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公开(公告)号：CN110951706A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201910871261.3
申请日：2019-09-16
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型重组R-ω-转氨酶及其高活力突变体在催化西他列汀前体酮不对称合成西他列汀中的应用。所述重组R-ω-转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第60、113、178、233、146、214或186中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明提供了具有高活性、高立体选择性的新型R-ω-TA突变体，对于实现西他列汀生物催化制备技术的自主化、国产化具有里程碑意义，可以改变目前不对称合成西他列汀过程中出现的酶源单一的技术垄断局面。
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公开(公告)号：CN110904087A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911383972.2
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第409位和(5)第462位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的差向异构酶及其突变体，以及其在制备塔格糖(D-tagatose)中的应用。该突变体具有高最适反应温度80℃，解决了现有酶无法在高温生产D-tagatose的技术难题。使用本突变体生产D-tagatose，底物浓度为600g/L时，产物得率最高可达79.7％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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公开(公告)号：CN110904066A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911309350.5
申请日：2019-12-18
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种重组R-ω-转氨酶及突变体，以及其在不对称合成西他列汀中的应用。本发明筛选新型R-ω-转氨酶，并与现有的高效转氨酶重组，获得的重组体的氨基酸序列如SEQ ID:15所示，其突变体是将SEQ ID:15所示的氨基酸序列的第71、135、或292中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的，最佳的R-ω-转氨酶突变株的氨基酸序列如SEQ ID:17所示，对应的核苷酸序列如SEQ ID:18所示。本发明提供了具有更高活性(582.4U/g)和立体选择性(e.e.值99.9％)的R-ω-TA突变体，可催化500mM底物转化为西他列汀，转化率高达99％，对于提升西他列汀生物催化制备技术具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110862980A
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201911204720.9
申请日：2019-11-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体，及其在微生物催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖中的应用。所述D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的D-阿洛酮糖3-差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度85℃，解决了现有酶无法在高温生产D-psicose的技术难题。使用本突变体生产D-psicose，产物得率最高可达40.1％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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