一种筛选分泌特异性单克隆抗体杂交瘤细胞的方法与应用

    公开(公告)号:CN104977408A

    公开(公告)日:2015-10-14

    申请号:CN201510331003.8

    申请日:2015-06-15

    Applicant: 暨南大学

    CPC classification number: G01N33/56966 G01N33/577 G01N33/582

    Abstract: 本发明公开一种筛选分泌特异性单克隆抗体杂交瘤细胞的方法与应用。该方法通过将Oleyl-PEG4000-NHS与Ag偶联,得到Oleyl-PEG4000-NHS-Ag;在待筛选的杂交瘤细胞克隆中加入Oleyl-PEG4000-NHS-Ag培养,弃上清,清洗;再加入荧光物质标记的抗鼠二抗孵育,弃上清,清洗;加入不完全培养基,用倒置荧光显微镜观察可见光和荧光下的细胞团,做好阴阳性的标记,在含有阳性细胞团的板孔中加入甲基纤维素半固体培养基,将阳性标记细胞移入到新的细胞培养板中培养,得到分泌特异性单克隆抗体杂交瘤细胞。该方法快速简便、准确率高,可用于快速筛选得到分泌特异性单克隆抗体杂交瘤细胞。

    一种玉米赤霉烯酮免疫荧光快速检测试纸条及其制备方法和用途

    公开(公告)号:CN102841204B

    公开(公告)日:2014-11-26

    申请号:CN201210307321.7

    申请日:2012-08-27

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 王宏 唐勇

    Abstract: 本发明公开了一种玉米赤霉烯酮免疫荧光快速检测试纸条及其制备方法和应用。本发明所述试纸条是由样品垫、荧光微球探针结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和塑料底板组成。本发明基于抗原抗体的免疫学原理检测食品、谷物和饲料等的玉米赤霉烯酮污染。本研究提供的玉米赤霉烯酮免疫荧光快速检测试纸条可以用于玉米赤霉烯酮的现场快速检测,只需5-10min;若与荧光定量检测仪(读卡器)连用,可实现定量检测;操作者不需要专业培训;因此将具有良好的市场前景。

    一种玉米赤霉烯酮抗独特型抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102690788A

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201210123597.X

    申请日:2012-04-25

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种玉米赤霉烯酮抗独特型抗体及其制备方法和应用。该玉米赤霉烯酮抗独特型抗体是β型抗独特型抗体,与玉米赤霉烯酮存在“内影像”关系,是由杂交瘤细胞株1D5分泌得到的。其制备方法是用ZEN单克隆抗体为免疫原,免疫小鼠,细胞融合筛选后即得到玉米赤霉烯酮抗独特型抗体。本发明还提供了一株分泌ZEN单克隆抗体的细胞株1G4G10D3。本发明的玉米赤霉烯酮抗独特型抗体可以替代标准品用于玉米赤霉烯酮的现场快速检测,实现无毒检测,具有良好的市场前景。

    镉离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN101576563A

    公开(公告)日:2009-11-11

    申请号:CN200910040390.4

    申请日:2009-06-19

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种镉离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及其制备方法和应用,该试纸由样品垫、胶体金结合垫、醋酸纤维素膜、吸水纸和塑料底板组成,所述塑料底板上依次粘贴样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,所述胶体金结合垫上包被了抗镉离子单抗的胶体金标记物,所述硝酸纤维素膜上依次包被有羊抗鼠IgG抗体和重金属镉的完全抗原Cd-iEDTA-BSA,以羊抗鼠IgG抗体为质控线,以重金属镉的完全抗原Cd-iEDTA-BSA为测试线。本发明基于抗原抗体的免疫学原理检测环境土壤、水体以及水产品中镉金属的残留,与现有的检测系统相比,具有快速、廉价、简便、灵敏、特异的优点,5分钟可出结果,可便携而进行现场监测。

    镉离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及制备方法和用途

    公开(公告)号:CN101451998A

    公开(公告)日:2009-06-10

    申请号:CN200810220609.4

    申请日:2008-12-30

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种镉离子胶体金免疫层析快速检测试纸条及其制备方法和用途。试纸条的制备方法:(1)胶体金溶液的制备;(2)抗镉离子单抗标记的胶体金溶液的制备;(3)喷金;(4)硝酸纤维素膜上包被C,T线;(5)镉离子胶体金免疫层析快速检测试纸条的组装。利用此试纸条进行镉离子检测的方法,包括以下步骤:a.在待测样品消解液中加入EDTA螯合剂,使镉离子与EDTA充分螯合;b.用滴管吸取待检样品溶液,滴加3滴于试纸条的样品垫上,加样后开始计时;c.在加样后3~5min读取结果,读取时,将试纸条以样品垫一端向下的方式垂直置于观察者正面;d.结果判断。本发明可以大规模地对环境与水产类食品中残留的重金属镉进行快速、方便的检测。

