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公开(公告)号：CN101838677B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201010201656.1
申请日：2010-06-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明属于生物技术中的病毒检测领域，具体涉及一种虾白斑综合症病毒病诊断用核酸样品制备方法以及利用核酸样品经LAMP扩增后检测虾白斑综合症病毒的方法：取处死的新鲜的虾的组织，稍剪碎后加到缓冲液III中，快煮、离心后取上清作为核酸扩增的模板；通过LAMP扩增后，向稀释千倍至万倍后的环介导等温扩增(LAMP)产物中添加SYBR GreenI，在紫外光激发下，通过肉眼直接观察是否有被激发出的绿色荧光结果判断检测结果。本发明具有高灵敏性、高特异性、操作简便、耗时短、所需样品少、成本低等特点。
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公开(公告)号：CN102787073A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210242668.8
申请日：2012-07-13
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种构建转基因家蚕微孢子虫的方法，在家蚕微孢子感染的家蚕体腔注射脂质体包裹的转基因载体，2～4天后取蚕血淋巴加入家蚕BmN培养细胞中培养；当微孢子虫呈绿色荧光时，用昆虫培养基极度稀释，加入到细胞培养板中，选择仅有一个培养细胞呈现绿色荧光的培养孔，添加正常培养细胞培养2～4天，获得感染培养细胞；重复至少3次，取获得的感染培养细胞，匀浆破碎细胞，差速离心，纯化微孢子，感染家蚕，家蚕发病后，从感染组织纯化获得转基因家蚕微孢子。运用本发明的技术方案可以将外源基因整合进家蚕微孢子虫基因组，实现了用基因工程技术改造家蚕微孢子虫，实现调节微孢子虫基因的表达水平，为微孢子虫基因功能研究提供了方法。
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公开(公告)号：CN101418352B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN200810243140.6
申请日：2008-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 一种虾白斑综合症病毒病检测试剂盒及检测方法，该试剂盒由一套引物、DNA提取缓冲液、DNA聚合酶、环介导等温扩增反应液、阳性对照、阴性对照、甜菜碱和dNTP组成；采用本发明可以检测出待检测虾是否感染虾白斑综合症病毒；本发明利用Bst DNA酶的链置换特性，设计4条引物，识别靶序列的6个区域，在等温条件下生成大量的茎环样结构，在定性检测时不需任何特殊设备。因此具有特异性、灵敏度高和检测时间比普通PCR短的特点。
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公开(公告)号：CN102260690A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110150865.2
申请日：2011-06-07
Applicant: 溧阳市民生农业科技园有限公司 , 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种能感染茶尺蠖的重组核型多角体病毒的制备方法，包括以下步骤：(1)制备重组载体pFastBacDual-polh-helicase；(2)将重组载体pFastBacDual-polh-helicase转化进E.coliDH10BmBacmid感受态细胞内，在培养板上培养，然后通过蓝白斑筛选获得阳性菌斑，从阳性菌斑中提取重组BmBacmid-polh-helicaseDNA；(3)将上述重组BmBacmid-polh-helicaseDNA转染到家蚕培养细胞，收集培养细胞上清，获得重组病毒BmEoNPV；(4)每将重组病毒注射，纯化得到重组病毒多角体。将上述重组核型多角体病毒喷洒在茶叶树叶面上，可防止茶尺蠖对茶叶树的危害，而且该方法成本低、生产易控。
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公开(公告)号：CN101845442A
公开(公告)日：2010-09-29
申请号：CN201010161096.1
申请日：2010-04-23
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种家蚕生物反应器制备带有人白介素28A的方法，通过基因工程方法获得重组的带人白介素28A(hIL-28A)基因的家蚕Bombyx mori重组杆状病毒，并用该病毒接种家蚕幼虫或蛹，使人白介素28A在家蚕幼虫或蛹中获得高效表达。由于本发明用家蚕生物反应器生产重组人白介素28A(hIL-28A)，家蚕可食可药，表达hIL-28A的家蚕幼虫和蛹可直接冷冻干燥，表达产物无需纯化，可以直接作为口服药物使用，因此具有制备工艺简单、成本低，口服药物方便使用等优点，同时可以减少注射剂型的一些副作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101838677A
