一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法

    公开(公告)号:CN102907318A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201110217125.6

    申请日:2011-08-01

    Abstract: 本发明主要提供一种高效无性快繁三七再生植物的方法利--用生物反应器大量培养三七体细胞胚。从不定根诱导获得的三七胚性愈伤组织增殖后,在含有0.5mg/L 2,4-D的MS条件下,100%的愈伤组织都产生了球形体细胞胚,且产生的体细胞胚数量最多。10.0g(约1.65×104个)球形胚培养在3L生物反应器内,反应器内装有1.5L不加任何植物生长调节剂的1/2MS液体培养基,空气通入量为0.15vvm。4周后球形胚都发育为子叶体细胞胚,且生物生长量增加约为原来的8倍。液体或固体培养获得的子叶体细胞胚在含加有2.0mg/LGA3的1/2MS培养基中萌发成正常体细胞胚苗,继而在不含任何植物生长调节剂的1/2MS培养基中继代。生长良好的幼苗移栽入装有人工土壤(泥煤苔和泥质岩(3∶1,v∶v))的营养杯中,温室训化成活率较高。

    一种通过体细胞胚及次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法

    公开(公告)号:CN101548646A

    公开(公告)日:2009-10-07

    申请号:CN200910072102.3

    申请日:2009-05-25

    Abstract: 本发明提供了一种通过体细胞胚和次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法。本发明以龙牙楤木幼苗的叶子、叶柄和根段为外植体,在IBA浓度分别为3.0mg/L、2.0mg/L、0.3mg/L和2%蔗糖的SH培养中暗培养35天,三种外植体的体细胞胚诱导率都可达到100%,且平均每个外植体都产生较多的体细胞胚数(8.6-11.3个)。蔗糖浓度和IBA都可以影响次生体细胞胚的产生,在3.0mg/L IBA+2%蔗糖+SH培养基的培养条件下,中暗培养4周后,100%的体细胞胚上都有次生体细胞胚生成。将获得的成熟初生体细胞胚和次生体细胞胚转入无激素的WPM培养基中,都可迅速萌发生长为小苗。约5cm的健壮小苗移栽土壤中,成活率可达89%。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得再生植株的方法,可用于龙牙楤木苗木产业化生产。

    利用诱导子提高茶条槭细胞中没食子酸含量的方法

    公开(公告)号:CN101358179A

    公开(公告)日:2009-02-04

    申请号:CN200810137185.5

    申请日:2008-09-25

    Abstract: 本发明提供了一种利用诱导子提高茶条槭细胞中没食子酸含量的方法。该方法是利用茶条槭(Acer ginnala Maxim)细胞的悬浮培养,通过在细胞生长适宜阶段,加入诱导子(真菌诱导子或茉莉酸甲酯),在诱导一定时间后收获细胞,可显著提高细胞中没食子酸含量。真菌诱导子诱导2-7天后可使细胞中没食子酸含量最高达12.00mg/gDW,产量为151.20mg/L,是对照组的2.06倍;茉莉酸甲酯可使细胞中没食子酸含量最高达13.97mg/gDW,产量为139.70mg/L,是对照组的2.04倍。本发明通过确定添加诱导子的种类、添加浓度、适宜添加诱导子的茶条槭悬浮细胞生长阶段和诱导持续时间,建立诱导子诱导茶条槭细胞高效合成和积累没食子酸技术,是一种有广阔应用前景的没食子酸生产方法。

    一种通过白牛槭休眠芽无性扩繁的方法

    公开(公告)号:CN114431154B

    公开(公告)日:2022-06-28

    申请号:CN202210367170.8

    申请日:2022-04-08

    Abstract: 一种通过白牛槭(Acer mandshuricum Maxim.)休眠芽无性扩繁的方法,属于林业生物技术领域。为解决目前白牛槭优良实生苗木供应不足的问题,建立了通过休眠芽无性扩繁体系。主要技术过程为:以白牛槭早春休眠芽为外植体,经过消毒灭菌后接种在添加植物生长调节剂的无菌培养条件下,诱导其萌发及不定芽生成,进而实现不定芽的大量繁殖,并通过对不定芽进行生根,获得大量整齐一致的无性繁殖苗木,进而移栽入土壤中生长,用于造林。该发明能够克服白牛槭传统种子繁殖方式对其苗木产量的限制,及优良种质性状不易稳定遗传的问题,为良种繁育及遗传育种提供技术支持。

