公开(公告)号：CN100554431C

公开(公告)日：2009-10-28

申请号：CN200580020379.1

申请日：2005-04-20

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 伊达雅代 ,  菊池庆实 ,  板屋宽 ,  中村奈巳

IPC: C12N15/77 ,  C12P21/02 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明提供了通过使用棒状杆菌型细菌有效地生产工业上有用的蛋白质的方法，更具体的，提供了有效地生产通过常规的蛋白质分泌途径难以分泌的蛋白质的方法。更具体来说，本发明提供了有效地生产蛋白质的方法，其包括培养含有表达基因构建体的棒状杆菌型细菌，然后使所述棒状杆菌型细菌产生并分泌外源蛋白质，所述表达基因构建体在5′-端到3′-端方向上携带在棒状杆菌型细菌中起作用的启动子序列、编码Tat系统依赖性信号肽区域的核酸序列和编码外源蛋白质的核酸序列。

公开(公告)号：CN100497632C

公开(公告)日：2009-06-10

申请号：CN00813733.1

申请日：2000-09-29

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 菊池庆实 ,  伊达雅代 ,  梅泽有希子 ,  横山敬一 ,  松井裕

IPC: C12N15/63 ,  C12P21/02 ,  C12N9/10 ,  C12N9/48

Abstract: 本发明涉及在棒杆菌中分泌生产外源蛋白，特别是转谷氨酰胺酶的方法。本发明提供通过使工业生产上有用的外源蛋白，特别是转谷氨酰胺酶在棒杆菌中生成，并有效地释放到菌体外(分泌生产)来制备外源蛋白，特别是转谷氨酰胺酶的方法。使用编码源自棒杆菌的信号肽区的序列下游结合含有前体结构部分的目的外源蛋白质基因序列，特别是转谷氨酰胺酶原基因序列的表达重组体，将该表达型基因重组体导入棒杆菌，培养转化的棒杆菌，释放到菌体外的蛋白质通过用蛋白酶等进行处理切去前体结构部分，制备目的外源蛋白质，特别是转谷氨酰胺酶。

公开(公告)号：CN1759180A

公开(公告)日：2006-04-12

申请号：CN200480006224.8

申请日：2004-03-05

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 梅泽有希子 ,  横山敬一 ,  菊池庆实 ,  伊达雅代 ,  大西几正

IPC: C12N15/09 ,  C12N9/10 ,  C12N9/52

CPC classification number: C12N9/1044 ,  C12N9/6489

Abstract: 本发明提供一种来自放线菌的中性金属蛋白酶，其可选择性地切割微生物原转谷氨酰氨酶(protransglutaminase)的原结构部分，及所述中性金属蛋白酶的编码基因。通过下述方法可以制备原结构部分已被切除的活性型微生物转谷氨酰胺酶，通过培养在其中导入了编码本发明的来自放线菌的中性金属蛋白酶的基因的微生物，生产上述来自放线菌的中性金属蛋白酶，使其与微生物的原转谷氨酰胺酶反应。