一种提高寡糖离子化效率的方法

    公开(公告)号:CN105527334B

    公开(公告)日:2018-07-24

    申请号:CN201410521819.2

    申请日:2014-09-30

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 陆豪杰 焦竞 张莹

    Abstract: 本发明属于生化分析领域,涉及一种提高寡糖离子化效率的方法,尤其是一种提高寡糖在基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI‑TOF MS)中离子化的方法;该方法采用6‑联肼尼克酰胺(HYNIC)作为基质分析寡糖,选择性地提高寡糖的离子化效率,且抑制了其它被分析物如肽段的离子化。本发明中所述6‑联肼尼克酰胺具有式(Ⅰ)的结构;所述6‑联肼尼克酰胺作为基质分析寡糖时,具有灵敏度高、结晶均匀、耐盐性强、串级质谱碎片信息丰富等优点;本发明所述的方法,采用所述6‑联肼尼克酰胺作为基质分析寡糖,能选择性地提高寡糖的离子化效率,且抑制了其它被分析物如肽段的离子化,具有操作简便、步骤简单、经济省时、无需除盐的优点。

    一种基于细胞层面进行全蛋白质组学分析的方法

    公开(公告)号:CN108226317A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201611190958.7

    申请日:2016-12-21

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 陆豪杰 熊云 张莹

    CPC classification number: G01N30/02 G01N33/6848

    Abstract: 本发明属蛋白质分析领域,涉及基于细胞层面的全蛋白质组学分析的方法,本发明中,收集的细胞直接通过吸胀的方式进入真空干燥后的聚丙烯酰胺凝胶粒中,然后直接进行胶内酶解获得质谱分析所需的肽段;本方法中不需要单独的细胞裂解和蛋白提取步骤,使四个基本步骤减少为两步,在不提高酶量的情况下,实验耗时明显缩短;本方法与传统方法比较,在细胞蛋白质组鉴定,尤其是高分子量蛋白的鉴定上存在明显优势;本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,可以实现同时进行细胞裂解和蛋白酶解,为高灵敏质谱分析提供样品保证;由于摆脱了对去垢剂的依赖,适用于后续诸多翻译后修饰的研究。

    一种N-糖链固相富集并质谱分析的方法

    公开(公告)号:CN105372356A

    公开(公告)日:2016-03-02

    申请号:CN201410428810.7

    申请日:2014-08-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属糖蛋白质组学和糖组学分析领域,涉及一种用氨基磷酸盐衍生N-糖链并用Ti4+修饰磁性纳米材料富集衍生后的N-糖链的方法,其包括:首先通过对N-糖链的还原端进行氨基磷酸盐的衍生在N-糖链上引入磷酸根,再将Ti4+修饰的磁性纳米材料Fe3O4@Ti4+置于衍生后的糖链溶液中,通过Ti4+和糖链中的磷酸根之间的螯合反应,将糖链固定在磁性纳米材料上,随后将未和纳米材料结合的非糖链分子(如蛋白质、多肽、无机盐等)清洗除去,最后再在碱性条件下将捕获的糖链从材料上解离下来,送入质谱分析糖链。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,能实现N-糖链的高灵敏、高选择性质谱分析。

    一种磁性介孔二氧化钛核壳式复合微球及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102614818A

    公开(公告)日:2012-08-01

    申请号:CN201210084029.3

    申请日:2012-03-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于功能材料技术领域,具体为一种磁性介孔二氧化钛核壳式复合微球及其制备方法和应用。本发明的核壳式复合微球的核为磁性四氧化三铁纳米粒子团簇,壳为具有高结晶性的介孔二氧化钛。制备方法如下:首先制备柠檬酸稳定的磁性纳米粒子团簇,接着采用溶胶凝胶法,在磁簇表面包覆一层无定型的二氧化钛壳层,最后通过水热处理制备得到磁性介孔二氧化钛核壳式复合微球。该复合微球中具有高结晶性的介孔二氧化钛壳层使得微球对于磷酸肽具有高选择性、高富集容量、高灵敏度以及高回收率的特点;磁性核的存在使得富集了磷酸肽的微球可以很方便和快速地被磁分离出来。本发明方法操作简单、过程可控,制备的复合微球可用于分析和鉴定生物样品中极低浓度的磷酸肽。

