公开(公告)号：CN118562870A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202410839021.6

申请日：2024-06-26

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 郝兆东 ,  林梦缘 ,  张稼霁 ,  陈金慧 ,  施季森 ,  成铁龙 ,  陆叶 ,  马营轩

IPC: C12N15/82 ,  C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了LhBBM基因的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明公开的LhBBM基因在提高良种遗传转化效率中的应用，所述LhBBM基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。LhBBM基因提高了杂交鹅掌楸良种的遗传转化效率，将带有LhBBM基因的农杆菌菌液与带有目的基因的农杆菌菌液1:1等量混合；将愈伤组织置于混合菌液中愈伤侵染，筛选培养获得遗传转化效率提高的转基因阳性愈伤。其细胞荧光发光率明显提高，转基因植株的阳性率也显著提高，利用LhBBM基因促进H2B‑mCherry的转化，为转基因效率的提升提供了一种新的思路。

公开(公告)号：CN117925636A

公开(公告)日：2024-04-26

申请号：CN202311771509.1

申请日：2023-12-21

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 杨立明 ,  关园琳 ,  曹怡炜 ,  闵恬 ,  陆叶 ,  郝兆东 ,  陈金慧 ,  施季森

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了杂交鹅掌楸抗逆性转录因子LhICE1和LhICE2及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明公开的杂交鹅掌楸抗逆性转录因子LhICE1和LhICE2，其核苷酸序列分别对应SEQ ID NO.1‑2。本发明以杂交鹅掌楸的叶片组织为材料，通过克隆得到杂交鹅LhICE1、LhICE2转录因子，在此基础上构建其过表达载体，分别转入拟南芥和杂交鹅掌楸中，得到抗性转基因植株。结果表明转入鹅掌楸LhICE1、LhICE2转录因子的拟南芥可以显著增强对‑8℃低温的耐性，转入LhICE1、LhICE2转录因子的杂交鹅掌楸可以显著增强对0℃低温、盐和PEG渗透胁迫的耐性。

公开(公告)号：CN117378503A

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202311573585.1

申请日：2023-11-23

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 杨立明 ,  徐明月 ,  左银悦 ,  苏文斌 ,  陈金慧 ,  施季森 ,  郝兆东

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸组培快繁方法，属于组织培养技术领域。本发明将杂交鹅掌楸组培苗的根节段培养得到愈伤组织；将愈伤组织继代培养两次，培养得到继代两次的愈伤组织；将继代两次的愈伤组织培养得到不定芽；将不定芽培养得到杂交鹅掌楸的生根植株。本发明确定了终浓度为0.1mg/L6‑BA和0.1mg/L NAA组合为杂交鹅掌楸根诱导愈伤的最佳培养基，终浓度为0.05mg/L NAA+0.5mg/L 6‑BA组合为愈伤诱导不定芽的最佳培养基。该培养方法简化了常规组培育苗流程，降低了生产成本，开发了一种新的杂交鹅掌楸组培繁殖技术。

公开(公告)号：CN116590301A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202211133693.2

申请日：2022-09-16

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 陈金慧 ,  刘思芹 ,  施季森 ,  郝兆东 ,  成铁龙 ,  陆叶

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhWUS基因及其表达蛋白和应用，属于植物基因工程技术领域。本发明基于杂交鹅掌楸转录组数据，克隆获得杂交鹅掌楸LhWUS基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所表达蛋白如SEQ ID NO.2所示。将克隆的LhWUS基因构建过表达载体，转化拟南芥获得T2代种子，表型观察表明过表达LhWUS基因可以加快植株的生长发育，在杂交鹅掌楸中过表达LhWUS基因也可缩短植株的生长发育进程，可见该基因在鹅掌楸和其它植物生产、育种中将有广泛的用途。本发明可应用于缩短植物的生长发育进程，并进一步在植物生长发育中有较广泛的应用，因此本发明具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114807166A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210420100.4

申请日：2022-04-20

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 陆叶 ,  陈金慧 ,  杨立明 ,  施季森 ,  杨蕤西 ,  郝兆东

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸转录因子LcbHLH02399基因及其表达蛋白和应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过生物信息学工具对鹅掌楸bHLH家族序列进行分析，然后通过测序和同源比较，克隆得到编码bHLH转录因子的LcbHLH02399基因。对LcbHLH02399基因构建过表达载体，转化杂交鹅掌楸愈伤，通过液体培养，获得转基因杂交鹅掌楸；比较LcbHLH02399转基因杂交鹅掌楸植株和野生型植株在4℃光照培养箱中低温处理3d的表型，发现转基因植株的生长受到低温胁迫的影响较小，而野生型植株生长受到抑制，且叶片有萎蔫现象。结果表明鹅掌楸LcbHLH02399基因可以增强鹅掌楸植株对低温胁迫的耐受能力，在提高植物低温胁迫的分子育种中具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN114196730A

