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公开(公告)号：CN103088059A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310037010.8
申请日：2013-01-31
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸高效遗传转化方法，包括：杂交鹅掌楸转化受体的建立、农杆菌制备、侵染、脱菌培养和筛选培养。本发明以杂交鹅掌楸悬浮培养的单细胞作为遗传转化受体系统，通过农杆菌介导的方法，以GUS基因为报告基因，通过细胞学方法检测GUS基因的瞬间表达、长期表达、通过分子生物学方法检测等确定外源基因的高效转化。本发明采用杂交鹅掌楸单细胞起源的体细胞胚胎发生体系，有利于外源基因的导入，并降低了嵌合体的产生。
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公开(公告)号：CN102217539B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201110129388.1
申请日：2011-05-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种杉木无性系离体生根培养方法，该方法包括以下步骤：选取杉木优良无性系原株的树干的基部萌条为组织培养材料，接入继代增殖培养基进行继代增殖培养，诱导分化出不定芽，然后将不定芽转入MS培养基上进行伸长培养；不定芽长到2～3cm时，转入诱导生根培养基培养，得生根试管苗；移栽生根试管苗，选用黄土、泥炭土3：1比例混合后用作移栽基质。与现有技术中的杉木组培方法相比，本发明的杉木无性系离体生根培养方法优势在于：有效解决了杉木不同优良无性系在组织培养条件下组培苗的生根困难问题，实现建立杉木稳定高效的组培体系，生根率最高可达到100％（洋020），为加快杉木组培苗产业化发展提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN102250944A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110146621.7
申请日：2011-06-02
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种CdSe/ZnS量子点与植物细胞的共孵育方法，所述的量子点材料为CdSe/ZnS量子点，尺寸为30nm以内，表面电荷性质为正电荷。该植物细胞的量子点材料在以纳米基因载体建立高效的植物细胞转基因体系中的应用。本发明以CdSe/ZnS量子点与杂交鹅掌楸的胚性悬浮细胞采用不同的条件进行共孵育，结果表明胞吞进入完整细胞内部的表面携带正电荷的CdSe/ZnS纳米颗粒的量明显与共培养时间、温度有明显的依赖关系，它们可以通过细胞的液相胞吞作用进入杂交鹅掌楸细胞内，且不影响细胞的活性；因此以表面携带正电荷的CdSe/ZnS量子点纳米材料作为基因载体，在植物悬浮细胞的转基因研究和应用中具有广泛的前景，能够为植物基因工程提供新型的无机纳米基因载体和转基因技术体系。
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公开(公告)号：CN101112178A
公开(公告)日：2008-01-30
申请号：CN200710131251.3
申请日：2007-09-07
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种杂交鹅掌楸无性系营养体悬浮细胞系诱导体细胞胚胎发生和植株再生的方法，采用母树不同部位的芽、茎尖、叶、花器官及新枝为体细胞胚胎发生诱导材料，经历愈伤组织诱导，悬浮细胞系建立和增殖，悬浮细胞胚胎发育诱导，胚胎发育成熟、体胚萌发和植株再生阶段获得幼苗。本方法突破了无法直接用杂交鹅掌楸成年树营养体诱导体细胞胚胎发生和植株再生技术的难关，为工厂化育苗提供了一种周期短、繁殖率高、成本低廉的新方法。
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公开(公告)号：CN118995752A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411403434.6
申请日：2024-10-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了LhAHL15基因在诱导杂交鹅掌楸多倍体中的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明首次公开的杂交鹅掌楸LhAHL15基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明构建杂交鹅掌楸LhAHL15基因的表达载体；将构建的杂交鹅掌楸LhAHL15基因的表达载体转化到杂交鹅掌楸中；培育筛选并获得多倍体转基因杂交鹅掌楸植株。构建得到的转基因体胚苗叶片颜色变深、叶片增厚、茎秆增粗、植株矮化、叶片总面积增大，叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量增加，周期蛋白基因及细胞壁扩展相关基因表达量增加。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118318733A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410456392.6
