中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法

    公开(公告)号:CN104059875B

    公开(公告)日:2016-05-18

    申请号:CN201410171766.6

    申请日:2014-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法。本发明步骤为(1)采集中华鳖的受精蛋,消毒;(2)破开受精蛋的蛋壳,将胚胎从蛋黄中剥离出来,将剥离出来的胚胎组织放在1×PBS缓冲液中清洗,然后浸泡灭菌;(3)将胚胎组织放入M199培养基中清洗4-5次,然后转移至完全培养基中并将胚胎组织剪碎得组织块,再将组织块用完全培养基清洗一次;(4)用无菌的一次性接种针均匀分散组织块于细胞瓶的内壁上,使组织块贴壁生长3-4小时,然后加入完全培养基浸没组织块,30-31℃恒温培养3天以上。本发明操作简单,培养方便,无需特定的细胞分离液,培养成功率高。

    一株中华鳖气单胞菌噬菌体及其应用

    公开(公告)号:CN104450629A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410506817.6

    申请日:2014-09-28

    Abstract: 本发明提供一种中华鳖气单胞菌噬菌体,保藏号为CGMCC:No.9623,该噬菌体核酸部分序列片段与气单胞菌噬菌体同源性达到75%以上,能对中华鳖嗜水气单胞菌形成噬菌斑,对致病性气单胞菌具有裂解作用,可用于对气单胞菌所导致的疾病采用生物疗法治疗和预防。本发明的有益效果在于:特异性强、副作用小、增殖能力强、不易产生抗性、病原菌依赖性、使用方便,对中华鳖烂脖子病和白点病等具有显著的治疗作用。采用本发明治疗中华鳖烂脖子病和白点病等能达到特异性强、副作用小、增殖能力强、不易产生抗性、病原菌依赖性、使用方便的目的。

    罗氏沼虾野田村病毒RT-LAMP-LFD检测方法及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103409555A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310305396.6

    申请日:2013-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒RT-LAMP-LFD检测试剂盒及其检测方法。该检测方法是根据GenBank公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列的保守区域设计了MrNVRT-LAMP-LDF反应系统所需引物与探针;采用本发明人配制的病毒RNA提取试剂提取MrNV病毒RNA,使用本发明建立的MrNVRT-LAMP反应体系进行检测,依据反应体系中加入的检测探针,在反应结束后利用核酸快速检测试纸判定结果。同现在该病毒的常用检测技术相比,本发明具有简便快速、特异性好、灵敏度高的特点,而且可用于生产一线的技术人员和养殖户现场使用,有利于罗氏沼虾白体病的诊断与预防。

    一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN101736073A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN200810122380.0

    申请日:2008-11-24

    Abstract: 一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测试剂盒,包括:(1)DNA提取试剂:TE缓冲液,5-15mM?Tris,0.5-1.5mM?EDTA;10-20mg/mL溶菌酶水溶液;10-20mg/mL蛋白酶K水溶液;Tris饱和酚;2-5mo1/L乙酸钠水溶液;95%乙醇;(2)PCR反应试剂管:PCR反应液49μL,包括10×PCR反应缓冲液5μL,dNTPs(10uM/L)0.5μL,Taq?DNA聚合酶(5U/μL)0.5μL,特异性寡核苷酸引物引物1、引物2、引物3、引物4,用灭菌去离子水定容。一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测方法:(1)DNA抽提,(2)PCR扩增反应,(3)被检测样品目的PCR扩增产物和电泳检验。本发明适用于水产生物致病菌的快速检测。

    罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103409556A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310305397.0

    申请日:2013-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒。本发明是根据GenBank上公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列,筛选保守区域设计了MrNV NASBA-LFD反应体系所需的引物与探针;采用本发明人配制的组织RNA提取试剂提取待检样品RNA,再利用本发明建立的MrNV NASBA反应体系进行检测,在反应结束后依据核酸快速检测试纸判定结果。与现在该病毒的常用检测技术相比,本发明具有简便快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于生产一线的技术人员和养殖户现场使用,有利于罗氏沼虾白体病的诊断预防与病原阻断。

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