一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用

    公开(公告)号:CN111349634B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN202010226165.6

    申请日:2020-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用,BpNAC100基因在白桦响应盐胁迫上的应用,BpNAC100基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,氨基酸的序列表如序列表中SEQ ID NO:2所示;本发明利用农杆菌介导法分别在白桦中过表达和抑制表达BpNAC100基因及其启动子,获得了proBpNAC100::Luc转基因白桦植株和BpNAC100::GFP、BpNAC100‑RNAi转基因白桦植株,得出BpNAC100基因的启动子在白桦不同组织部位具有空间表达特异性,BpNAC100::GFP转基因白桦植株具有抗盐害能力。

    一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用

    公开(公告)号:CN111349634A

    公开(公告)日:2020-06-30

    申请号:CN202010226165.6

    申请日:2020-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用,BpNAC100基因在白桦响应盐胁迫上的应用,BpNAC100基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,氨基酸的序列表如序列表中SEQ ID NO:2所示;本发明利用农杆菌介导法分别在白桦中过表达和抑制表达BpNAC100基因及其启动子,获得了proBpNAC100::Luc转基因白桦植株和BpNAC100::GFP、BpNAC100-RNAi转基因白桦植株,得出BpNAC100基因的启动子在白桦不同组织部位具有空间表达特异性,BpNAC100::GFP转基因白桦植株具有抗盐害能力。

    一种小黑杨花粉植株转基因方法

    公开(公告)号:CN102392046A

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN201110385175.5

    申请日:2011-11-28

    Abstract: 一种小黑杨花粉植株转基因方法,涉及一种小黑杨花粉植株转基因方法。是要解决现有小黑杨花粉植株转基因效率低的问题。方法:取抽茎培养基中的无根苗,移入生根培养基,植株作为外植体;取外植体上叶片,在基部和中间各切一刀,弃掉叶尖儿部位,接种于分化培养基上;挑取携带外源基因的农杆菌EHA105接种到LB培养基中培养得菌液,菌液用无菌水稀释;将预培养后的叶片放入菌液中浸泡,取出叶片吸去多余菌液;将叶片接种在分化培养基上培养;取出叶片将水分吸干,将叶片移至选择培养基培养,产生愈伤组织,将愈伤组织放入选择培养基中培养产生抗性芽,即完成。本方法获得的抗性芽多,转基因效率高。

    一种构建pROKⅡ植物双价表达载体的方法及其使用的通用引物

    公开(公告)号:CN101294165B

    公开(公告)日:2011-04-27

    申请号:CN200810064790.4

    申请日:2008-06-23

    Abstract: 一种构建pROK?II植物双价表达载体的方法及其使用的通用引物,它涉及一种植物双价表达载体的方法及其使用的通用引物。它解决了目前构建pROKII双价载体的方法需要通过中间载体更换酶切位点才能实现,步骤繁琐、构建周期长的问题。方法:一、构建单价载体;二、制备两边带有EcoR?I粘末端的35S-A-Tnos片段;三、制备两边带有EcoR?I粘末端的开环B/pROK?II;四、将步骤二和三得到的基因片段进行酶连接。通用引物为P35S-S1和Tnos-A1。本发明方法与目前构建pROKII双价载体的方法相比较,减少了连接和转化的次数具有步骤少、操作简单、构建周期短和不必更换酶切位点的优点,能够明显地提高工作效率。

    一种红皮云杉体细胞胚诱导植株再生的方法

    公开(公告)号:CN101228848B

    公开(公告)日:2010-06-02

    申请号:CN200810064037.5

    申请日:2008-02-27

    Abstract: 一种红皮云杉体细胞胚诱导植株再生的方法,它涉及一种云杉体细胞胚诱导植株再生的方法。它解决了红皮云杉常规育种周期长、繁殖率低的问题。方法:一、合子胚培养愈伤组织;二、培养体细胞胚至成熟并进行干燥;三、培养成熟体细胞胚至体细胞胚萌发;四、继续培养至根和茎的形成,即得到红皮云杉再生植株。本发明一种红皮云杉体细胞胚诱导植株再生的方法,以红皮云杉未成熟种子为外植体诱导体细胞胚,获得再生植株,使红皮云杉的育种周期缩短了,比扦插进行无性繁殖的周期提高了3~6倍,繁殖率高。

