一种猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法

    公开(公告)号:CN105624105B

    公开(公告)日:2020-01-21

    申请号:CN201610087719.2

    申请日:2016-02-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪睾丸间质祖细胞PLCs的长期培养方法,其中包括体外分离、检测和分化,利用猪PLCs的体外增殖培养基培养仔猪睾丸成纤维细胞5~8天后,得到PLCs克隆集落;利用猪PLCs的分化培养基进行培养后,第3天PLCs开始向成熟睾丸间质细胞分化,然而在增殖培养基中培养,在体外最长维持时间达到了6个月。本发明首次建立起一套成熟的猪PLCs的分离、培养、检测和分化的完善方法,最终确立的不同体外培养体系可以实现控制PLCs在体外维持增殖和分化。本发明的方法对于体外研究PLCs生物学性质,以及药物研发和疫苗生产等方面应用具有潜在应用价值。

    一种猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法

    公开(公告)号:CN105624105A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610087719.2

    申请日:2016-02-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪睾丸间质祖细胞PLCs的长期培养方法,其中包括体外分离、检测和分化,利用猪PLCs的体外增殖培养基培养仔猪睾丸成纤维细胞5~8天后,得到PLCs克隆集落;利用猪PLCs的分化培养基进行培养后,第3天PLCs开始向成熟睾丸间质细胞分化,然而在增殖培养基中培养,在体外最长维持时间达到了6个月。本发明首次建立起一套成熟的猪PLCs的分离、培养、检测和分化的完善方法,最终确立的不同体外培养体系可以实现控制PLCs在体外维持增殖和分化。本发明的方法对于体外研究PLCs生物学性质,以及药物研发和疫苗生产等方面应用具有潜在应用价值。

    一种评定大白公猪受精能力的数学模型及其建立方法

    公开(公告)号:CN105046083A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510431755.1

    申请日:2015-07-21

    Abstract: 本发明公开了一种评定大白公猪受精能力的数学模型及其建立方法,其建立方法包括步骤:对大白公猪数据样本的预测变量进行数据描述;再进行系统聚类,并依据公猪精液受精能力相关的样本数据对不同受精力水平的大白公猪进行划分,划分为高受精能力公猪群和低受精能力公猪群;再进行聚类后的判别分析和Logistic回归分析,生成具体的数学函数。本发明所建立的数学模型的系数及预测准确率可靠,能够提供一种适合广东省种猪场评定在役大白公猪受精能力的函数模型,可作为评定大白公猪受精能力的依据;对于缩小公猪间受精能力的梯度变化区间,以及准确预测大白公猪受精能力水平具有重要意义。

    一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法

    公开(公告)号:CN104673742A

    公开(公告)日:2015-06-03

    申请号:CN201510065430.6

    申请日:2015-02-06

    Abstract: 本发明公开了一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法,包括步骤:取长白仔猪睾丸组织,获取高比例的长白仔猪睾丸支持细胞以后,完全培养基培养1~2h后更换新鲜培养液,继续培养,最后传代至细胞形态均一的F3代的睾丸成纤维细胞;利用携带Large T和Egfp基因的慢病毒液侵染成纤维细胞,获得特征的并且表达Egfp和支持细胞标记的细胞株;使用优化的培养液培养传代超过50代以后,获得长白仔猪睾丸支持细胞永生系。本发明的长白仔猪睾丸支持细胞永生系体外传代次数已超过90代,对比市场上已建立猪睾丸传代ST细胞,本发明永生化的长白仔猪支持细胞系维持了原代的支持细胞生物学特征,更适合支持细胞的生物学性质研究,可以应用于疫苗开发和药物筛选等方面研究。

    一种长效常温猪精液保存稀释液及其应用

    公开(公告)号:CN117178979B

    公开(公告)日:2025-02-21

    申请号:CN202310921920.6

    申请日:2023-07-26

    Abstract: 本发明提供了一种长效常温猪精液保存稀释液及其应用。本发明通过在精液中添加没食子酸甲酯,可以维持精子细胞结构、降低脂质氧化水平、提高精子抗氧化酶活性和提高精子AMPKα磷酸化水平,显著提高常温保存的精子的质量、延长保存时间;pBD129则通过维持精子细胞结构、提高精子AMPKα磷酸化水平显著提高精子质量并延长精液的保存时间。本发明实现了猪精液稀释液在常温下的长期保存,较现有常规方法和常规稀释液的效果有显著提升,且不需要额外操作和环境控制,成本低方法简单,有助于在产业上进行推广应用。

    一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法

    公开(公告)号:CN118716335A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202411203811.1

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明公开了一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法。属于精液冷冻技术领域。本发明提供了一种冷冻精液稀释液改良配方,明确了稀释液中单独添加海藻糖和L‑半胱氨酸的最适添加浓度,以及两者组合添加的适宜浓度范围,并且在优化后的稀释液中添加EGCG,极大提升冻后精子质量和保存效果。本发明使用细胞冻存管进行精液冷冻保存,精子冻后活力与用冻精细管冷冻效果无差异,精液剂量提高了6倍。本发明还提供了一种精液中甘油的去除方法,甘油去除率高,且受精率和孵化率能达到与原精液授精相当的效果。

    一种真核表达猪催乳素重组蛋白的方法

    公开(公告)号:CN117187303A

    公开(公告)日:2023-12-08

    申请号:CN202310949471.6

    申请日:2023-07-31

    Abstract: 本发明公开一种真核表达猪催乳素重组蛋白的方法,涉及细胞生物工程技术领域。本发明选择CHO‑K1细胞来建立高效表达体系,在构建慢病毒表达载体时选择IgGκ信号肽替换位于猪催乳素1~30AA的信号肽序列,来促进目的基因猪催乳素的外源表达,并且加入Kozak序列提高转录翻译效率,并通过密码子优化和序列改造,然后将目的片段进行了全基因组合成,构建了pCDH‑CMV‑IgGκ‑PRL‑EF1‑GFP+Puro真核表达载体,建立了可高效表达猪催乳素蛋白的CHO细胞系,制备了具有生物活性的重组猪催乳素蛋白,且能够显著促进牛乳腺上皮细胞的增殖和增殖相关基因(PCNA)的上调。

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