一种评估橡胶树白粉菌遗传转化体系转化效率的方法

    公开(公告)号:CN114540402A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210024889.1

    申请日:2022-01-11

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测橡胶树白粉菌遗传转化效率的方法,所述方法包括如下步骤:将重组丝状真菌接种至橡胶树古铜期叶片上进行培养后喷施潮霉素B进行筛选,取发病叶片连同菌丝用GUS染色液进行染色,被染成蓝色的菌丝所对应的重组丝状真菌即为转化成功的转化子。本发明提供了一种可用于转化橡胶树白粉菌等丝状真菌且可用于评估橡胶树白粉菌转化体系转化效率的重组质粒,此重组质粒携带由橡胶树白粉菌核糖体蛋白编码基因RP60启动子序列融合GUS基因序列的重组报告基因。使用此重组质粒转化橡胶树白粉菌时,可对转化后获得的转化子菌丝进行简单的GUS染色来判断报告基因是否转化成功,相比以往传统检测转化子的方法检测效率更高。

    一种用于橡胶树白粉菌遗传转化的多菌灵抗性筛选载体

    公开(公告)号:CN114540401A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210013027.9

    申请日:2022-01-06

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于橡胶树白粉菌遗传转化的多菌灵抗性筛选标记,属于生物技术领域。本发明提供了一种可用于橡胶树白粉菌等丝状真菌遗传转化的多菌灵抗性筛选载体,具体使用重组质粒转化至橡胶树白粉菌,转化成功的橡胶树白粉菌产生多菌灵抗性基因,应用此多菌灵抗性基因作为橡胶树白粉菌遗传转化筛选标记。重组质粒包含第一酶切位点、第二酶切位点、橡胶树白粉菌RP60基因启动子、β‑Tub(E198A)突变基因、终止子和抗性基因。使用此重组质粒转化橡胶树白粉菌时,可用多菌灵对转化后的转化子进行筛选,转化成功的重组白粉菌可产生多菌灵抗性。该筛选标记的开发应用解决了橡胶树白粉菌转化的筛选标记问题。

    一种橡胶树白粉菌无毒基因的筛选方法、效应蛋白及应用

    公开(公告)号:CN113999859A

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202111275789.8

    申请日:2021-10-29

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供一种橡胶树白粉菌无毒基因的筛选方法、效应蛋白及应用,该筛选方法,包括:(1)由橡胶树白粉菌基因中选取潜在效应蛋白的编码基因A;(2)构建橡胶树白粉菌效应蛋白表达载体,在胶孢炭疽菌中表达转化该白粉菌的潜在效应蛋白基因A,得炭疽菌转化子;(3)将效应蛋白表达程度高的炭疽菌转化子培养,接种至离体的橡胶叶片,测定其致病能力;若相比野生型,胶孢炭疽菌转化子的致病力下降,则表明该效应蛋白编码基因A为无毒基因。本发明的筛选方法,可直接通过不同效应蛋白基因转化子的致病力筛选出白粉菌无毒基因,实现橡胶树白粉菌无毒基因的更加快速地筛选和鉴定,有利于加强橡胶白粉病的防控以及抗病品种选育。

    一种调节作物抗性的微生物发酵肥

    公开(公告)号:CN113979797A

    公开(公告)日:2022-01-28

    申请号:CN202110811961.0

    申请日:2021-07-19

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供了一种调节作物抗性的微生物发酵肥,其由0.05~0.1wt%黄芪多糖和余量堆肥发酵物组成,所述堆肥发酵物是由质量比为(4‑7)︰(80‑90)的细菌发酵液与发酵基质混匀堆肥发酵9‑12d得到;所述发酵基质的按照质量份数计包含当归药渣5‑10份、银柴胡药渣5‑10份、半夏药渣5‑10份、豆渣30‑50份、棉粕30‑50份和水适量;所述细菌发酵液为解淀粉芽孢杆菌发酵液和沼泽红假单胞菌发酵液的混合物。本发明利用中药渣等堆肥产物添加黄芪多糖制成,各组分协同作用,能充分发挥中药渣中的活性成分、菌种和黄芪多糖的作用,有效调节作物抗性、促进作物生长及提高作物产量。

    一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥

    公开(公告)号:CN113912461A

    公开(公告)日:2022-01-11

    申请号:CN202111371830.1

    申请日:2021-11-18

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明公开了一种抗植物叶片真菌病害的叶面肥,按重量份计算,包括如下成分:丁香酚15~40份,贝莱斯芽孢杆菌HAB‑2的构树发酵液10~40份,矿源黄腐酸钾5~20份,二氧化硅1~5份,尿素5~15份,维生素C 8~20份,氨基酸4~10份,中微量元素0.2~1.0份,甘蔗蜜糖5~10份,褐藻寡糖0.2~0.8份。本发明将公丁香中提取的丁香精油丁香酚与HAB‑2的构树发酵液等其他物质进行合理配比,对番石榴果实轮纹病、香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病、柑橘青霉病、草莓炭疽病、橡胶树炭疽病的防治效果可以大大增强,能够抑制植株发病率。

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