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公开(公告)号:CN102676471A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201110426952.6
申请日:2011-12-17
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明涉及一种重组鸡白细胞介素18(Interleukin-18,IL-18)与新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)融合蛋白(chIL-18-HN融合蛋白)的制备方法和应用。该融合蛋白为鸡IL-18(chIL-18)蛋白和新城疫病毒HN蛋白通过柔性Linker肽融合而成,编码该融合蛋白的DNA序列插入表达载体pPICZαA,电转化酵母菌X-33,获得高效表达重组chIL-18-HN融合蛋白的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的重组chIL-18-HN融合蛋白,该重组融合蛋白可作为新城疫新型基因工程疫苗,也可作为新城疫常规疫苗的新型免疫佐剂。本发明的chIL-18-HN融合蛋白经动物免疫实验证实,安全性好,无毒副作用,能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN101962625A
公开(公告)日:2011-02-02
申请号:CN201010159879.6
申请日:2010-04-29
Applicant: 河南科技大学
IPC: C12N1/20 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明涉及一种不含抗性标记的猪霍乱沙门氏菌基因缺失突变菌株SalmonellacholeraesuisC7821,其保藏编号为CCTCCNO:M2010102;同时还涉及一种由该菌株制备而成的猪霍乱沙门氏菌基因缺失疫苗。本发明的不含抗性标记猪霍乱沙门氏菌基因缺失突变菌株,其基因工程菌株衍生于猪霍乱沙门氏菌C78-2株(购自中国兽医药品监察所国家兽医微生物保藏中心商业菌株)。所述的猪霍乱沙门氏菌基因缺失突变菌株其主要毒力调节基因crp缺失了320bp,导致该细菌不能从哺乳动物中摄取cAMP,生长比较缓慢,且毒力大大降低,因而具有很高的安全性。经动物试验证实,该基因缺失突变菌株具有很好的免疫保护力。本发明制备的基因缺失疫苗可以刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌同源野毒株的保护性免疫反应,有效防止猪霍乱沙门氏菌的感染。
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公开(公告)号:CN109055305B
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN201811081966.7
申请日:2018-09-17
Applicant: 河南科技大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 本发明涉及一种奶牛肝干细胞的分离提取方法,属于细胞工程技术领域。本发明通过优化灌流法的操作步骤,结合Percoll液分离技术,建立了一种简便易行,提取效率高的奶牛肝干细胞分离提取方法。该方法用时短,可以减少离体组织细胞暴露在缺血缺氧环境中的时间,提高细胞活力达90%以上,分离得到的肝干细胞具有双向分化潜能,为解决体外研究奶牛疾病过程中所需的肝干细胞来源问题及奶牛营养代谢病发病机制提供支持。
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公开(公告)号:CN111937808A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN202010687578.4
申请日:2020-07-16
Applicant: 河南科技大学
IPC: A01K67/02 , A23K50/30 , A23K20/105 , A23K20/163
Abstract: 本发明涉及一种哺乳仔猪的生产方法,属于脊椎动物养殖技术领域。本发明的生产方法包括以下步骤:在哺乳仔猪的基础日粮中添加主要成分为甘草多糖和甘草酸的添加剂,供哺乳仔猪自由采食;甘草多糖的添加量为基础日粮质量的0.275~2.95%;添加剂中甘草多糖与甘草酸的质量比为5~16:1。本发明的生产方法,在哺乳仔猪的基础日粮中添加主要成分为甘草多糖和甘草酸的添加剂,供哺乳仔猪自由采食,能够提高仔猪的采食量,并提高血糖水平和血清抗氧化能力,从而提高哺乳仔猪转群时的体重,从整体上提高仔猪的生产性能,同时还能够提高哺乳仔猪的抗病能力,降低仔猪的死亡率,增强机体的抗氧化能力。
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公开(公告)号:CN104193804B
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201410361045.1
申请日:2014-07-25
Applicant: 河南科技大学
IPC: C07K7/08 , A61K38/10 , A23K20/147 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白特异性结合肽及其应用,属于动物病毒分子生物学技术领域。本发明通过噬菌体随机12肽库筛选得到鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白特异性结合肽,其氨基酸序列为:THRSWQGNSWYM。该特异性结合肽可抑制鸭坦布苏病毒HN1株在鸭胚成纤维细胞的增殖,在不同浓度下均能显著下调鸭坦布苏病毒在鸭胚成纤维细胞中的病毒拷贝数,同时显著降低鸭坦布苏病毒在鸭胚成纤维细胞中的病毒滴度,而其本身对鸭胚成纤维细胞的增殖无明显影响。鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白特异性结合肽在制备抗鸭坦布苏病毒病的药物或饲料添加剂中具有良好的应用前景,可用于鸭坦布苏病毒病的防治。
