利用外源RNA在扩展青霉休眠孢子中制造蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN106381308A

    公开(公告)日:2017-02-08

    申请号:CN201610813661.5

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种利用外源RNA在扩展青霉休眠孢子中制造蛋白质的方法,包括扩展青霉培养和孢子收集、扩展青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击扩展青霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在扩展青霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。

    一种直接将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子的方法

    公开(公告)号:CN106381307A

    公开(公告)日:2017-02-08

    申请号:CN201610813520.3

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种直接将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子的方法,包括串珠镰刀菌培养和孢子收集、串珠镰刀菌孢子预处理以及使用HDEN法电击串珠镰刀菌孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的串珠镰刀菌孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    使用外源单链RNA在黑曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN106244630A

    公开(公告)日:2016-12-21

    申请号:CN201610812864.2

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/87 C12R1/685

    Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在黑曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括黑曲霉培养和孢子收集、黑曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黑曲霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在黑曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。

    一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法

    公开(公告)号:CN106244617A

    公开(公告)日:2016-12-21

    申请号:CN201610812885.4

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法,包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的总状毛霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入总状毛霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    一种对黄曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法

    公开(公告)号:CN106148385A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610812871.2

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种对黄曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法,包括黄曲霉培养和孢子收集、黄曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黄曲霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的黄曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入黄曲霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法

    公开(公告)号:CN106148383A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610812825.2

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80

    Abstract: 本发明公开了一种不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法,包括里氏木霉培养和孢子收集、里氏木霉孢子预处理以及使用HDEN法电击里氏木霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的里氏木霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入里氏木霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    一种梅花鹿过氧化氢酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN103060344A

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201310031803.9

    申请日:2013-01-29

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    Abstract: 本发明提供了一种梅花鹿过氧化氢酶及其制备方法,本发明提供的梅花鹿过氧化氢酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,梅花鹿过氧化氢酶基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明成功克隆得到此前未见报道的梅花鹿过氧化氢酶基因序列。通过序列比对,可以知道,梅花鹿过氧化氢酶基因在哺乳动物中是高度保守的,通过生物信息学分析,可知该基因长度适中,带有典型的过氧化氢酶结构域,对应的蛋白质序列具有较好的亲水性,适合异源重组蛋白表达,之后采用毕赤酵母表达系统,成功实现了该基因的重组表达。梅花鹿过氧化氢酶的获得无论是在工业化应用领域,还是探究其药理价值,都具有重要意义。

    一种丝状真菌复制子
    28.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114875046A

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN202210598346.0

    申请日:2022-05-30

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻 燕天鹤

    Abstract: 本发明公开了一种丝状真菌复制子,所述复制子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述复制子是以19种真菌基因组为模板构建宏基因组文库,转化黑曲霉孢子筛选得到,来自厚孢根霉内生菌伯克霍尔德氏菌HKI454基因组。本发明的复制子可以在黑曲霉表达系统中发挥复制功能,并且可以提供比AMA1复制子更高的稳定性,为首次在除构巢曲霉以外的真菌中发现的复制子,丰富了复制子元件库,拓展了丝状真菌利用复制子的选择多样性。

    内切葡聚糖酶基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN107217065A

    公开(公告)日:2017-09-29

    申请号:CN201710626659.1

    申请日:2017-07-28

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    Abstract: 本发明公开了一种内切葡聚糖酶基因及其编码蛋白,所述内切葡聚糖酶基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,该内切葡聚糖酶基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的蛋白序列。本发明内切葡聚糖酶基因编码的内切葡聚糖酶兼具良好的耐热性和抗冻融性,能够广泛应用于化妆品、食品、医药学、环境保护等领域。

    超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN107217064A

    公开(公告)日:2017-09-29

    申请号:CN201710626682.0

    申请日:2017-07-28

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    Abstract: 本发明公开了一种超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白,所述超氧化物歧化酶基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示,该超氧化物歧化酶基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的蛋白序列。本发明SOD基因编码的超氧化物歧化酶兼具良好的耐热性和抗冻融性,能够广泛应用于化妆品、食品、医药学、环境保护等领域。

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