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公开(公告)号:CN106381308A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610813661.5
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种利用外源RNA在扩展青霉休眠孢子中制造蛋白质的方法,包括扩展青霉培养和孢子收集、扩展青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击扩展青霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在扩展青霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
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公开(公告)号:CN106381307A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610813520.3
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种直接将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子的方法,包括串珠镰刀菌培养和孢子收集、串珠镰刀菌孢子预处理以及使用HDEN法电击串珠镰刀菌孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的串珠镰刀菌孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN106244617A
公开(公告)日:2016-12-21
申请号:CN201610812885.4
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法,包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的总状毛霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入总状毛霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN106148385A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610812871.2
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
IPC: C12N15/80
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种对黄曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法,包括黄曲霉培养和孢子收集、黄曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黄曲霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的黄曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入黄曲霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN106148383A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610812825.2
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80
Abstract: 本发明公开了一种不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法,包括里氏木霉培养和孢子收集、里氏木霉孢子预处理以及使用HDEN法电击里氏木霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的里氏木霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入里氏木霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN103060344A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201310031803.9
申请日:2013-01-29
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
Abstract: 本发明提供了一种梅花鹿过氧化氢酶及其制备方法,本发明提供的梅花鹿过氧化氢酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,梅花鹿过氧化氢酶基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明成功克隆得到此前未见报道的梅花鹿过氧化氢酶基因序列。通过序列比对,可以知道,梅花鹿过氧化氢酶基因在哺乳动物中是高度保守的,通过生物信息学分析,可知该基因长度适中,带有典型的过氧化氢酶结构域,对应的蛋白质序列具有较好的亲水性,适合异源重组蛋白表达,之后采用毕赤酵母表达系统,成功实现了该基因的重组表达。梅花鹿过氧化氢酶的获得无论是在工业化应用领域,还是探究其药理价值,都具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114875046A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210598346.0
申请日:2022-05-30
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种丝状真菌复制子,所述复制子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述复制子是以19种真菌基因组为模板构建宏基因组文库,转化黑曲霉孢子筛选得到,来自厚孢根霉内生菌伯克霍尔德氏菌HKI454基因组。本发明的复制子可以在黑曲霉表达系统中发挥复制功能,并且可以提供比AMA1复制子更高的稳定性,为首次在除构巢曲霉以外的真菌中发现的复制子,丰富了复制子元件库,拓展了丝状真菌利用复制子的选择多样性。
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