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公开(公告)号:CN115851564A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202211337810.7
申请日:2022-10-28
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/60 , C12N15/75 , C12N15/52 , C12P7/56 , C12P7/18 , C12P7/54 , B01D53/84 , B01D53/62 , C12R1/10
Abstract: 本发明公开了一种固定二氧化碳的地衣芽孢杆菌细胞,属于发酵工程领域。本发明通过在地衣芽孢杆菌内分别过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶与乙酰辅酶A羧化酶,构建了两株重组菌。在厌氧发酵条件下,过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的重组菌相较于对照菌株,产物乳酸、2,3‑丁二醇、乙酸的转化率分别提高了19.6%、34.7%、51.1%;过表达乙酰辅酶A羧化酶的重组菌三种产物的转化率分别提高了22.9%、14.8%、75%。本发明构建的重组菌对于减少二氧化碳排放,增加对碳的利用具有实际意义。
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公开(公告)号:CN112708615B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN202110201901.7
申请日:2021-02-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N11/14
Abstract: 本发明提供了一种硅基化合物固定化酶生物催化剂的制备方法,属于固定化酶生物催化剂制备计技术领域。本发明以硅基化合物为载体,脂肪酶为固定化对象,共价结合法为固定方法,利用硅基化合物表面富含羟基基团,与富含乙氧基基团的交联剂进行共价结合,交联剂的另一端则是可以与脂肪酶上的活性基团进行共价结合以达到固定化酶的效果。本发明制备固定化酶催化剂具有较好的分散性、较高的载酶量和较好的酶活。本发明还可以适用漆酶、辣根过氧化物酶等多种酶的固定化。
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公开(公告)号:CN111690676B
公开(公告)日:2022-12-30
申请号:CN202010597814.3
申请日:2020-06-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控目的基因表达和CCA效应的元件,属于生物工程技术领域。所述元件包括载体、启动子和靶基因结合序列,所述靶基因结合序列为AGCTTT‑Y‑AAAGCT或AAAGCT‑Y‑AGCTTT(Y代表长度为0‑14bp的核苷酸序列)。含有AGCTTT‑Y‑AAAGCT的元件,响应葡萄糖存在时的CCA效应,甘油存在时的CCR效应;含AAAGCT‑Y‑AGCTTT的元件,响应葡萄糖存在时的CCR效应,甘油存在时的CCA效应。本发明为后续地衣芽孢杆菌表达原件的开发提供了高效的、靶向的分子手段。
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公开(公告)号:CN112795569B
公开(公告)日:2022-11-18
申请号:CN202110200998.X
申请日:2021-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 发明公开了一种新型组成型启动子、重组地衣芽孢杆菌及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得Bacillus licheniformis来源的强组成型启动子P2以及Thermobifida fusca NTU22来源的麦芽三糖淀粉酶目的基因,构建重组质粒pHY‑P2‑tfa,并转化至地衣芽抱杆菌Bacillus licheniformis,得到重组地衣芽抱杆菌。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主,利用新型高活性启动子P2实现麦芽三糖淀粉酶的重组表达。混合碳源麦芽糊精60g/L,葡萄糖10g/L以及42℃的发酵条件更有利于产酶,重组菌发酵的最高酶活达到578.47U/mL。
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公开(公告)号:CN113293106B
公开(公告)日:2022-09-09
申请号:CN202110785215.9
申请日:2021-07-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种子囊菌纲Filobasidium属的真菌,所述真菌已于2021年4月14日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏,保藏编号为CGMCC No.22187。本发明菌株能够耐受高浓度的香紫苏醇且能以其为原料产生香紫苏内酯及其类似物。
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公开(公告)号:CN110343628B
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN201811547621.6
申请日:2018-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/16 , C05F11/08 , C12R1/07 , C12R1/01 , C12R1/125 , C12R1/10 , C12R1/25 , C12R1/23 , C12R1/865 , C12R1/38
Abstract: 本发明公开了一种包含乙醇假丝酵母的微生物菌剂,所述微生物菌剂的制备方法包括如下步骤:(1)将预混合固体发酵培养基用水充分溶解;(2)在步骤(1)制得的发酵液中加入0.01~1‰预复配的固体微生物复合菌剂,用氢氧化钠调节pH 5~8,搅拌均匀并用盖子将容器盖好密封;(3)在25~40℃的温度下发酵5~9天,最后添加10~30wt%的玉米生化黄腐酸,即得所述微生物菌剂。本发明微生物菌剂组成稳定、通用性强,在水果、蔬菜、粮食作物的种植方面具有良好的应用效果,便于大规模使用。
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公开(公告)号:CN112094794B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN202011015129.1
申请日:2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产MTSase和MTHase的方法及应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得地衣芽孢杆菌来源的鼠李糖诱导启动子和古细菌嗜热硫化叶菌来源的MTSase、MTHase编码基因,并构建重组质粒pBSL‑Prha‑MTSase和pBSL‑Prha‑MTHase;将两个重组质粒分别转化至地衣芽孢杆菌,得到两种重组地衣芽孢杆菌;以两种重组地衣芽孢杆菌为混合发酵菌种,利用鼠李糖诱导发酵生产MTSase和MTHase。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主,以发酵原料中不常用的鼠李糖作为诱导剂,实现MTSase和MTHase的重组表达,且菌株生长迅速,产酶水平高,生产成本低。
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公开(公告)号:CN112062821B
公开(公告)日:2022-02-01
申请号:CN202011015122.X
申请日:2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A,属于蛋白质工程技术领域。本发明对从地衣芽孢杆菌基因组中克隆的CcpA基因进行突变,得到一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码其的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了包含编码上述CcpA突变体K31A基因的重组表达载体,并将构建的表达载体转化到地衣芽孢杆菌CcpA基因缺陷株中获得重组地衣芽孢杆菌。所获得的重组地衣芽孢杆菌能够明显改变由于葡萄糖存在而产生的碳分解代谢阻遏现象,能够降低地衣芽孢杆菌对木糖的偏好性。
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公开(公告)号:CN113604365A
公开(公告)日:2021-11-05
申请号:CN202111026526.3
申请日:2021-09-02
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开了一种超声波控制菌丝球粒径的方法及其应用。本发明所述方法包括如下步骤:(1)种子培养基的制备;(2)将步骤(1)制备的种子培养基灭菌、冷却后,接入曲霉孢子,培养得到含曲霉菌丝球的种子液;(3)对步骤(2)含曲霉菌丝球的种子液进行超声处理,得到含不同粒径的菌丝球的种子液;将含不同粒径菌丝球的种子液加入发酵培养基中搅拌发酵得到柠檬酸发酵液。本发明方法有利于柠檬酸发酵实现高浓度、高转化率和高效率的统一,对柠檬酸产业技术提升具有重要促进作用。
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公开(公告)号:CN108929882B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201810884050.9
申请日:2018-08-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/75
Abstract: 本发明公开了一种地衣芽孢杆菌的基因编辑方法及应用,实现了基因敲除及基因敲入,属于基因工程领域。该方法首先借助温度敏感型质粒PNZT1为载体构建温敏敲除(入)质粒;然后将敲除(入)质粒转化地衣芽孢杆菌经过变温传代实现敲除(入)盒同源替换靶基因;最后导入FLP重组酶表达质粒介导抗性基因的回收。本发明首次在地衣芽孢杆菌基因编辑中运用FLP/FRT重组系统并实现了无标记基因敲除及基因敲入,为地衣芽孢杆菌的代谢工程改造提供了有效的技术手段。
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