公开(公告)日：2022-03-18

申请号：CN202111416678.4

申请日：2021-11-25

Applicant: 南京林业大学 ,  江苏省中国科学院植物研究所

Inventor： 周艳威 ,  陈金慧 ,  陈红 ,  郝兆东 ,  施季森 ,  张凡 ,  陆小清 ,  周婷

IPC: C12Q1/37

Abstract: 本发明公开了一种中国鹅掌楸花蜜中半胱氨酸蛋白酶抑制剂活性检测方法及其检测试剂盒，属于生物分析技术领域。本发明利用半胱氨酸蛋白酶抑制剂能与木瓜蛋白酶形成紧密的复合物，抑制木瓜蛋白酶的活性，而木瓜蛋白酶能催化N‑苯甲酰‑L‑精氨酸乙酯(底物)水解而释出N‑苯甲酰‑L‑精氨酸，水解产物与4‑(二甲基氨基)肉桂醛(显色剂)结合成有色产物，在540μm处吸光值最大，与浓度呈正比，根据木瓜蛋白酶酶活性测算出半胱氨酸蛋白酶抑制剂活性。本发明样品需求量少，操作简单，大大节省了成本；从采样到获得检测结果在2小时内，检测时间短，检出限为0.05‑0.22U·min‑1·ml‑1，精度高，重现性好。

公开(公告)号：CN112746079B

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202110174683.2

申请日：2021-02-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 郝兆东 ,  杨立明 ,  王占军 ,  高敏 ,  朱礼明 ,  施季森 ,  陈金慧

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸转录因子LcbHLH52基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过生物信息学工具对鹅掌楸bHLH家族序列进行分析，然后通过测序和同源比较，成功克隆出了LcbHLH52转录因子基因。对克隆到的LcbHLH52转录因子基因构建过表达载体，转化拟南芥，获得T1代种子；将LcbHLH52转基因拟南芥T2代植株和野生型拟南芥植株同时放入4℃低温处理3d，表型观察发现转基因植株的生长受到低温胁迫的影响较小，而野生型植株生长受到抑制，叶片有萎蔫现象。结果表明鹅掌楸LcbHLH52基因可以增强拟南芥植株对低温胁迫的耐受能力，在提高植物低温胁迫的分子育种中具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN109929852A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910284374.3

申请日：2019-04-09

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 陈金慧 ,  陆凤娟 ,  郝兆东 ,  陈桢雨 ,  陈新颖 ,  翁禹豪 ,  施季森 ,  成铁龙 ,  汪贵斌

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9及其应用。该杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克隆出杂交鹅掌楸的LhHB9基因的cDNA序列，构建LhHB9基因的过表达载体，以杂交鹅掌楸胚性愈伤为受体材料，采用农杆菌介导法进行遗传转化。经G418筛选得到转基因愈伤后，对其进行检测，初步确定转基因成功。通过对LhHB9基因转基因愈伤体胚诱导发现，转基因体胚胚根有明显的伸长，统计数据显示，35S：LhHB9体细胞胚胚根与对照CK相比最显著，说明过表达靶基因可以促进胚根的伸长，具有很好的实用性。

公开(公告)号：CN104293808B

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201410587281.5

申请日：2014-10-29

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 施季森 ,  赵芳芳 ,  陈金慧 ,  王鹏凯 ,  郝兆东 ,  闫珊 ,  施帅男 ,  孟岩 ,  陆叶

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/12 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhMKK2基因及其表达蛋白和应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明在已建立完善的杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生体系﹑且已获得部分转录组数据的基础上，同源克隆获得杂交鹅掌楸LhMKK2基因全长，命名为LhMKK2，通过基因表达分析，证明了杂交鹅掌楸LhMKK2基因在植物中的广泛表达，参与植株的生长发育，以及逆境胁迫响应过程，通过对其功能分析发现，过表达LhMKK2基因增强植株对盐胁迫响应的抗性，影响植株的生长发育，可为开展杂交鹅掌楸抗逆性分子育种提供理论依据，并进一步在植物抗逆境胁迫中有较广泛的应用。

公开(公告)号：CN116121264B

公开(公告)日：2025-05-02

申请号：CN202211742153.4

申请日：2022-12-30

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 陈金慧 ,  何石婵 ,  鲁路 ,  郝兆东 ,  施季森

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhMIR394A基因及其应用，属于植物分子生物学领域。本发明的杂交鹅掌楸LhMIR394A基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明以杂交鹅掌楸叶片为材料，通过克隆得到杂交鹅掌楸LhMIR394A基因，在此基础上构建其过量表达载体pBI121‑LhMIR394A，转入杂交鹅掌楸胚性愈伤组织中，得到转基因植株，基因功能鉴定结果表明LhMIR394A基因是促进胚性愈伤组织增殖以及使体胚子叶合生呈杯状结构的重要转录因子，在植物生长发育以及育种方面具有很好的应用前景。