    镉离子间接竞争ELISA的检测方法

    公开(公告)号:CN101196521A

    公开(公告)日:2008-06-11

    申请号:CN200710032914.6

    申请日:2007-12-27

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种镉离子检测的间接竞争ELISA方法,该方法分别将鱼贝类样品提取液和系列浓度的镉离子标准液加入到抗原预包被条的微孔中,再加入抗镉离子的单克隆抗体到每个微孔,混匀孵育,在每个微孔中加入HRP标记的羊抗小鼠IgG抗体,孵育;经底物显色后终止反应,用酶标仪测定各微孔的吸光度,对照标准品所得的曲线回归方程,计算样品中镉离子的含量。本发明利用得到的可分泌抗镉离子单克隆抗体的阳性细胞可大量制得抗镉离子的单克隆抗体,所建立的方法成本低廉,可快速、简便、灵敏地测定样品中镉离子的含量。本发明可以大规模地对海洋鱼贝类食品中残留的重金属镉进行快速、灵敏的检测。

    膝沟藻毒素GTX2,3间接竞争ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN101196520A

    公开(公告)日:2008-06-11

    申请号:CN200710032913.1

    申请日:2007-12-27

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种膝沟藻毒素GTX2,3进行检测的间接竞争ELISA方法,该方法包括抗原预包被条的制备和膝沟藻毒素的检测,本发明利用得到的可分泌抗GTX2,3单克隆抗体的阳性细胞可大量制得抗膝沟藻毒素2,3的单克隆抗体,所建立的方法成本低廉,可快速、简便、灵敏地测定样品中GTX2,3的含量。本发明可以大规模地对海洋鱼贝类食品中残留的麻痹性贝类毒素进行快速、灵敏的检测。

    抗重组碱性成纤维细胞生长因子人源性Fab抗体及其应用

    公开(公告)号:CN101092457A

    公开(公告)日:2007-12-26

    申请号:CN200710028509.7

    申请日:2007-06-08

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种抗重组碱性成纤维细胞生长因子人源性Fab抗体及其应用,抗体片断基因包括重链Fd链和轻链κ链,本发明应用噬菌体表面呈现技术,成功构建能中和重组人bFGF或FGF-2的人源Fab抗体的k链和Fd链基因。在原核细胞、酵母细胞、昆虫细胞和真核细胞获得有效表达的特异性结合bFGF或FGF-2的功能性中和抗体,制备用于诊断和治疗肿瘤以及抑制肾、肝或肺等纤维化的抗体药物。本发明制备的bFGF或FGF-2人源性Fab抗体,该抗体是全人源的,具有高亲和力和特异性,可以直接开发为人用的抗体药物。

    一种三联毒品荧光免疫层析试剂纸、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN113358862B

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202110563112.8

    申请日:2021-05-24

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 唐勇 徐涛 滕佩君

    Abstract: 本发明公开了一种三联毒品荧光免疫层析试剂纸、检测试剂盒和检测方法。所述的三联毒品荧光免疫层析试纸条,是由样品垫、NC膜和吸水垫组成;所述的NC膜,从靠近样品垫的一端依次设有MET检测线、MOR检测线、KET检测线和质控线。检测时,将污水待测样品与磁性荧光探针冻干粉孵化反应,回收,加入检测卡点样孔中,层析后将检测卡观察孔用荧光读取仪扫描;通过标准曲线,以及各检测线与质控线电信号的比值计算三种毒品代谢物的浓度。本发明检测样本时先利用磁性荧光探针的磁响应功能捕获并富集待检物质,降低其他物质干扰;然后利用多联检测试纸条定量检测样品中多种待检物质。灵敏度可达ng/L,满足对污水中毒品代谢物的各级溯源要求。

    一种三联毒品荧光免疫层析试剂纸、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN113358862A

    公开(公告)日:2021-09-07

    申请号:CN202110563112.8

    申请日:2021-05-24

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 唐勇 徐涛 滕佩君

    Abstract: 本发明公开了一种三联毒品荧光免疫层析试剂纸、检测试剂盒和检测方法。所述的三联毒品荧光免疫层析试纸条,是由样品垫、NC膜和吸水垫组成;所述的NC膜,从靠近样品垫的一端依次设有MET检测线、MOR检测线、KET检测线和质控线。检测时,将污水待测样品与磁性荧光探针冻干粉孵化反应,回收,加入检测卡点样孔中,层析后将检测卡观察孔用荧光读取仪扫描;通过标准曲线,以及各检测线与质控线电信号的比值计算三种毒品代谢物的浓度。本发明检测样本时先利用磁性荧光探针的磁响应功能捕获并富集待检物质,降低其他物质干扰;然后利用多联检测试纸条定量检测样品中多种待检物质。灵敏度可达ng/L,满足对污水中毒品代谢物的各级溯源要求。

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