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公开(公告)号：CN108374014B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201810126177.4
申请日：2018-02-08
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa及其克隆方法与应用。提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示。本发明还公开了提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtTPKa基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtTPKa基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物并与pTOPO载体连接；构建了含NtTPKa基因的RNAi表达载体。将RNAi载体通过农杆菌介导法转化烟草，制备转基因植株。获得的转基因植株钾含量比对照提高20%以上。说明烟草NtTPKa基因在培育高钾含量的烟草方面具有重大的应用前景。
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公开(公告)号：CN108424922B
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN201810360474.5
申请日：2018-04-20
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M271及其应用。所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M271相对于核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的CYP82E10基因，所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M271含有的CYP82E10基因序列中385位的C被T取代发生了点突变，所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M271的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。应用为所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M271在获得尼古丁低转化率的烟草植株中的应用。本发明所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M271获得的云烟87材料中，叶片尼古丁转化率分别比对照下降约62%，显著降低了尼古丁的转化率。
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公开(公告)号：CN107771561B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201710958401.1
申请日：2017-10-14
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: A01G7/06
Abstract: 本发明公开了一种爪哇根结线虫的抗/耐病性鉴定方法。所述鉴定方法包括育苗、接种、抗/耐病性测定及抗/耐病性评价工序。所述的生物量测定方法与根结线虫耐病性的鉴定方法简便易操作，能较准确地反应不同品种对根结线虫的抗/耐病性，鉴定结果结论可靠，推广应用价值高。该技术用于种质资源或新品种抗/耐病性评价，为抗病育种及品种的合理布局奠定基础。
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公开(公告)号：CN110684779A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201911005278.7
申请日：2019-10-22
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Inventor： 隋学艺 , 王丙武 , 宋中邦 , 高玉龙 , 李文正 , 李梅云 , 赵璐 , 袁诚 , 张洪博 , 师君丽 , 李永平 , 孔光辉 , 曾建敏 , 邹聪明 , 刘勇 , 黄昌军 , 吴兴富
Abstract: 本发明公开了烟草烟碱合成调控基因NtERF91及其克隆方法与应用，烟碱合成调控基因NtERF91核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了烟碱合成调控基因NtERF91的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtERF91基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtERF91基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；E、构建了含NtERF91基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达，制备转基因植株。获得的转基因植株烟碱含量比对照提高了60％以上。说明烟草NtERF91基因在培育高烟碱含量的烟草方面具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN109295072A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811208979.6
申请日：2018-10-17
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Inventor： 王丙武 , 宋中邦 , 高玉龙 , 李文正 , 李梅云 , 隋学艺 , 赵璐 , 韩生成 , 师君丽 , 孔光辉 , 曾建敏 , 邹聪明 , 刘勇 , 黄昌军 , 吴兴富 , 徐向丽 , 贺晓辉
Abstract: 本发明公开了一种烟草烟碱合成调控基因NtERF115及其克隆方法与应用，烟碱合成调控基因NtERF115核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了烟碱合成调控基因NtERF115的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtERF115基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtERF115基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；E、纯化产物与载体连接，转化感受态细胞；F、筛选阳性克隆，对阳性克隆PCR扩增、测序。通过调控NtERF115基因的表达，可提高烟草烟叶中烟碱含量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107828795A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201711098120.X
申请日：2017-11-09
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8205 , C12N15/8243
Abstract: 本发明公开了一种提高烟草叶片钾含量的基因NtNHX1-2及其克隆方法与应用，提高烟草叶片钾含量的基因NtNHX1-2核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了提高烟草叶片钾含量的基因NtNHX1-2的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtIPT1基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtIPT1基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；构建了含NtNHX1-2基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达，制备转基因植株。获得的转基因植株钾含量比对照提高20%以上。说明烟草NtNHX1-2基因在培育高钾含量的烟草方面具有重大的应用前景。
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公开(公告)号：CN107267528A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710708197.8
申请日：2017-08-17
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种烟草腋芽生长调控基因NtMOC1及其克隆方法与应用。烟草腋芽生长调控基因NtMOC1的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtMOC1基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtMOC1基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；E、纯化产物与载体连接，转化感受态细胞；F、筛选阳性克隆，对阳性克隆PCR扩增、测序。通过调控烟草腋芽生长调控基因NtMOC1的表达，可抑制打顶后烟草腋芽的形成，从而有望降低烟用抑芽剂使用，以提高烟草品质，降低烟叶生产劳动强度、人工与化学药剂成本和环境污染。
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公开(公告)号：CN106191273A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610585565.X
申请日：2016-07-25
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12Q2600/156 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了一种烟草中根结线虫的鉴定方法，所述的鉴定方法集形态和分子特征为一体，包括：1）形态学鉴定；2）提取DNA；3）LSU 28S rDNA D2-D3序列扩增：用根结线虫通用引物RK28SF/MR对步骤2中已提取的DNA进行PCR扩增，检测，如果得到大小为614bp 的序列，则初步鉴定为根结线虫，进行分子系统发育树的构建；4）分子系统发育树的构建，通过系统发育关系分析确定待测线虫是否为根结线虫；5) 序列特征扩增区域 SCAR-PCR 检测。本发明为烟草根结线虫种类的高效、准确鉴定提供了强有力的技术体系，为掌握根结线虫在烟草种植区的分布及危害程度提供了良好基础。
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公开(公告)号：CN101999287B
公开(公告)日：2012-01-04
申请号：CN201010280169.9
申请日：2010-09-14
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 一种烟草黑胫病抗性的苗期恒温水培鉴定方法，有以下顺序步骤：池水保温循环漂浮池建造、烟苗移植、接种体制备及接种、病情调查与分级和抗性评价；本发明具有发病迅速、结果重复性好、可靠、无其他病害干扰等特点，实现了用苗期鉴定结果代替传统大田鉴定结果，实现了在较小面积上鉴定大量材料、一年多次鉴定，提高了结果的可靠性、缩短了鉴定周期、节省鉴定成本。
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公开(公告)号：CN101999287A
公开(公告)日：2011-04-06
申请号：CN201010280169.9
申请日：2010-09-14
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 一种烟草黑胫病抗性的苗期恒温水培鉴定方法，有以下顺序步骤：池水保温循环漂浮池建造、烟苗移植、接种体制备及接种、病情调查与分级和抗性评价；本发明具有发病迅速、结果重复性好、可靠、无其他病害干扰等特点，实现了用苗期鉴定结果代替传统大田鉴定结果，实现了在较小面积上鉴定大量材料、一年多次鉴定，提高了结果的可靠性、缩短了鉴定周期、节省鉴定成本。
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