申请日：2024-04-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸未成熟合子胚消毒后接种到固体愈伤诱导培养基中，然后用固体愈伤增殖培养基进行继代培养后，将其接种于液体愈伤增殖培养基中，进行愈伤组织预处理；将预处理后的愈伤组织接种于含安磺灵的液体愈伤增殖培养基中，进行愈伤组织的加倍处理后将其转置于体胚诱导培养基上，培育得到杂交鹅掌楸成熟体胚；将杂交鹅掌楸成熟体胚转移至基础培养基中，培养得到四倍体杂交鹅掌楸幼苗。得到的四倍体杂交鹅掌楸与二倍体杂交鹅掌楸在叶面积指数、叶长、叶宽等叶片的形态指标均存在显著差异，为进一步开展杂交鹅掌楸四倍体育种与遗传机理研究提供实验材料。
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公开(公告)号：CN116732061A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310601655.3
申请日：2023-05-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种北美鹅掌楸LtPDS基因及其敲除系统和应用，属于植物分子遗传学技术领域。本发明的北美鹅掌楸LtPDS基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明以北美鹅掌楸幼苗为材料，通过克隆得到北美鹅掌楸LtPDS基因，利用拟南芥中AtU3d、AtU3b和AtU6‑1启动子，对北美鹅掌楸中LtPDS基因进行精准编辑，构建其基因敲除载体CRISPR/Cas9‑LtPDS gRNA，转入鹅掌楸胚性愈伤组织中，得到转基因植株。结果表明基因编辑植株幼苗的叶片洁白，表示其体内LtPDS基因已被成功敲除。
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公开(公告)号：CN116491419A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202310488018.X
申请日：2023-04-28
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种纯合同源四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，属于植物快繁技术领域。该纯合同源四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，将杂交鹅掌楸胚性愈伤接种到液体愈伤增殖培养基中进行预培养，建立愈伤预培养悬浮系；将预培养后的悬浮细胞接种到含秋水仙素的液体愈伤增殖培养基中诱导悬浮细胞染色体加倍，建立秋水仙素处理悬浮系；将秋水仙素处理后的悬浮细胞接种到固体体胚诱导培养基中进行体胚诱导，得到四倍体子叶胚；将四倍体子叶胚接种至植株再生培养基中进行植株再生培养，得到纯合同源四倍体杂交鹅掌楸。结果表明：使用0.1％的秋水仙素处理21d后四倍体的诱导率高达32％，良种“南林金森E1号”的诱导率优于16‑HS×GA基因型。
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公开(公告)号：CN116465702A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310442720.2
申请日：2023-04-23
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸属材料染色体的制片方法，属于植物细胞遗传学技术领域。本发明公开的鹅掌楸染色体的制片方法，将鹅掌楸属植物胚性愈伤或球形胚或心形胚或鱼雷胚或子叶胚或黄化苗根尖为染色体制片材料置于饱和对二氯苯溶液中进行预处理2‑4h；将预处理后的材料置于卡诺固定液中进行固定12‑24h；将固定后的材料转至1mol/L的HCl溶液中进行解离2‑8min；将解离后的材料使用改良卡宝品红染液进行染色2‑6h；将染色后的材料置于载玻片上用解剖针将其迅速碾碎，滴加染液后覆盖一张盖玻片，将材料压散后即得到鹅掌楸的染色体制片，为鹅掌楸属植物细胞遗传学和倍性育种等研究方向提供了重要的技术手段。
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公开(公告)号：CN114958869B
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202210565985.7
申请日：2022-05-23
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本申请公开了杂交鹅掌楸分生组织生长关键基因LhWOX4及其应用。该杂交鹅掌楸分生组织生长关键基因LhWOX4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本申请从杂交鹅掌楸中提取LhWOX4基因，将其构建至过表达载体导入拟南芥中研究其功能，结果表明过表达杂交鹅掌楸LhWOX4基因的拟南芥植株出现植物顶端分生组织分裂旺盛，根系生长迟缓等表型，可见该基因在鹅掌楸和其它植物生产、育种中将有广泛的用途。
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