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公开(公告)号：CN112094794A
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN202011015129.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产MTSase和MTHase的方法及应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得地衣芽孢杆菌来源的鼠李糖诱导启动子和古细菌嗜热硫化叶菌来源的MTSase、MTHase编码基因，并构建重组质粒pBSL‑Prha‑MTSase和pBSL‑Prha‑MTHase；将两个重组质粒分别转化至地衣芽孢杆菌，得到两种重组地衣芽孢杆菌；以两种重组地衣芽孢杆菌为混合发酵菌种，利用鼠李糖诱导发酵生产MTSase和MTHase。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主，以发酵原料中不常用的鼠李糖作为诱导剂，实现MTSase和MTHase的重组表达，且菌株生长迅速，产酶水平高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN108355618B
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN201810161548.2
申请日：2018-02-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种牛来源透明质酸酶的亲和介质，由亲和配体和层析介质连接而成，较佳地，所述亲和配体是6‑Chloromethyluracil与2‑Aminobenzimi‑dazole的改造分子，所述层析介质是Sepharose；本发明还提供了上述牛来源透明质酸酶的亲和介质的合成方法，以及利用上述的亲和介质吸附牛来源透明质酸酶的方法，利用本发明的亲和介质可以特异性吸附并纯化牛来源透明质酸酶，有较大的应用推广潜力。
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公开(公告)号：CN107287144B
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201710591287.3
申请日：2017-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞，所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞的制备方法为：首先经过重组过表达获得一种L‑谷氨酸氧化酶，然后再对枯草芽孢杆菌内源谷氨酸分解途径进行代谢工程改造，最后改造了枯草芽孢杆菌对谷氨酸转运途径，制得所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞，即重组枯草芽孢杆菌。本发明为参与细胞内源代谢的全细胞转化系统的构建及改良提供了实验依据，为利用枯草芽孢杆菌全细胞高效转化L‑谷氨酸生产α‑酮戊二酸提供借鉴。
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公开(公告)号：CN110343628A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201811547621.6
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/16 , C05F11/08 , C12R1/07 , C12R1/01 , C12R1/125 , C12R1/10 , C12R1/25 , C12R1/23 , C12R1/865 , C12R1/38
Abstract: 本发明公开了一种包含乙醇假丝酵母的微生物菌剂，所述微生物菌剂的制备方法包括如下步骤：(1)将预混合固体发酵培养基用水充分溶解；(2)在步骤(1)制得的发酵液中加入0.01～1‰预复配的固体微生物复合菌剂，用氢氧化钠调节pH 5～8，搅拌均匀并用盖子将容器盖好密封；(3)在25～40℃的温度下发酵5～9天，最后添加10～30wt％的玉米生化黄腐酸，即得所述微生物菌剂。本发明微生物菌剂组成稳定、通用性强，在水果、蔬菜、粮食作物的种植方面具有良好的应用效果，便于大规模使用。
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公开(公告)号：CN110029104A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910374728.3
申请日：2019-05-07
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种适用于发酵过程中地衣芽孢杆菌RNA的提取方法，该方法在确定了不同发酵时期菌体收集比例的情况下，结合了大肠杆菌等常见微生物的普通RNA试剂盒(上海生工RNA提取试剂盒、BioFlux RNA提取试剂盒、TaKaRa RNA提取试剂盒、杭州宝赛生物RNA提取试剂盒等)提取法和传统手提RNA法，能够显著提高地衣芽孢杆菌RNA提取质量，而且RNA提取所需菌液液少(50-300μL)；提取的RNA具有纯度高、浓度适中、稳定性高等优点，能够充分满足RT-PCR、RT-qPCR等下游应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109628519A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910030583.5
申请日：2019-01-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P13/20 , C12P41/001
Abstract: 本发明公开了一种酶法拆分制备N‑甲基‑D‑天冬氨酸的方法，所述方法包括如下步骤：(1)将Thermomicrobium roseum肌氨酸氧化酶基因构建于pMA5‑YwbN‑trsox质粒，并转化Bacillus subtilis WB600细胞中进行分泌性表达；(2)将转入pMA5‑YwbN‑trsox基因质粒的Bacillus subtilis WB600细胞进行发酵，获得的培养液上清与N‑甲基‑DL‑天冬氨酸溶液混合，针对N‑甲基‑L‑天冬氨酸进行具有手性选择性的生物催化；(3)采用等电点结晶法分离得到N‑甲基‑D天冬氨酸。
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公开(公告)号：CN109182242A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811119388.1
申请日：2018-09-25
Applicant: 江南大学 , 中国人民解放军军事科学院
CPC classification number: C12N9/16 , C12N15/65 , C12N15/75 , C12Y301/08001
Abstract: 本发明公开了一种异源表达磷酸三酯酶的重组枯草芽孢杆菌，所述重组枯草芽孢杆菌的制备方法包括如下步骤：(1)确定磷酸三酯酶的基因编码；(2)将步骤(1)确定的基因插入pHY-ZL，获得重组表达载体；(3)将重组表达载体转化到宿主枯草芽孢杆菌并在宿主菌中表达所述磷酸三酯酶基因。本发明重组枯草芽孢杆菌能够可溶性分泌表达磷酸三酯酶，该酶可水解多种有机磷化合物，解决了有机磷水解酶底物特异性的制约，其对有机磷化合物的降解率大大提高；同时，所得重组酶是由食品安全菌(GRAS)枯草芽孢杆菌分泌所得，扩大了其应用领域。
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公开(公告)号：CN104630258B
公开(公告)日：2018-08-14
申请号：CN201510005035.9
申请日：2015-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种整合型酿酒酵母基因表达系统，包括一种表达载体，所述表达载体从5’‑3’依次包括以下可操作性元件：pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。所述酵母为酿酒酵母。本发明的表达载体可实现在酿酒酵母中的整合型稳定表达，对酿酒酵母的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN108355618A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810161548.2
申请日：2018-02-27
Applicant: 江南大学
CPC classification number: B01J20/24 , B01D15/3814 , B01J20/22 , B01J20/28002
Abstract: 本发明提供了一种牛来源透明质酸酶的亲和介质，由亲和配体和层析介质连接而成，较佳地，所述亲和配体是6-Chloromethyluracil与2-Aminobenzimi-dazole的改造分子，所述层析介质是Sepharose；本发明还提供了上述牛来源透明质酸酶的亲和介质的合成方法，以及利用上述的亲和介质吸附牛来源透明质酸酶的方法，利用本发明的亲和介质可以特异性吸附并纯化牛来源透明质酸酶，有较大的应用推广潜力。
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公开(公告)号：CN104862375B
公开(公告)日：2018-06-19
申请号：CN201510324346.1
申请日：2015-06-12
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
IPC: C12Q1/40
CPC classification number: C12Q1/40
Abstract: 糊精分子量特征在检测淀粉液化效果上的应用，具体步骤如下：(1)在待测淀粉液化液中分离制备不同分子量分布的糊精组分；(2)以步骤(1)制备的糊精组分为底物，进行糖化酶的酶促反应动力学实验，比较不同分子量糊精组分的Km值，以亲和力最高即Km值最小的底物分子量特征为评价指标，评价淀粉质原料液化效果。本发明考察糖化酶催化特性与糊精结构的关系，能够全面科学表征淀粉液化程度，实现淀粉质原料液化过程精细化控制；改善淀粉液化质量，进而提高糖化效率，提升以淀粉质为原料的粗料发酵模式，同时有助于带动淀粉深加工产业；凡提及基于糊精分子量特征评价液化效果的方法，均适用本发明技术。
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