公开(公告)号：CN116286891A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310186362.3

申请日：2023-03-02

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 毕延震 ,  方钱海 ,  任红艳 ,  顾浩 ,  陈矾 ,  周昌繁

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供了一种猪SCD基因家族成员双基因突变细胞、突变细胞系及突变动物的构建方法，涉及生物医学技术领域。本发明从猪SCD1基因中分离出1个基因编辑靶位点，从猪SCD5基因中分离出2个基因编辑靶位点，均可应用于基因编辑。统计结果表明，以上位点的打靶效率分别为90％和82％。提供的猪SCD1和SCD5双基因编辑位点为对猪硬脂酰辅酶A去饱和酶基因家族成员进行精确编辑提供了有效靶标，同时提供了一个猪SCD1和SCD5双基因突变的细胞模型，为脂质代谢及猪种肉质改良提供了可靠的研究材料，也为优良肉质猪品种的研究和开发提供了新策略。

公开(公告)号：CN113667674A

公开(公告)日：2021-11-19

申请号：CN202111002995.1

申请日：2021-08-30

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 张立苹 ,  毕延震 ,  华再东 ,  任红艳 ,  朱喆 ,  顾浩 ,  陈矾

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及生物技术和基因工程的技术领域，具体涉及一种靶向切除猪CD164基因编码区DNA的成对编辑位点、使用方法及其应用，所述编辑位点包括T1和T2两个编辑位点，所述T1和T2两个编辑位点位于猪1号染色体CD164基因编码区的2外显子区域；其中T1编辑位点染色体坐标为75441814‑75441833，编码区坐标为246‑265；T2编辑位点染色体坐标为75442009‑75442028，编码区坐标为441‑460。本发明的两个能基于CRISPR技术有效编辑猪CD164基因的靶位点，可用于Cas9介导的猪CD164基因打靶，为研究CD164基因在猪抗病育种中提供实验材料。

公开(公告)号：CN113234758A

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202110517953.5

申请日：2021-05-12

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 毕延震 ,  肖伟 ,  华再东 ,  任红艳 ,  朱喆 ,  张立苹 ,  顾浩

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/877 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及生物工程领域，特别是涉及利用PiggyBac转座酶系统构建无痕工程动物的方法。本发明利用受体基因组天然的“TTAA”四联体序列，以及修复模板上携带的PiggyBac转座酶的识别序列，将基因打靶过程中引入的选择标记基因删除，实现无残留的基因编辑，从而彻底消除生物安全隐患。由此可见，采用本发明所述PiggyBac转座酶系统能实现“无痕”打靶，解决了现有技术无法克服的瓶颈。而且本发明将CRISPR/Cas9和PiggyBac两个技术联合使用能够实现保真度100％的基因突变和无残留基因编辑，是目前生物安全技术水平最高的方法。