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公开(公告)号：CN109601367A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811487242.2
申请日：2018-12-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/02 , A01H1/04 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了抗霜霉病黄瓜种间杂种新品种的培育方法及应用。该培育方法包括以‘长春密刺’的高代自交系CCMC为母本，以黄瓜-酸黄瓜渐渗系材料IL52为父本，进行杂交获得F1，杂种F1自交获得F2，并继续通过单粒传的方式构建F6重组自交系；通过对重组自交系群体进行4年的田间成株期霜霉病自然发病表型统计，筛选出抗性高且果实商品性较好的重组单株；利用回交及分子标记辅助选择获得dm5.2区段内基因型与IL52带型一致，而其他染色体区段为‘长春密刺’带型的单株即为抗霜霉病黄瓜种间杂种新品种。新品种具有高抗霜霉病性状和较高的产量和优良的果实品质。
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公开(公告)号：CN115125252A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202110299392.6
申请日：2021-03-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及CsSH1基因在提高黄瓜苗期耐徒长中的应用，通过CRISPR/Cas9系统编辑CsSH1基因，使CsSH1基因功能失活来提高黄瓜苗期的耐徒长性。本发明的有益效果在于：(1)利用基因编辑技术获得耐徒长的黄瓜植株，较传统的育种方法更经济、有效，是一种创建抗性材料的好方法，大大缩短了育种年限；(2)提供了耐徒长的黄瓜基因编辑植株，为选育苗期耐徒长黄瓜杂交种提供了新的育种材料。
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公开(公告)号：CN109609680B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201910045504.8
申请日：2019-01-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明首次公开了一个与黄瓜‑酸黄瓜渐渗系抗细菌性角斑病基因紧密连锁的分子标记SSR05793，属于植物分子育种领域。该标记正反向引物序列分别为：5′CCCTCTGCTGCACATTATCC 3′和5′TGCACCAAGCAATAACTTGTC 3′，在RIL(长春密刺×IL52)群体中，标记SSR05793可在抗病单株中扩增出192bp单一条带，在感病单株中扩增出204bp单一条带或192bp和204bp双条带。本发明公开的分子标记SSR05793可用于黄瓜‑酸黄瓜渐渗系抗细菌性角斑病基因精细定位和分子标记辅助育种，对于加快黄瓜细菌性角斑病抗性育种具有重要的理论和实践指导意义。
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公开(公告)号：CN109609680A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910045504.8
申请日：2019-01-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明首次公开了一个与黄瓜-酸黄瓜渐渗系抗细菌性角斑病基因紧密连锁的分子标记SSR05793，属于植物分子育种领域。该标记正反向引物序列分别为：5′CCCTCTGCTGCACATTATCC 3′和5′TGCACCAAGCAATAACTTGTC 3′，在RIL(长春密刺×IL52)群体中，标记SSR05793可在抗病单株中扩增出192bp单一条带，在感病单株中扩增出204bp单一条带或192bp和204bp双条带。本发明公开的分子标记SSR05793可用于黄瓜-酸黄瓜渐渗系抗细菌性角斑病基因精细定位和分子标记辅助育种，对于加快黄瓜细菌性角斑病抗性育种具有重要的理论和实践指导意义。
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公开(公告)号：CN104419763B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201310409784.9
申请日：2013-09-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了黄瓜单拷贝基因在染色体上物理定位的方法，它是通过PCR扩增获得黄瓜单拷贝基因，然后对产物进行凝胶电泳回收纯化，以纯化产物为模板进行第二次PCR扩增，然后将第二次PCR产物标备探针。分别取黄瓜根尖和盛花期植株上的花蕾进行酶解，涂片法制片，挑选分散度高的片子，并进一步进行胃蛋白酶处理后，备用。最后将标好的探针杂交到处理好的载玻片上，在荧光显微镜下观察信号。本发明采用PCR扩增后切胶回收，之后再进行二次PCR扩增的方法，不仅可以去除基因组DNA的干扰，而且解决了切胶回收率低的问题；另外涂片法结合胃蛋白酶处理制作背景清晰且分散度高的片子可以提高信号的分辨率；通过此方法，可在染色体上直接检测到的最短长度为2kb的单拷贝基因，为黄瓜的细胞遗传学研究提供了可靠的保证。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104789562A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510235861.2