    一种构建酵母双价通用表达载体的方法

    公开(公告)号:CN101407823A

    公开(公告)日:2009-04-15

    申请号:CN200810209569.3

    申请日:2008-11-28

    Abstract: 一种构建酵母双价通用表达载体的方法,它涉及一种构建双价表达载体的方法。本发明解决了现有构建载体的方法不能构建出可以表达任意目的基因的通用载体的问题。本发明构建酵母双价通用表达载体的方法按照以下步骤进行:一、根据酵母表达载体pYES2序列分别设计引物,进行PCR扩增获得目的片段PGAL1和目的片段CYC1;二、得到质粒pMD18-PGAL1;三、获得质粒pMD18-PC;四、双酶切后回收目的片段和质粒pYES2并连接;获得酵母双价通用表达载体pYES2-PC。用本发明的方法构建出的通用双价载体能够准确表达连接的基因,只需要将目的基因片段直接连接在本发明构建的通用双价表达载体上就可以准确表达。

    多枝柽柳脱水诱导蛋白RD22基因的编码区cDNA序列

    公开(公告)号:CN100334210C

    公开(公告)日:2007-08-29

    申请号:CN200410044031.3

    申请日:2004-11-10

    Abstract: 多枝柽柳脱水诱导蛋白RD22基因的编码区cDNA序列,它属于基因工程技术领域。本发明通过克隆出抗盐能力极强的木本植物柽柳的一种盐、旱胁迫应答基因—脱水诱导蛋白RD22基因,然后,通过Northern检测和基因芯片技术检测其在旱或盐胁迫下表达情况,分析它是否与抗旱或抗盐相关。本发明的基因编码区长1170bp,编码389个氨基酸。经序列同源性BlastX分析表明,该基因与其它物种的脱水诱导蛋白基因在序列上有明显差异,与金华中棉脱水诱导蛋白序列同源性最高,为46%。应用Northern和基因芯片技术研究脱水诱导蛋白RD22基因在旱胁迫后的表达,结果发现,旱胁迫下该基因表达量增加3倍以上,为抗旱相关基因。

    不添加植物激素的刺五加培养方法

    公开(公告)号:CN1830243A

    公开(公告)日:2006-09-13

    申请号:CN200610009783.5

    申请日:2006-03-08

    Abstract: 不添加植物激素的刺五加培养方法,它涉及一种刺五加培养方法。它解决了目前人工栽培种子处理难度大、发芽率低、扦插生根率低和现有细胞培养技术使用的植物激素对人体有害的问题。不添加植物激素的刺五加培养方法按以下步骤进行:(一)15℃层积处理;(二)培养去掉外种皮的种子;(三)高温胁迫处理;(四)将停止发育的种子放回步骤二的培养环境中继续培养;(五)培养由体细胞胚发育成的幼植物体的片断或体细胞胚;(六)培养次生胚;(七)培养幼植物体,即可得到完整的刺五加植株。本发明不添加任何植物激素,安全可靠,而且技术简单,发芽速度快,增殖率高,次生胚发生率达100%。

    一种四倍体裂叶桦的高效创制方法

    公开(公告)号:CN115997683A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202310089234.7

    申请日:2023-02-09

    Abstract: 本发明公开了一种四倍体裂叶桦的高效创制方法,属于林木育种领域。本发明采用固体混培法或者浸渍法诱导培养二倍体裂叶桦外植体,得到四倍体裂叶桦;其中,固体混培法包括以二倍体裂叶桦无菌叶片、叶柄或幼茎为外植体,接种于含有质量浓度0.03%‑0.1%秋水仙素的固体培养基中处理2‑6d,得到四倍体裂叶桦;浸渍法包括以二倍体裂叶桦无菌叶片、叶柄或幼茎为外植体,浸泡于含有质量浓度为0.2%‑0.6%的无菌秋水仙素溶液中,常温黑暗下振荡处理12‑36h,摇床转速90r/min,得到四倍体裂叶桦。本发明对选育适应性及抗旱耐盐性强的多倍体裂叶桦,以及丰富东北地区的造林及园林绿化树种具有重要意义。

    一种三倍体紫雨桦的培育方法

    公开(公告)号:CN115136887A

    公开(公告)日:2022-10-04

    申请号:CN202210931061.4

    申请日:2022-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种三倍体紫雨桦的培育方法,属于林木育种领域。该方法包括:(1)白桦种子经秋水仙素诱导,培育成四倍体植株;(2)以紫雨桦和东北白桦为亲本进行杂交,获得二倍体紫雨桦植株;(3)以二倍体紫雨桦为父本,收集花粉后阴干24‑48小时,真空保存备用;(4)以四倍体白桦为母本,摘除雄花序后在上午9‑10点进行授粉;(5)授粉后继续培育,获得三倍体紫雨桦幼苗。本发明采用杂交育种与倍性育种相结合,通过叶色调查,获得三倍体紫雨桦,该新品种具有更优良的抗寒性,对于提升紫雨桦的观赏性,美化城市环境具有重要意义。

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