一种硅基化合物固定化酶生物催化剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN112708615B

    公开(公告)日:2023-02-28

    申请号:CN202110201901.7

    申请日:2021-02-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种硅基化合物固定化酶生物催化剂的制备方法,属于固定化酶生物催化剂制备计技术领域。本发明以硅基化合物为载体,脂肪酶为固定化对象,共价结合法为固定方法,利用硅基化合物表面富含羟基基团,与富含乙氧基基团的交联剂进行共价结合,交联剂的另一端则是可以与脂肪酶上的活性基团进行共价结合以达到固定化酶的效果。本发明制备固定化酶催化剂具有较好的分散性、较高的载酶量和较好的酶活。本发明还可以适用漆酶、辣根过氧化物酶等多种酶的固定化。

    一种调控目的基因表达和CCA效应的元件

    公开(公告)号:CN111690676B

    公开(公告)日:2022-12-30

    申请号:CN202010597814.3

    申请日:2020-06-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种调控目的基因表达和CCA效应的元件,属于生物工程技术领域。所述元件包括载体、启动子和靶基因结合序列,所述靶基因结合序列为AGCTTT‑Y‑AAAGCT或AAAGCT‑Y‑AGCTTT(Y代表长度为0‑14bp的核苷酸序列)。含有AGCTTT‑Y‑AAAGCT的元件,响应葡萄糖存在时的CCA效应,甘油存在时的CCR效应;含AAAGCT‑Y‑AGCTTT的元件,响应葡萄糖存在时的CCR效应,甘油存在时的CCA效应。本发明为后续地衣芽孢杆菌表达原件的开发提供了高效的、靶向的分子手段。

    一种新型组成型启动子、重组地衣芽孢杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN112795569B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202110200998.X

    申请日:2021-02-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 发明公开了一种新型组成型启动子、重组地衣芽孢杆菌及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得Bacillus licheniformis来源的强组成型启动子P2以及Thermobifida fusca NTU22来源的麦芽三糖淀粉酶目的基因,构建重组质粒pHY‑P2‑tfa,并转化至地衣芽抱杆菌Bacillus licheniformis,得到重组地衣芽抱杆菌。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主,利用新型高活性启动子P2实现麦芽三糖淀粉酶的重组表达。混合碳源麦芽糊精60g/L,葡萄糖10g/L以及42℃的发酵条件更有利于产酶,重组菌发酵的最高酶活达到578.47U/mL。

    一种产MTSase和MTHase的方法及应用

    公开(公告)号:CN112094794B

    公开(公告)日:2022-08-02

    申请号:CN202011015129.1

    申请日:2020-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产MTSase和MTHase的方法及应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得地衣芽孢杆菌来源的鼠李糖诱导启动子和古细菌嗜热硫化叶菌来源的MTSase、MTHase编码基因,并构建重组质粒pBSL‑Prha‑MTSase和pBSL‑Prha‑MTHase;将两个重组质粒分别转化至地衣芽孢杆菌,得到两种重组地衣芽孢杆菌;以两种重组地衣芽孢杆菌为混合发酵菌种,利用鼠李糖诱导发酵生产MTSase和MTHase。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主,以发酵原料中不常用的鼠李糖作为诱导剂,实现MTSase和MTHase的重组表达,且菌株生长迅速,产酶水平高,生产成本低。

    一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A

    公开(公告)号:CN112062821B

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202011015122.X

    申请日:2020-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A,属于蛋白质工程技术领域。本发明对从地衣芽孢杆菌基因组中克隆的CcpA基因进行突变,得到一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码其的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了包含编码上述CcpA突变体K31A基因的重组表达载体,并将构建的表达载体转化到地衣芽孢杆菌CcpA基因缺陷株中获得重组地衣芽孢杆菌。所获得的重组地衣芽孢杆菌能够明显改变由于葡萄糖存在而产生的碳分解代谢阻遏现象,能够降低地衣芽孢杆菌对木糖的偏好性。

    一种地衣芽孢杆菌的基因编辑方法及应用

    公开(公告)号:CN108929882B

    公开(公告)日:2021-08-03

    申请号:CN201810884050.9

    申请日:2018-08-06

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种地衣芽孢杆菌的基因编辑方法及应用,实现了基因敲除及基因敲入,属于基因工程领域。该方法首先借助温度敏感型质粒PNZT1为载体构建温敏敲除(入)质粒;然后将敲除(入)质粒转化地衣芽孢杆菌经过变温传代实现敲除(入)盒同源替换靶基因;最后导入FLP重组酶表达质粒介导抗性基因的回收。本发明首次在地衣芽孢杆菌基因编辑中运用FLP/FRT重组系统并实现了无标记基因敲除及基因敲入,为地衣芽孢杆菌的代谢工程改造提供了有效的技术手段。

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