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公开(公告)号:CN118147374A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410584866.5
申请日:2024-05-13
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种检测A群轮状病毒的引物探针组合物、试剂盒及其应用,属于生物技术领域。本发明所述引物探针组合物包括RVAqF、RVAqR和RVAqProbe,核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1~3所示。本发明基于上述引物探针组合物建立的RVA TaqMan‑MGB实时荧光定量PCR方法敏感性高,检测限为3.24拷贝/μL;特异性强,与猪、牛等动物常见病原无检测交叉反应;重复性好,其批内和批间变异系数分别为0.063%~0.812%和0.612%~1.016%。对临床采集的猪、牛、羊和人样品进行检测,有很好的临床适用性,对多物种的A群轮状病毒流行病学调查和早期诊断提供良好的技术支撑。
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公开(公告)号:CN116041549B
公开(公告)日:2023-11-07
申请号:CN202310051113.3
申请日:2023-02-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K19/00 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/102 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域,具体涉及一种副猪嗜血杆菌HAPS0901和WAZ融合蛋白及其应用。该融合蛋白包含如SEQ ID NO.4所示序列。将该融合蛋白作为副猪嗜血杆菌的亚单位疫苗进行免疫,抗体效价可以达到1:800‑1:1600,且存活保护率高于副猪嗜血杆菌灭活疫苗。并且该融合蛋白可以作为ELISA检测方法的包被抗原对副猪嗜血杆菌抗体进行检测,其特异性强、灵敏度高、重复性均比较良好以及准确度高。
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公开(公告)号:CN114457078B
公开(公告)日:2022-11-18
申请号:CN202210159915.1
申请日:2022-02-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种可促进伪狂犬病毒增殖的猪源MLKL基因缺失细胞株及其应用,属于生物技术领域。本发明公开了用于敲除猪源MLKL基因的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA包括sgRNA1和sgRNA2,所述sgRNA1的引物序列如SEQ ID NO:1‑2所示;所述sgRNA2的引物序列如SEQ ID NO:3‑4所示。利用上述的sgRNA引物以及CRISPR/Cas9载体构建敲除猪源MLKL基因,再采用有限稀释法对所得的敲除猪源MLKL基因的猪肾上皮细胞进行传代、筛选,得到猪源MLKL基因缺失细胞株,将其接种伪狂犬病毒后,该细胞株与正常猪肾上皮细胞相比能持续促进病毒增殖。
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公开(公告)号:CN114540417A
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN202210159919.X
申请日:2022-02-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种可促进伪狂犬病毒增殖的猪源RIPK3基因缺失细胞株的构建方法及其产品和应用,涉及生物技术领域。构建该细胞株的载体的构建方法包括:gRNA1‑F和gRNA1‑R退火形成双链1,双链1再与经BbsⅠ酶切的CRISPR/Cas9载体连接,得到pX459‑gRNA1;gRNA2‑F和gRNA2‑R退火形成双链2,双链2再与经BbsⅠ酶切的辅助载体连接,得到EZ‑gRNA2;以HindIII和XhoI对获得的pX459‑gRNA1和EZ‑gRNA2分别进行双酶切,回收线性化酶切产物后连接,得到所述载体。利用本发明的载体构建的猪源RIPK3基因缺失细胞株能够促进伪狂犬病毒的增殖。
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公开(公告)号:CN113025755A
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN202110341777.4
申请日:2021-03-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测猪圆环病毒2e型的试剂及其应用,所述试剂包括序列如SEQ ID No.1所示的正向引物序列和序列如SEQ ID No.2所示的反向引物序列。通过对引物与荧光探针的设计,引物探针序列结合位点特异性好,可准确将猪圆环病毒2e型与其他分型区别开来,本发明制备的试剂特异性强、敏感性高、省时省力,能够快速对猪圆环病毒2e型进行分型检测。
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公开(公告)号:CN111004868A
公开(公告)日:2020-04-14
申请号:CN202010013356.4
申请日:2020-01-07
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测山羊鼻内肿瘤病毒的荧光PCR引物、探针及试剂盒。本发明所研制的山羊鼻内肿瘤病毒荧光PCR检测试剂盒,具有特异性强、灵敏度高、省时省力的优点。根据山羊鼻内肿瘤病毒特异性区域设计合成一对特异性引物,能够特异性扩增出山羊鼻内肿瘤病毒基因片段;山羊鼻内肿瘤病毒的诊断、流行病学调查、监测净化等方面提供了相应的技术支持与帮助。
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公开(公告)号:CN106521036B
公开(公告)日:2019-12-03
申请号:CN201611177740.8
申请日:2016-12-19
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鉴别犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬腺病毒2型的四重PCR检测方法,属于病毒检测领域。本发明方法可以同时检测犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬腺病毒2型的四种病毒;操作简单,检测速度快且高通量;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。本发明的引物特异性好,除可以与所要检测的四种目标病毒核酸结合外,不与其他常见病毒,如猫瘟热、犬腺病毒1型、犬钩端螺旋体等核酸结合。
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公开(公告)号:CN105112561B
公开(公告)日:2019-10-11
申请号:CN201510500411.1
申请日:2015-08-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了小反刍兽疫病毒CH/GDDG/2014株全基因组序列及其扩增引物对。本发明将病毒基因组序列分为11个片段,用一步法RT‑PCR方法扩增相应的cDNA,将扩增的PCR片段克隆到pGM‑T载体上进行核酸测序。本发明可以有效地扩增出目的片段,提供了全基因组序列,有利于研究小反刍兽疫病毒的遗传学、分子流行病学及反向遗传学研究等。
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公开(公告)号:CN106086232B
公开(公告)日:2019-09-06
申请号:CN201610397352.4
申请日:2016-06-06
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别羊口疮病毒和羊痘病毒的二重PCR检测引物、试剂盒和检测方法。该方法为羊口疮病毒和羊痘病毒的诊断提供了一种快速检测方法,尤其是检测羊痘病毒的PCR引物涉及了羊痘病毒属所有成员,包括山羊痘病毒、绵羊痘病毒及牛疙瘩皮肤病病毒,使得该检测方法凸显集成性、高通量性等特点,为羊口疮病毒和羊痘病毒的诊断、流行病毒调查、防控及治疗提供技术支持与帮助。本发明方法具有特异性强、敏感性高、省时省力的优点。
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公开(公告)号:CN104450969B
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201410801967.X
申请日:2014-12-19
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了同时鉴别检测猪博卡病毒1型、2型和3型的多重PCR方法。多重PCR方法引物包括PBoV1引物对、PBoV2引物对及PBoV3引物对。该方法利用不同引物对扩增出不同大小的病毒核酸片段来达到鉴别诊断的目的。本发明可同时检测并区分PBoV1、PBoV2和PBoV3,具有特异性强、敏感性高、省时省力等优点。
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