7α-羟基类固醇脱氢酶突变体J-1-1 △C6及其应用

    公开(公告)号:CN112322596B

    公开(公告)日:2023-01-24

    申请号:CN202011118838.2

    申请日:2020-10-19

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体J‑1‑1△C6及其应用。本发明提供一种7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是由氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的7α‑羟基类固醇脱氢酶的C‑端截短6个氨基酸所得。该突变体具有底物选择性,能够专一性催化CDCA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物,对于CA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物没有催化活性,可用于从复杂底物鸡胆粉中高效合成TUDCA,而不产生有毒物质即副产物TUCA,在特异性生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。

    苏氨酸醛缩酶、其编码基因和在屈昔多巴生物合成中的应用

    公开(公告)号:CN110592058B

    公开(公告)日:2021-11-05

    申请号:CN201910965780.6

    申请日:2019-10-12

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及L‑苏氨酸醛缩酶及其编码基因与应用,属于生物技术领域。所述L‑苏氨酸醛缩酶,为SEQ ID NO.1所示的蛋白,或将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加所获得的功能相同的蛋白。所述L‑苏氨酸醛缩酶能够以3‑/4‑位羟基取代的苯甲醛为底物,以5‑磷酸吡哆醛为辅酶,以甘氨酸为辅底物,在适当的条件和介质内进行酶催化反应,生物合成屈昔多巴(L‑threo‑DOPS),该方法的非对映选择性能达到30%。本发明具有较高选择性的L‑苏氨酸醛缩酶对于屈昔多巴生物催化具有重要的意义。

    一种富含维C的新型抗氧化泡菜加工方法

    公开(公告)号:CN112641067A

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN202010945028.8

    申请日:2020-09-10

    Applicant: 重庆大学

    Inventor: 曹恒 王伯初

    Abstract: 本发明公开了一种富含维C的新型抗氧化泡菜加工方法,包括以下重量比的原料:泡菜菜品原料和二氢杨梅素的料剂重量比在50:1~5000:1之间,包括以下步骤:1)先将上述比例的二氢杨梅素溶解在沸水里,溶解不完全,将冷却后的悬浊液倒入泡菜坛中,再向其中添加比例的食盐或泡菜盐,制得抗氧化泡菜盐水,再加入需要腌制的泡菜,对泡菜坛进行密封,并使用温度控制器对泡菜坛的温度进行控制,静置在阴凉的区域,提取发酵后的泡菜原料,测定黄酮类物质、维生素C和亚硝酸盐的含量。本发明通过在泡菜制备过程中添加黄酮类物质二氢杨梅素,使泡菜富含黄酮类物质、维生素C和亚硝酸盐,增加泡菜的抗氧化能力,制备具有抗氧化功能的新型泡菜。

    7α-羟基类固醇脱氢酶突变体J-1-1 △C6及其应用

    公开(公告)号:CN112322596A

    公开(公告)日:2021-02-05

    申请号:CN202011118838.2

    申请日:2020-10-19

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体J‑1‑1△C6及其应用。本发明提供一种7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是由氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的7α‑羟基类固醇脱氢酶的C‑端截短6个氨基酸所得。该突变体具有底物选择性,能够专一性催化CDCA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物,对于CA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物没有催化活性,可用于从复杂底物鸡胆粉中高效合成TUDCA,而不产生有毒物质即副产物TUCA,在特异性生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。

    7α-羟基类固醇脱氢酶(St-2-2)突变体

    公开(公告)号:CN111254126A

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN202010224918.X

    申请日:2020-03-26

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α-羟基类固醇脱氢酶(St-2-2)突变体。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2,3,4,5,6,7,8,9或10所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的7α-羟基类固醇脱氢酶的第255位氨基酸由Ile变为Tyr、Gln、Leu、Thr、Gly、Asn、Ser、Ala或Phe所得。所述突变体在相同底物TCDCA和NADP+的存在下,酶活分别是野生型的1.49、1.78、1.79、1.79、1.93、2.44、2.58、2.97、3.34倍,在生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。

    撒丁岛梭菌7α-羟基类固醇脱氢酶突变体R194A

    公开(公告)号:CN106434582B

    公开(公告)日:2019-10-08

    申请号:CN201610841870.0

    申请日:2016-09-22

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及一种撒丁岛梭菌7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体R194A,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的7α‑羟基类固醇脱氢酶的第194位氨基酸由Arg变为Ala所得。该突变体对底物NADP+和TCDCA的催化效率是野生型的3.34倍。本发明的R194A突变体在生物转化CDCA/TCDCA获取UDCA/TUDCA的工业生产过程中具有巨大的应用潜力。

    7α-羟基类固醇脱氢酶基因S1-a-2

    公开(公告)号:CN106676079B

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201710008509.4

    申请日:2017-01-05

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及一种7α‑羟基类固醇脱氢酶基因S1‑a‑2。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码一种7α‑羟基类固醇脱氢酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,能够催化鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成7‑酮石胆酸(7K‑LCA)、牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA),对CDCA或TCDCA的催化活性约为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的2倍,具有很大的工业应用价值。

    新的7α‑羟基类固醇脱氢酶基因S1‑a‑1

    公开(公告)号:CN106701707A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201710008510.7

    申请日:2017-01-05

    Applicant: 重庆大学

    Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及一种新的7α‑羟基类固醇脱氢酶基因S1‑a‑1。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码一种新的7α‑羟基类固醇脱氢酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,能够催化鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成7‑酮石胆酸(7K‑LCA)、牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA),其中对CDCA的催化活性约为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的5倍,对TCDCA的催化活性约为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的2.5倍多,具有巨大的工业应用价值。

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