公开(公告)号：CN105713962A

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201410728225.9

申请日：2014-12-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郑小波 ,  沈浩 ,  王源超 ,  张海峰

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了用于检测大豆拟茎点种腐病菌的LAMP引物组合物和应用。大大豆拟茎点种腐病菌的检测靶标序列Tef-α，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引物FIP如SEQ ID NO.2所示，反向内引物BIP如SEQ ID NO.3所示，正向外引物F3如SEQ ID NO.4所示，反向外引物B3如SEQ ID NO.5所示，正向环引物LF如SEQ ID NO.6所示。本发明的检测体系在LAMP扩增条件下，能快速、高效、高特异、高灵敏地检测到大豆拟茎点种腐病菌，用于田间检疫、进出口检疫等的现场检测，易于大范围推广应用。

公开(公告)号：CN103710440B

公开(公告)日：2015-09-30

申请号：CN201310686657.3

申请日：2013-12-13

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郑小波 ,  沈浩 ,  戴婷婷 ,  王源超 ,  张海峰

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标及其特异性LAMP引物组合物和应用。大豆南方茎溃疡病菌的检测靶标序列Tef-α，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引物FIP如SEQ ID NO.2所示，反向内引物BIP如SEQ ID NO.3所示，正向外引物F3如SEQ ID NO.4所示，反向外引物B3如SEQ ID NO.5所示。本发明的检测体系在LAMP扩增条件下，能快速、高效、高特异、高灵敏地检测到大豆南方茎溃疡病菌，用于田间检疫、进出口检疫等的现场检测，易于大范围推广应用。

公开(公告)号：CN104593502A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201510031690.1

申请日：2015-01-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郑小波 ,  田擎 ,  陆辰晨 ,  王帅帅 ,  张海峰 ,  王源超

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明公开了一种检测平头炭疽菌的环介导等温扩增引物组合物及其应用。所述的引物组合物由SEQ ID NO.2所示的正向外引物Rpb1-F3，SEQ ID NO.3所示的反向外引物Rpb1-B3，SEQ ID NO.4所示的正向内引物Rpb1-FIP，SEQ ID NO.5所示的反向内引物Rpb1-BIP，SEQ ID NO.6所示的环引物Rpb1-LF组成。本发明解决了现有技术中平头炭疽菌的生物学检测方法所需周期长、费时费力、繁琐、特异性差的问题及PCR检测技术需要热循环仪器，无法快速检测平头炭疽菌的问题，检测周期短(仅需70min)、特异性强、灵敏性高、可肉眼观察检测结果。

公开(公告)号：CN103352078B

公开(公告)日：2015-03-11

申请号：CN201310291748.7

申请日：2013-07-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郑小波 ,  陆辰晨 ,  戴婷婷 ,  王源超 ,  张海峰

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP技术检测大豆尖镰孢菌的方法及使用的引物组合物。一种基于LAMP技术检测大豆尖镰孢菌的引物组合物，由大豆尖镰孢LAMP分子检测的四条特异性引物FIP、BIP、F3、B3，以及两条用于加快反应速度的环引物LF、LB组成。一种基于LAMP技术检测大豆尖镰孢菌的方法，使用本发明提供的引物组合物对待检DNA进行环介导等温扩增，肉眼或在245nm波长紫外光照射下观测，以SYBR Green I的颜色变化和荧光强弱做为结果判定标准。本发明提供了大豆尖镰孢新的分子检测方法及引物组合物，对大豆尖镰孢进行LAMP检测，检测周期短、准确性高、灵敏性高、肉眼观察检测结果。

公开(公告)号：CN103695542A

公开(公告)日：2014-04-02

申请号：CN201310683495.8

申请日：2013-12-13

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郑小波 ,  沈浩 ,  戴婷婷 ,  王源超 ,  张海峰

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标及其特异性LAMP引物组合物和应用。大豆北方茎溃疡病菌的检测靶标序列Tef，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该靶标序列特异性的LAMP引物组合物，正向内引物FIP如SEQ ID NO.2所示，反向内引物BIP如SEQ ID NO.3所示，正向外引物F3如SEQ ID NO.4所示，反向外引物B3如SEQ ID NO.5所示。本发明的检测体系在LAMP扩增条件下，能快速、高效、高特异、高灵敏地检测到大豆北方茎溃疡病菌，能较好满足目前对大豆北方茎溃疡病菌的检测的迫切需要，用于田间检疫、进出口检疫等的现场检测，易于大范围推广应用。

公开(公告)号：CN102433387A

公开(公告)日：2012-05-02

申请号：CN201110444010.0

申请日：2011-12-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张正光 ,  王健生 ,  郑小波 ,  王源超 ,  张海峰

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明公开了一种尖孢镰刀菌的分子检测方法及其引物，建立了一套快速、高灵敏度、稳定可靠的检测尖孢镰刀菌的分子检测技术。该检测方法可以在病害侵染初期鉴定出病原物，为枯萎病的防治提供参考。更重要的是，基于新的靶序列CYP51C建立的检测体系为其它病原菌检测新靶标的应用提供了技术指导和理论依据，也为病原菌的分子检测研究奠定了方法基础。