公开(公告)号：CN111534594B

公开(公告)日：2023-01-03

申请号：CN202010415743.0

申请日：2020-05-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡序明 ,  崔恒宓 ,  陈绪靖

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6841 ,  C12N15/11 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明涉及一种反义RNA ch‑MYC‑AS1FISH检测试剂盒的制备及其应用，属于分子生物学领域。引物组由序列为SEQ ID NO.1‑20所示的20条引物组，反义RNA ch‑MYC‑AS1的FISH检测试剂盒，包括FISH探针、杂交液和染色液；FISH探针序列如SEQ ID NO.1‑20示；共定位分析实验显示ch‑MYC‑AS1与HuR蛋白在细胞核中存在共定位现象。本研究发明不仅提供了ch‑MYC‑AS1 FISH检测手段，也为ch‑MYC‑AS1作用机制研究提供了方法基础。

公开(公告)号：CN111534593A

公开(公告)日：2020-08-14

申请号：CN202010415741.1

申请日：2020-05-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡序明 ,  崔恒宓 ,  豆春峰

IPC: C12Q1/6886 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明具体涉及一种反义RNAch-MYC-AS1表达Northern blot检测引物、试剂盒，属于分子生物学领域。所述引物的序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示。本发明进一步提供了ch-MYC-AS1表达Northern blot检测试剂盒，为ch-MYC-AS1表达规律分析提供了方法和基础。

公开(公告)号：CN109089970A

公开(公告)日：2018-12-28

申请号：CN201810659027.X

申请日：2018-06-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  欧阳娟 ,  薛松磊 ,  沈晖 ,  孙振 ,  徐慧

IPC: A01K61/59 ,  A01K61/17 ,  A01K61/10 ,  A23K50/80 ,  A23K10/22

Abstract: 本发明公开了一种改进的丰年虾孵化和收集方法，包括：对孵化器进行消毒清洗；向孵化器内加入孵化液，然后投入丰年虾的虾卵，于24℃～32℃下孵化20h～28h；其中，孵化液为浓度5‰～25‰海盐的水溶液，pH为7.0～10；孵化完成后，收集丰年虾幼虫；对收集的丰年虾幼虫进行消毒清洗，然后收集获得丰年虾。本发明针对目前丰年虾孵化条件有待优化、实验室孵化丰年虾尚未形成标准以及孵化后的丰年虾幼虫可能含有病原微生物等不足提供了解决方案，提供了一种改进的丰年虾孵化和收集方法，可获得高孵化率、高存活率、高获得率的丰年虾幼虫，且丰年虾孵化操作简单、孵化条件容易控制，孵化所需原材料环保易得并形成实验室丰年虾孵化标准。

公开(公告)号：CN108949756A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810941364.8

申请日：2018-08-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  薛松磊 ,  沈晖 ,  孙振 ,  欧阳娟 ,  徐慧

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  C12N15/90 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/11 ,  A01K67/0278 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/0375 ,  C12N15/63 ,  C12N15/902

Abstract: 本发明公开了一种斑马鱼心脏特异表达模型的构建方法及相关载体。同源重组载体，包括插入原始载体的插入片段，插入片段包括斑马鱼心脏特异表达的启动子、融合LoxP位点序列的左侧同源臂和右侧同源臂、多克隆位点、内部核糖体进入位点、报告基因、转录终止信号片段；其中，所述启动子位于报告基因上游，所述终止信号位于报告基因下游，左侧同源臂位于启动子上游，右侧同源臂位于终止信号下游，同源臂的内侧含有LoxP序列，多克隆位点位于所述启动子和报告基因之间；左侧同源臂和右侧同源臂靶向斑马鱼色素基因。还提供了斑马鱼心脏特异表达模型的构建方法，本发明可用于快速建立斑马鱼心脏特异表达基因的转基因模型，同时可以调控插入片段的表达。

公开(公告)号：CN108251452A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201810043624.X

申请日：2018-01-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  杨钰 ,  杨哲 ,  戴振清

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/8509 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/03 ,  C12N2800/80 ,  C12N2810/10

Abstract: 本发明涉及一种表达Cas9基因的转基因斑马鱼及其构建方法和应用。所述的表达Cas9基因的转基因斑马鱼，是在斑马鱼Mitfα基因中插入了Cas9基因。本发明利用CRISPR/Cas9转基因技术在色素基因Mitfα定点靶向构建了可表达Cas9基因的转基因斑马鱼，并利用色素消退作为筛选纯合敲除品系的标志。通过使用该转基因斑马鱼对Tyr基因和ZFERV基因进行编辑，证实了该转基因斑马鱼在基因敲除中更加有效，并且在F0代即可获得纯合敲除个体。Cas9转基因斑马鱼与传统的CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中的运用相比，具有更高的基因编辑效率；为大规模的基因筛选和疾病模型的建立提供了一个简单有效的工具。