    一种刺五加细胞瞬时转化的方法
    37.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114591882A

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN202210201087.3

    申请日:2022-03-03

    Abstract: 本发明是一种利用酶解法获得刺五加愈伤组织单细胞,并对其进行农杆菌转化获得转GFP基因的方法,它属于生物技术领域。采用1.5%纤维素酶R‑10和0.2%离析酶R‑10酶解刺五加愈伤组织6h后400×g离心5min时,单细胞产量最大、活力最强,分别为1.88×106个·g‑1和90%。40%PEG浓度下农杆菌转化单细胞40min时,单细胞瞬时转化效率达30.34%。本发明提供了一种高产刺五加单细胞的酶解体系,同时获得了一致的转GFP基因的单细胞,该发明将为从单细胞水平研究基因的功能,为基因在不同种类细胞中的功能分析提供技术支撑。

    一种通过白牛槭休眠芽无性扩繁的方法

    公开(公告)号:CN114431154A

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN202210367170.8

    申请日:2022-04-08

    Abstract: 一种通过白牛槭(Acer mandshuricum Maxim.)休眠芽无性扩繁的方法,属于林业生物技术领域。为解决目前白牛槭优良实生苗木供应不足的问题,建立了通过休眠芽无性扩繁体系。主要技术过程为:以白牛槭早春休眠芽为外植体,经过消毒灭菌后接种在添加植物生长调节剂的无菌培养条件下,诱导其萌发及不定芽生成,进而实现不定芽的大量繁殖,并通过对不定芽进行生根,获得大量整齐一致的无性繁殖苗木,进而移栽入土壤中生长,用于造林。该发明能够克服白牛槭传统种子繁殖方式对其苗木产量的限制,及优良种质性状不易稳定遗传的问题,为良种繁育及遗传育种提供技术支持。

    一种长白落叶松胚性愈伤组织胚性恢复与保持的方法

    公开(公告)号:CN113115706A

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN202010039492.0

    申请日:2020-01-15

    Inventor: 由香玲 刘建飞

    Abstract: 本发明的目的是恢复和保持长白落叶松胚性愈伤组织的胚性—通过调节胚性愈伤组织继代培养基中激素浓度的方法。胚性愈伤组织在S+0.1mg·L‑12,4‑D+0.04mg·L‑1BA+0.02mg·L‑1KT激素条件下,继代6个月后发现胚性愈伤组织的体胚分化率急剧下降。经去除2,4‑D,逐渐降低NAA的方法恢复胚性:将胚性愈伤组织接种在每2周NAA浓度从0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg·L‑1依次降低的S培养基中进行胚性恢复培养,其中S培养基中激素还包含0.5mg·L‑1BA、0.5mg·L‑1KT。最终在S+0.2mg·L‑1NAA+0.5mg·L‑1BA+0.5mg·L‑1KT+0.5g·L‑1谷氨酰胺+0.5g·L‑1水解酪蛋白+30g·L‑1蔗糖+3g·L‑1植物凝胶培养条件下持续继代2年,胚性仍然保持良好。将胚性恢复的愈伤组织经分化培养后,体胚发生率可达100%。将发育正常的体细胞胚胎转入萌发培养基中,4周后成苗率可达46.2%。

    一种通过离体培养白桦花药获得单倍体再生植株的方法

    公开(公告)号:CN105684904B

    公开(公告)日:2017-11-10

    申请号:CN201610076172.6

    申请日:2016-02-03

    Abstract: 本发明提供了一种通过离体培养白桦花药获得单倍体再生植株的方法。首先确定花药中小孢子处于单核靠边期后,采集雄穗经消毒,用普通豆浆机粉碎。在超净工作台内分别以40目和60目网筛过筛,除去大于和小于花药的杂质,快速获得大量无菌花药。花药接种于在MS+40mg/L蔗糖+2.0mg/L 2,4‑D+0.5mg/L KT条件下培养4周获得的愈伤组织最好;该愈伤组织在MS+30mg/L蔗糖+2.0mg/L BA+0.5mg/L KT分化培养条件下分化的不定芽最多;不定芽在WPM+0.4mg/L IBA+0.2mg/L NAA培养基中诱导生根。将根尖取下用饱和对二氯苯预处理4h后,经染色制片,光学显微镜观察到染色体收缩效果最佳且分散。获得3个染色体数为14的单倍体株系。

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