-
公开(公告)号:CN106701675A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201710054441.3
申请日:2017-01-22
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: C12N5/078
CPC classification number: C12N5/0645 , C12N5/0688 , C12N2509/00
Abstract: 本发明公开了一种中华鳖肺巨噬细胞的原代培养方法,包括中华鳖完整肺巨噬细胞的分离及肺巨噬细胞的原代培养两大步骤。本发明操作简单,培养方便,培养成功率高,特别是冲洗离体肺组织,使得肺组织原代细胞分离培养容易方便,为中华鳖病毒研究提供有效的细胞介质。
-
公开(公告)号:CN104059875B
公开(公告)日:2016-05-18
申请号:CN201410171766.6
申请日:2014-04-28
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法。本发明步骤为(1)采集中华鳖的受精蛋,消毒;(2)破开受精蛋的蛋壳,将胚胎从蛋黄中剥离出来,将剥离出来的胚胎组织放在1×PBS缓冲液中清洗,然后浸泡灭菌;(3)将胚胎组织放入M199培养基中清洗4-5次,然后转移至完全培养基中并将胚胎组织剪碎得组织块,再将组织块用完全培养基清洗一次;(4)用无菌的一次性接种针均匀分散组织块于细胞瓶的内壁上,使组织块贴壁生长3-4小时,然后加入完全培养基浸没组织块,30-31℃恒温培养3天以上。本发明操作简单,培养方便,无需特定的细胞分离液,培养成功率高。
-
公开(公告)号:CN104278077B
公开(公告)日:2016-03-23
申请号:CN201410398246.9
申请日:2014-08-14
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种高通量快速筛选罗氏沼虾免疫增强剂的方法。本发明包括待筛选免疫增强剂的处理、罗氏沼虾血淋巴细胞的采集与培养以及罗氏沼虾非特异性免疫指标的检测与分析三大步骤。本发明能够在体外快速、高通量的进行罗氏沼虾免疫增强剂的筛选。
-
公开(公告)号:CN104450629A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410506817.6
申请日:2014-09-28
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 本发明提供一种中华鳖气单胞菌噬菌体,保藏号为CGMCC:No.9623,该噬菌体核酸部分序列片段与气单胞菌噬菌体同源性达到75%以上,能对中华鳖嗜水气单胞菌形成噬菌斑,对致病性气单胞菌具有裂解作用,可用于对气单胞菌所导致的疾病采用生物疗法治疗和预防。本发明的有益效果在于:特异性强、副作用小、增殖能力强、不易产生抗性、病原菌依赖性、使用方便,对中华鳖烂脖子病和白点病等具有显著的治疗作用。采用本发明治疗中华鳖烂脖子病和白点病等能达到特异性强、副作用小、增殖能力强、不易产生抗性、病原菌依赖性、使用方便的目的。
-
公开(公告)号:CN104273345A
公开(公告)日:2015-01-14
申请号:CN201410398725.0
申请日:2014-08-14
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种罗氏沼虾用复合免疫增强剂及其应用,罗氏沼虾用复合免疫增强剂按重量百分比计,由以下组分混合制成:银耳多糖20-30%,黄芩苷5-12%,茶树菇多糖30-40%,左旋咪唑5-13%,维生素C15-30%。本发明原材料来源稳定、广泛,成本低,无毒副作用,且在自然条件下可降解,不会在虾体内残留,能够增强罗氏沼虾的非特异性免疫机能,还能提高罗氏沼虾的生长能力。
-
公开(公告)号:CN103409555A
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201310305396.6
申请日:2013-07-19
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒RT-LAMP-LFD检测试剂盒及其检测方法。该检测方法是根据GenBank公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列的保守区域设计了MrNVRT-LAMP-LDF反应系统所需引物与探针;采用本发明人配制的病毒RNA提取试剂提取MrNV病毒RNA,使用本发明建立的MrNVRT-LAMP反应体系进行检测,依据反应体系中加入的检测探针,在反应结束后利用核酸快速检测试纸判定结果。同现在该病毒的常用检测技术相比,本发明具有简便快速、特异性好、灵敏度高的特点,而且可用于生产一线的技术人员和养殖户现场使用,有利于罗氏沼虾白体病的诊断与预防。
-
公开(公告)号:CN102352366B
公开(公告)日:2013-08-14
申请号:CN201110296487.9
申请日:2011-09-28
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: C12N15/40
Abstract: 罗氏沼虾双顺反子病毒基因组全序列及其应用,属于病毒基因组学技术领域。本发明提供了罗氏沼虾双顺反子病毒基因组全序列如SEQIDNO:1所示,并且本发明提供了罗氏沼虾双顺反子病毒特异性的引物、探针或试剂盒。本发明为检测MRDV、研究MRDV感染途径等目的奠定可靠的基础。
-
公开(公告)号:CN101736073A
公开(公告)日:2010-06-16
申请号:CN200810122380.0
申请日:2008-11-24
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测试剂盒,包括:(1)DNA提取试剂:TE缓冲液,5-15mM?Tris,0.5-1.5mM?EDTA;10-20mg/mL溶菌酶水溶液;10-20mg/mL蛋白酶K水溶液;Tris饱和酚;2-5mo1/L乙酸钠水溶液;95%乙醇;(2)PCR反应试剂管:PCR反应液49μL,包括10×PCR反应缓冲液5μL,dNTPs(10uM/L)0.5μL,Taq?DNA聚合酶(5U/μL)0.5μL,特异性寡核苷酸引物引物1、引物2、引物3、引物4,用灭菌去离子水定容。一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测方法:(1)DNA抽提,(2)PCR扩增反应,(3)被检测样品目的PCR扩增产物和电泳检验。本发明适用于水产生物致病菌的快速检测。
-
公开(公告)号:CN108950024A
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201711121942.5
申请日:2017-11-14
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/085
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种中华鳖细菌性腮腺炎病原菌的LAMP检测试剂盒及检测引物,包括特异性引物、反应缓冲液、Bst DNA聚合酶及荧光染料,所述特异性引物由外引物、内引物及环引物组成。本发明试剂盒特异性强,灵敏度高,操作便捷,弥补现在中华鳖养殖过程中腮腺炎高发,而病原无法确认的现状,适合中华鳖细菌性腮腺炎病的筛查与预防。
-
公开(公告)号:CN103409556A
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201310305397.0
申请日:2013-07-19
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒。本发明是根据GenBank上公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列,筛选保守区域设计了MrNV NASBA-LFD反应体系所需的引物与探针;采用本发明人配制的组织RNA提取试剂提取待检样品RNA,再利用本发明建立的MrNV NASBA反应体系进行检测,在反应结束后依据核酸快速检测试纸判定结果。与现在该病毒的常用检测技术相比,本发明具有简便快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于生产一线的技术人员和养殖户现场使用,有利于罗氏沼虾白体病的诊断预防与病原阻断。
-
-
-
-
-
-
-
-
-