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公开(公告)号:CN104130313B
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201410215924.3
申请日:2014-05-21
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了一种法氏囊活性肽BPP?II特异性结合肽及其应用,属于蛋白质多肽技术领域。法氏囊活性肽BPP?II特异性结合肽的氨基酸序列为:短肽1:QSLPSPLWIQQS,短肽2:DRMPDSAWTTRK,短肽3:ALWPPNLHAWVP。本发明以BPP?II?BSA融合蛋白作为靶分子,通过噬菌体随机12肽库筛选,结合ELISA鉴定和竞争抑制试验,获得与BPP?II特异性结合的噬菌体,进行序列测定,人工合成BPP?II特异性结合肽。由此筛选得到的结合肽能与法氏囊活性肽BPP?II特异性结合,且在一定浓度下抑制BPP?II对小鼠WEHI?231B淋巴瘤细胞增殖活性,在制备抑制法氏囊活性肽BPP?II抗肿瘤细胞增殖的药物方面具有良好的应用前景,为BPP?II抑制剂的研究开发及应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN104140463B
公开(公告)日:2016-05-18
申请号:CN201410320105.5
申请日:2014-07-07
Applicant: 河南科技大学
IPC: C07K14/435 , A61K38/17 , A61P31/04 , A23K20/147 , A23K50/75
Abstract: 本发明公开了一种类Metalnikowin抗菌肽及其应用,属于分子生物学技术领域。类Metalnikowin抗菌肽由23个氨基酸组成,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,分子量大小为2742.17Da。该抗菌肽能够抑制鸡大肠杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和巴氏杆菌等细菌的生长,与青霉素、链霉素、头孢唑啉钠、阿奇霉素等抗生素相比,抑菌效果相对较好,与Metalnikowin I、Metalnikowin IIA、Metalnikowin IIB等常规的Metalnikowin抗菌肽相比,具有更强的抑菌活性。该抗菌肽对沙门氏菌的最小抑菌浓度为312.5μg/mL,热稳定性良好,还能促进雏鸡增重,在抗菌性药物研制和畜牧业发展中具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104140458B
公开(公告)日:2016-05-18
申请号:CN201410320218.5
申请日:2014-07-07
Applicant: 河南科技大学
CPC classification number: Y02A50/473 , Y02A50/481
Abstract: 本发明公开了一种类天蚕素抗菌肽及其应用,属于分子生物学技术领域。类天蚕素抗菌肽由31个氨基酸组成,其分子量为3833.7Da。该抗菌肽能够抑制金黄色葡萄球菌、禽多杀性巴氏杆菌、鸡沙门氏菌和鸡大肠杆菌等细菌的生长,与青霉素、链霉素、头孢唑啉钠、阿奇霉素等常用抗生素相比,抑菌效果相对较好,与Cecropin B、Cecropin A、Cecropin P1等常规的天蚕素抗菌肽相比,具有更强的抑菌活性。该抗菌肽对鸡沙门氏菌的最小抑菌浓度为625μg/mL,同时具有良好的热稳定性,在抗菌性药物的研究开发中具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN102690319B
公开(公告)日:2015-05-13
申请号:CN201110406602.3
申请日:2011-12-08
Applicant: 河南科技大学
IPC: C07K1/14
Abstract: 本发明涉及一种生物被膜状态下猪链球菌总蛋白的提取方法,包括以下步骤:(1)对处于生物被膜状态下猪链球菌的处理;(2)步骤(1)得到的清洗的菌体细胞以蔗糖缓冲液重悬,每毫升缓冲液中添加变溶菌素,在36.5—37.5℃的温度下孵育;(3)离心8—15min收集处于原生质体的细胞,以超声缓冲液重悬细胞,加入蛋白酶抑制剂, 冰浴中超声破碎共60-100个循环;(4)随后在15-32℃的温度下孵育10-60min;(5)蛋白上清液加入5-15%TCA后冰浴;用预冷的丙酮洗蛋白,离心收集总蛋白,室温条件下干燥收集到的总蛋白,即获得所述细菌总蛋白。本发明的方法可广泛应用于各种处于生物被膜状态下细菌总蛋白的提取,特别是对于细菌生物被膜状态下细菌蛋白组学研究中,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN104193805A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410361073.3
申请日:2014-07-25
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白抑制肽及其应用,属于动物病毒分子生物学技术领域。本发明通过基因工程方法获得DTMUV囊膜E蛋白,并以DTMUV HN1株E蛋白作为靶标,利用噬菌体随机12肽库筛选得到鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白抑制肽,其氨基酸序列为:HWSTRQGSTRWN。该抑制肽可抑制鸭坦布苏病毒在鸭胚成纤维细胞的增殖,在不同浓度下均能显著下调DTMUV在鸭胚成纤维细胞中的病毒拷贝数,同时显著降低DTMUV在鸭胚成纤维细胞中的病毒滴度,而其本身对鸭胚成纤维细胞的增殖无明显影响。鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白抑制肽在制备抗鸭坦布苏病毒病的药物或饲料添加剂方面具有良好的应用前景,可用于鸭坦布苏病毒病的防治。
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