公开(公告)号：CN108148861A

公开(公告)日：2018-06-12

申请号：CN201810043530.2

申请日：2018-01-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  徐慧 ,  孙振 ,  薛松磊

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N5/0603 ,  C12N5/0686 ,  C12N9/1007 ,  C12N9/22 ,  C12N15/65 ,  C12N15/907 ,  C12N2510/00 ,  C12N2800/107 ,  C12N2810/10 ,  C12Y201/01029

Abstract: 本发明提供一个应用于一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法，该方法是通过两个分别包含抗生素筛选基因的同源重组载体、gRNA载体TRDMT1-gRNA，以及表达Cas9的载体混合转染HEK293细胞，将两个抗生素筛选基因和转录终止信号片段整合到TRDMT1基因的第一外显子前，以终止其转录，通过抗性筛选，获得RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系。通过本发明所获得细胞系，性状稳定，为进一步为研究TRDMT1基因功能提供可靠的细胞模型，也为RNA甲基化功能研究提供一种有效的方法。

公开(公告)号：CN107881114A

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201711441939.1

申请日：2017-12-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  欧阳娟 ,  薛松磊 ,  沈晖 ,  孙振 ,  徐慧

IPC: C12N1/10 ,  C12R1/90

CPC classification number: C12N1/10

Abstract: 本发明提供了一种快速扩繁草履虫的方法，包括以下步骤：一种快速扩繁草履虫的方法，包括以下步骤：1)草履虫种源制备和保存：将种源保存于纯种保存培养液中得种源液，所述种源的草履虫密度>20个/mL；2)过渡培养：取种源液接种至过渡培养液中进行过渡培养；过渡培养至草履虫密度>300个/mL的扩繁培养标准；3)扩繁培养：将达到扩繁培养标准的过渡培养液接种至扩繁培养液中进行扩繁培养；扩繁培养至草履虫密度达到1500个/mL，用50目筛除去直径300um以上的杂质，得到可取用草履虫。该方法可以长期保存高活力种源和快速扩繁草履虫，满足了实验室短时间内获得大量草履虫的需求。

公开(公告)号：CN107828717A

公开(公告)日：2018-03-23

申请号：CN201711090160.X

申请日：2017-11-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  戴振清 ,  杨哲 ,  杨钰

IPC: C12N5/073 ,  G01N33/50

CPC classification number: C12N5/0604 ,  G01N33/5088 ,  G01N2500/10

Abstract: 本发明涉及抗癌药物研究领域，提供了一种新的非同源重组抑制剂筛选模型和筛选方法。本发明所述的非同源重组抑制剂的筛选模型，是含有SV40转录终止子片段的斑马鱼胚胎。本发明先将SV40转录终止子片段注射进斑马鱼早期胚胎，后选用非同源重组抑制剂Scr7处理注射了SV40转录终止子片段的斑马鱼早期胚胎，致死亡率显著降低。本发明提供了新兴抗癌药物——非同源重组抑制剂筛选的新模型，对癌症治疗具有重要意义。

公开(公告)号：CN107201366A

公开(公告)日：2017-09-26

申请号：CN201710411042.8

申请日：2017-06-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 崔恒宓 ,  李华玲 ,  吕贝 ,  袁君婷 ,  李新秀 ,  耿拓宇 ,  胡江 ,  胡莉娟 ,  吴奕帆 ,  盛雅婷

IPC: C12N15/113 ,  A61K31/7105 ,  A61K48/00 ,  A61P35/00

CPC classification number: C12N15/1135 ,  A61K31/7105 ,  C12N2310/11

Abstract: 本发明涉及一种用于肝癌诊断与治疗的反义长链非编码RNA的分析和制备方法，所述反义长链非编码RNA，命名为MEF2D‑AS，其cDNA序列具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。

公开(公告)号：CN107058581A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710415730.1

申请日：2017-06-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李华玲 ,  崔恒宓 ,  袁君婷 ,  吕贝 ,  胡莉娟 ,  吴奕帆 ,  盛雅婷

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  A61K45/00 ,  A61P35/00

CPC classification number: C12Q1/6886 ,  A61K45/00 ,  C12Q2600/158 ,  C12Q2600/178

Abstract: 本发明涉及一种反义长链非编码RNA在制备基因治疗剂方面的应用，所述基因治疗剂的作用靶点为MEF2D‑AS，具体是通过提高MEF2D‑AS的表达，下调MEF2D的表达，来发挥作用的。