公开(公告)日：2010-09-22
申请号：CN201010201656.1
申请日：2010-06-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明属于生物技术中的病毒检测领域，具体涉及一种虾白斑综合症病毒病诊断用核酸样品制备方法以及利用核酸样品经LAMP扩增后检测虾白斑综合症病毒的方法：取处死的新鲜的虾的组织，稍剪碎后加到缓冲液III中，快煮、离心后取上清作为核酸扩增的模板；通过LAMP扩增后，向稀释千倍至万倍后的环介导等温扩增(LAMP)产物中添加SYBR GreenI，在紫外光激发下，通过肉眼直接观察是否有被激发出的绿色荧光结果判断检测结果。本发明具有高灵敏性、高特异性、操作简便、耗时短、所需样品少、成本低等特点。
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公开(公告)号：CN101418351A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810243139.3
申请日：2008-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 一种虾白斑综合症病毒病检测试剂盒及检测方法，该试剂盒由一套引物、DNA提取缓冲液、DNA聚合酶、环介导等温扩增反应液、阳性对照、阴性对照、甜菜碱和dNTP组成；采用本发明可以检测出待检测虾是否感染虾白斑综合症病毒；本发明利用Bst DNA酶的链置换特性，设计4条引物，识别靶序列的6个区域，在等温条件下生成大量的茎环样结构，在定性检测时不需任何特殊设备。因此具有特异性、灵敏度高和检测时间比普通PCR短的特点。
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公开(公告)号：CN101270366A
公开(公告)日：2008-09-24
申请号：CN200810025299.0
申请日：2008-04-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种提高昆虫转基因细胞表达外源基因的方法，将在昆虫细胞内具有活性的启动子控制的新霉素抗性基因表达盒、增强子元件和外源基因表达盒通过基因操作克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体，然后与表达转座酶的辅助质粒混合转染昆虫细胞系，通过G418的分段筛选获得转基因昆虫细胞。该转基因细胞通过细胞克隆技术，结合外源基因表达水平的实际检测获得外源基因高水平表达的工程细胞。本发明方法实现了转基因昆虫细胞高水平持续表达外源基因，表达产物无杆状病毒污染，生物安全性高，后加工完善，天然性好。
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公开(公告)号：CN101178400A
公开(公告)日：2008-05-14
申请号：CN200710190620.6
申请日：2007-11-20
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种对有机磷农药抗性野桑蚕种群的检验方法，其特征在于：首先提取待检野桑蚕的血液，使血液与含有β－乙酸萘酯的底物溶液反应，再用固兰B盐进行显色分析，当反应颜色略带紫色时，判定该野桑蚕个体对有机磷农药有抗性。本发明用于对野外害虫的抗性进行检验，具有客观的代表性；其操作方便，检验成本低，灵敏度高，检验快速，特别适合于现场检验。
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公开(公告)号：CN1687767A
公开(公告)日：2005-10-26
申请号：CN200510040059.4
申请日：2005-05-11
IPC: G01N27/447 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种家蚕成品卵中微粒子病病卵的检测方法，其特征在于：首先提取待检家蚕成品卵内的总DNA；根据家蚕微孢子虫基因的特异性序列，设计并合成一对特异性引物，二引物之间的间隔为0.5－2.0kb，以提取的待检家蚕成品卵内的总DNA为模板，进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测，当检出家蚕微孢子虫的特异性基因片段时，判定该被检家蚕成品卵为微粒子病病卵。对家蚕成品卵进行集团检测，可以确定微粒子病的病卵率。本发明可以对家蚕成品卵直接进行检测，蚕卵无需催青至孵化，检测周期短，检测灵敏度高，能够满足用种单位的需求。
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