公开(公告)号：CN116813756B

公开(公告)日：2024-07-30

申请号：CN202311007090.2

申请日：2023-08-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 孙亚妮 ,  赵芯钰 ,  张昊 ,  赵钦

IPC: C07K16/08 ,  C07K19/00 ,  C12N9/08 ,  C12N15/13 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种血清4型禽腺病毒纳米抗体及其制备方法和应用，属于病毒检测技术领域。所述血清4型禽腺病毒纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，本发明提供的抗FAdV‑4纳米抗体与辣根过氧化物酶的融合蛋白可作为检测试剂建立竞争ELISA，该方法可用于检测鸡血清中抗FAdV‑4抗体，检测方法操作简单，检测样品耗时短，不需要使用酶标二抗。简化了后续基于该方法生产ELISA商品化试剂盒的工艺，极大的降低了生产成本。因此，利用本发明公开的纳米抗体建立鸡血清中抗FAdV‑4抗体的竞争ELISA具有很好的市场应用前景。

公开(公告)号：CN110776564B

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN201911047347.0

申请日：2019-10-30

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵钦 ,  孙亚妮 ,  纪品品 ,  周恩民

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/85 ,  C07K19/00 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种抗新城疫病毒的纳米抗体NDV‑Nb4和NDV‑Nb49，氨基酸序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。还公开了由纳米抗体NDV‑Nb4与铁蛋白融合构建融合蛋白的方法，通过原核表达系统可溶性表达纳米抗体与铁蛋白的融合蛋白；以及由纳米抗体NDV‑Nb49与辣根过氧化物酶融合构建融合蛋白的方法，通过真核表达系统表达NDV‑Nb49与辣根过氧化物酶融合蛋白。还公开了一种检测新城疫病毒的方法，是以NDV‑Fe‑Nb4融合蛋白为捕获NDV的蛋白、NDV‑Nb49‑HRP融合蛋白为检测NDV的蛋白，配合用于检测NDV，该方法简便易操作，且特异性好，准确率高。

公开(公告)号：CN111171146A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010104052.9

申请日：2020-02-20

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵钦 ,  孙亚妮 ,  王坤 ,  周恩民

IPC: C07K16/10 ,  C07K16/00 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种抗H9N2亚型禽流感病毒的纳米抗体、制备方法和应用，该纳米抗体氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过原核表达技术表达了H9N2亚型禽流感病毒的核衣壳蛋白，然后将其作为免疫原免疫双峰驼，构建噬菌体库，再利用噬菌体展示技术筛选获得了1株抗H9N2核衣壳蛋白的纳米抗体，并将该纳米抗体与辣根过氧化物酶(HRP)进行融合表达，成功制备了纳米抗体与HRP的融合蛋白，将该融合蛋白应用到检测鸡血清中抗H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗体中，发现该融合蛋白构建的检测方法灵敏度高，并且具有操作简单、不需要使用二抗、检测样品耗时短等优点。

公开(公告)号：CN110257339A

公开(公告)日：2019-09-20

申请号：CN201910543875.9

申请日：2019-06-21

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵钦 ,  孙亚妮 ,  侯高鹏 ,  周恩民

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C07K19/00 ,  C12N9/08 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系，所述细胞系在中国典型培养物保藏中心的保藏号为C201981；还提供一种该细胞系的构建方法，通过该构建方法可成功将携带纳米抗体-HRP融合基因的慢病毒载体转入表达该外源基因的细胞株中，并稳定表达纳米抗体-HRP融合蛋白；还公开了由此构建方法构建的细胞系，以及该细胞系表达的融合蛋白在血清检测中的应用，具体应用于鸡血清中新城疫抗体的检测，通过本发明的细胞系培养后上清液，按效价1:1000稀释后直接检测阳性鸡血清新城疫抗体与新城疫病毒NP蛋白的结合情况，判断是否感染过新城疫病毒，此检测方法简便易操作，降低生产成本，且提高检测效率。

公开(公告)号：CN109593122A

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201910023151.1

申请日：2019-01-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵钦 ,  孙亚妮 ,  周恩民 ,  陈宜阳

IPC: C07K14/085 ,  C07K16/10 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/576 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开一种抗猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白单克隆抗体及其制备与应用，主要涉及生物技术领域，该单克隆抗体主要由杂交瘤细胞株1E4分泌，利用原核表达纯化的猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端267个氨基酸为包被抗原，针对该区域的亲和层析纯化的单克隆抗体mAb-1E4为阻断抗体，通过HRP标记的特异性单克隆抗体，使其能够通过HRP的底物TMB或DAB直接检测到该单克隆抗体，并应用于制备检测猪戊型肝炎病毒的药物中。