申请日：2015-05-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了与单性结实主效QTL Parth2.1连锁的分子标记方法，属于生物技术领域。首先公开了与QTL Parth2.1紧密连锁的分子标记Indel-T-47，同时公开了该标记的引物Indel-T-47F/Indel-T-47R。在含有Parth2.1的分离群体中，该标记与单性结实性显著相关。在含有Parth2.1的全雌自交系材料中，标记引物Indel-T-47F/Indel-T-47R在强单性结实株系中均能扩增出155bp产物，是Parth2.1的峰值标记，与Parth2.1紧密连锁。本发明公开的与Parth2.1紧密连锁分子标记，可用于全雌黄瓜单性结实分子标记辅助育种。
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公开(公告)号：CN104419763A
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201310409784.9
申请日：2013-09-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6841 , C12Q2543/10 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了黄瓜单拷贝基因在染色体上物理定位的方法，它是通过PCR扩增获得黄瓜单拷贝基因，然后对产物进行凝胶电泳回收纯化，以纯化产物为模板进行第二次PCR扩增，然后将第二次PCR产物标备探针。分别取黄瓜根尖和盛花期植株上的花蕾进行酶解，涂片法制片，挑选分散度高的片子，并进一步进行胃蛋白酶处理后，备用。最后将标好的探针杂交到处理好的载玻片上，在荧光显微镜下观察信号。本发明采用PCR扩增后切胶回收，之后再进行二次PCR扩增的方法，不仅可以去除基因组DNA的干扰，而且解决了切胶回收率低的问题；另外涂片法结合胃蛋白酶处理制作背景清晰且分散度高的片子可以提高信号的分辨率；通过此方法，可在染色体上直接检测到的最短长度为2kb的单拷贝基因，为黄瓜的细胞遗传学研究提供了可靠的保证。
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公开(公告)号：CN103114151A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201310081001.9
申请日：2013-03-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种荧光原位杂交的方法，以黄瓜减数分裂粗线期染色体为靶DNA进行多探针的荧光原位杂交。精选染色体分散良好且形态结构清晰的高质量制片，在80℃的70％去离子甲酰胺中变性，梯度酒精中脱水干燥；采用碱裂解法提取目标质粒DNA，利用缺刻平移法进行标记，配制杂交混合液，90℃变性后，加到载玻片上使靶DNA与探针进行杂交，最后进行信号检测。本发明的荧光原位杂交技术，可用于黄瓜染色体物理图谱的绘制，由于其一次性可加入多个探针，避免了对一张制片多次重复杂交，大大提高了实验效率。本发明在配置杂交混合液的过程中加入了适量的黄瓜全基因组DNA和Cot-1DNA，用于封阻杂信号和重复序列信号，提高了靶信号的辨识率，增加了实验结果的准确性。
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公开(公告)号：CN117546773A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311389380.8
申请日：2023-10-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种种间杂交改良栽培黄瓜霜霉病抗性的育种方法，涉及黄瓜抗病育种技术领域，其技术方案要点是：包括人工授粉，授粉后，对果梗喷施坐果灵和对幼嫩子房喷TDZ激素，并挂牌标记；消毒取种：取授粉后成熟果实，先清洗表面，对其表面消毒，消毒后将种子取出、催芽种植：将获得的种子浸泡在水中，数个小时后将种子转移至盛有清水的容器中，置于光照培养箱中进行催芽，期间每天定时换水，出芽后进行田间常规种植管理等步骤。本发明具有克服黄瓜种间杂交障碍，通过进行霜霉病抗性的田间鉴定，利用重茬地块统计霜霉病自然发病情况，发现种间杂交后代的霜霉病抗性增强以及扩充栽培黄瓜资源遗传基础等效果。
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公开(公告)号：CN114381548B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202210086004.0
申请日：2022-01-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了黄瓜强单性结实性状多位点选择的分子标记辅助选择育种方法。本发明通过进一步构建BC3S1等具有单性结实性状的次级分离群体，完成了关键微效位点Parth3.1和Parth7.1的精细定位，开发出了4个紧密连锁的分子标记，并在自然群体中对这4个分子标记进行了选择效率的验证，建立了强单性结实性状多位点选择(Parth2.1、Parth3.1和Parth7.1)的分子标记辅助选择育种技术体系，并利用该技术育成了具有强单性结实性的新品种，该强单性结实的黄瓜新品种是华北型黄瓜自交系品种，有较高的产量和优良的果实品质，可直接作为改良其他品种单性结实性的骨干亲本。
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