-06-25

Applicant: 河南科技大学

Inventor： 赵君峰 ,  王大红 ,  张彬 ,  孙建瑞 ,  张红梅

IPC: G01N27/447 ,  G01N1/28

CPC classification number: G01N27/44773 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明公开了一种蛋白质双向电泳方法，包括第一向的等电聚焦电泳和第二向的SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳，分别对聚焦电泳的水化条件和电泳条件进行了改进，包括利用水化液对胶条进行水化，得到水化好的胶条，且水化好的胶条pH为4‑7，其中每100mL水化液中含有以下组分：41‑42.5g的尿素、15‑16g的硫脲、2‑2.2g的CHAPS、0.9‑1.1g的DTT、2‑2.2g的IPG Buffer、0.002‑0.003g的溴酚兰，且水化液的溶剂为ddH2O；等电聚焦电泳的电压和时间采用如下设置：S1：50v，10h；S2：250v，3h；S3：500v，3h；S4：1000v，1h；S5：8000v，3h；S6：8000v，6‑6.5h。该方法在检测淀粉液化芽孢杆菌稳定期菌体细胞中全蛋白分布的应用时，双向电泳图谱分辨率高、重复性好。