    一种对痕量蛋白质或多肽靶上原位除盐和富集的方法

    公开(公告)号:CN101368890B

    公开(公告)日:2011-06-22

    申请号:CN200710045047.X

    申请日:2007-08-17

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生化分析领域,涉及一种利用具有微观相分离结构的嵌段聚合物涂层,对多肽和蛋白质样品进行靶上无需洗脱的原位除盐和同步富集,能避免样品损失,并对所富集的样品直接进行基质辅助激光解析离子化质谱的分析和鉴定的方法。本发明无需额外的洗脱除盐步骤也无需点覆过量体积的基质溶液就可实现除盐,并可直接进行MALDI质谱分析;本发明不仅首次成功实现了样品靶上原位免洗除盐与富集的特性,而且具有灵敏度高、重现性高、通量高、耐盐能力强、经济和省时等特点。可广泛用于蛋白质组学领域,同时也大大拓展了聚合物涂层技术的应用范围。

    一组IgG N-糖肽生物标志物组合及其用途

    公开(公告)号:CN118818051A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202310367757.3

    申请日:2023-04-07

    Abstract: 本发明属生物检测技术领域,涉及一组IgGN‑糖肽生物标志物组合及其用途。尤其是一组IgGN‑糖肽生物标志物组合及其在制备评估肝类疾病恶化程度的试剂或试剂盒中的用途,本发明的生物标志物组合包括10种与肝类疾病恶化程度相关的IgGN‑糖肽,可以用于对不同类型和阶段的肝脏疾病进行评估。本发明还提供了制备该组合和利用该组合进行评估的方法,包括收集血清样本、分析IgGN‑糖肽结构及含量、挖掘生物标志物组合等步骤。本发明具有高效、准确、灵敏、低成本和微创等优点,对于早期发现和预防肝类疾病恶化进程具有重要意义,使之更适合于精准医学的临床应用。

    基于质量亏损的八标标签并非依赖性数据采集定量蛋白质组的方法

    公开(公告)号:CN115684600A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110866799.2

    申请日:2021-07-29

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于蛋白质组学分析技术领域,涉及蛋白质组相对定量的方法,具体涉及利用赖氨酸同位素合成的八种质量亏损标签及其用于非数据依赖性采集质谱定量蛋白质组新方法。本发明利用赖氨酸同位素合成八种质量亏损标签,通过活化该标签的羧基将其标记在肽段N‑端以及赖氨酸侧链氨基上(衍生效率近100%),能够同时实现八个通道与非依赖性数据采集的蛋白质组定量。本发明方法的准确性和重复性好,线性范围较宽,可用于肝癌血清蛋白组定量相对与正常人血清蛋白表达水平的差异分析,可定量到24个差异表达蛋白,其中2个蛋白为FDA批准的标志物。

    一种N‑糖链固相富集并质谱分析的方法

    公开(公告)号:CN105372356B

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201410428810.7

    申请日:2014-08-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属糖蛋白质组学和糖组学分析领域,涉及一种用氨基磷酸盐衍生N‑糖链并用Ti4+修饰磁性纳米材料富集衍生后的N‑糖链的方法,其包括:首先通过对N‑糖链的还原端进行氨基磷酸盐的衍生在N‑糖链上引入磷酸根,再将Ti4+修饰的磁性纳米材料Fe3O4@Ti4+置于衍生后的糖链溶液中,通过Ti4+和糖链中的磷酸根之间的螯合反应,将糖链固定在磁性纳米材料上,随后将未和纳米材料结合的非糖链分子(如蛋白质、多肽、无机盐等)清洗除去,最后再在碱性条件下将捕获的糖链从材料上解离下来,送入质谱分析糖链。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,能实现N‑糖链的高灵敏、高选择性质谱分析。

    一种提高寡糖离子化效率的方法

    公开(公告)号:CN105527334A

    公开(公告)日:2016-04-27

    申请号:CN201410521819.2

    申请日:2014-09-30

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 陆豪杰 焦竞 张莹

    Abstract: 本发明属于生化分析领域,涉及一种提高寡糖离子化效率的方法,尤其是一种提高寡糖在基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)中离子化的方法;该方法采用6-联肼尼克酰胺(HYNIC)作为基质分析寡糖,选择性地提高寡糖的离子化效率,且抑制了其它被分析物如肽段的离子化。本发明中所述6-联肼尼克酰胺具有式(Ⅰ)的结构;所述6-联肼尼克酰胺作为基质分析寡糖时,具有灵敏度高、结晶均匀、耐盐性强、串级质谱碎片信息丰富等优点;本发明所述的方法,采用所述6-联肼尼克酰胺作为基质分析寡糖,能选择性地提高寡糖的离子化效率,且抑制了其它被分析物如肽段的离子化,具有操作简便、步骤简单、经济省时、无需除盐的优点。

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