快速分离超高纯度人体血液中性粒细胞的方法

    公开(公告)号:CN113186161A

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN202110312260.2

    申请日:2021-03-24

    Abstract: 本发明涉及一种快速分离超高纯度人体血液中性粒细胞的方法,包括:先将中性粒细胞分离液加入分离管,再将人体全血加至中性粒细胞分离液的上方并形成全血层;将分离管进行离心,使管内液体分为5层,收集中性粒细胞层、以及由中性粒细胞层向红细胞层过渡的液体;稀释后离心弃上清;红细胞裂解并离心弃上清;中性粒细胞磁珠分选。本发明能极大程度地解决其他免疫细胞对中性粒细胞的影响,使得中性粒细胞分离的纯度稳定>99%,同时减少了分离时间(全过程约1小时左右),这对于临床感染性疾病中性粒细胞炎性反应的干预提供了良好的技术平台。

    环状RNA标志物hsa_circ_0001788及其应用

    公开(公告)号:CN109295218A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811508733.0

    申请日:2018-12-11

    Abstract: 本发明建立颅缝早闭患者circRNA表达谱,提供颅缝早闭患者血清circRNA标志物hsa_circ_0001788,揭示血清中hsa_circ_0001788对颅缝早闭的诊断价值,用于制备颅缝早闭患者诊断试剂盒,为临床上颅缝早闭患者的早期发现和治疗提供支持。血清circRNA具有稳定性好,不易降解等优点,有较高的辅助诊断价值,利于临床推广使用。本发明人采用circRNA芯片检测,以获取疾病特异和异常表达的血清circRNA表达谱,并应用qRT-PCR的方法进行验证,具有严密的设计和评价体系。首次发现血清中hsa_circ_0001788作为一个重要的生物学检测指标,检测指标微创廉价,可应用于临床检测,在颅缝早闭临床的早期诊断、鉴别诊断具有重要作用,本发明也从分子水平上为颅缝早闭的诊断提供新的思路,有望提高颅缝早闭的早期诊断率。

    一种检测环境中多环芳烃化学物的质粒及应用

    公开(公告)号:CN103898162B

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201410105958.7

    申请日:2014-03-20

    Abstract: 本发明涉及分子生物学及环境生物技术领域。本发明通过提取人源性AHR基因启动子,以含萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶双报告基因的CV060质粒为载体,插入特定序列的AHR基因启动子,构建了含AHR基因启动子的内参内置型双荧光素酶报告基因的重组慢病毒质粒。本发明的检测方法重复性好、灵敏度高、检测结果可靠,且操作简单方便,可广泛地应用于环境中多环芳烃类物质的检测。

    利用锌指核酶技术培育斑马鱼的方法及其在建立药物筛选模型中的应用

    公开(公告)号:CN102250936A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110144503.2

    申请日:2011-05-31

    Inventor: 顾爱华 周勇

    Abstract: 利用锌指核酶技术培育斑马鱼的方法及其在建立药物筛选模型中的应用,本发明使用这一技术构建了DNA修复酶Ogg1基因突变的斑马鱼转基因系,并以此为基础建立了脑保护药筛选的动物模型。本发明首先确定了Ogg1基因特异性锌指结合位点以及锌指蛋白序列,以组装的三联体锌指蛋白表达载体为模板,体外转录锌指蛋白编码RNA,并导入斑马鱼受精卵诱变。筛选得到的阳性Ogg1突变系鱼具有明显的神经元DNA易损性,可致脑部特异性缺陷。本发明同时提供将该脑神经元易损性的模型用于脑保护药物的方法。利用本发明的新模型及方法,为脑保护药物的筛选提供了经济快捷的新途径,有助于开发治疗脑损伤的药物。

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