一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系的建立方法

    公开(公告)号:CN105018430A

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201510065393.9

    申请日:2015-02-06

    Abstract: 本发明公开了一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系的建立方法,包括步骤:取长白小公猪的骨髓细胞,培养液培养20-28h后更换新鲜培养液,继续培养,传代至获得细胞形态均一的F3代的长白仔猪bMSCs;利用携带LargeT慢病毒液侵染F3代的长白仔猪bMSCs,细胞筛选,传代至得到稳定表达Egfp的细胞株;将稳定表达Egfp的细胞株,传代50代以上,经细胞生物学分析检测,获得长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系。本发明获得了能支持猪bMSCs稳定培养的系统,促使细胞体外快速稳定增殖,并维持原代的生物学特征,证明得到了永生的长白仔猪bMSCs,可以深入研究猪bMSCs生物学性质和应用于药物或疫苗研发。

    一种食蟹猴睾丸间质祖细胞永生系的建立方法

    公开(公告)号:CN104611295A

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201510065471.5

    申请日:2015-02-06

    Abstract: 本发明公开了一种食蟹猴睾丸间质祖细胞永生系的建立方法,包括步骤:取食蟹猴睾丸组织,获取高比例的睾丸间质细胞,完全培养基培养20~28h后更换新鲜培养液,继续培养,传代至形态均一的呈现成纤维状生长的睾丸间质细胞;利用携带Large T和Egfp基因的慢病毒液侵染睾丸间质细胞,然后进行荧光标记细胞筛选,传代至稳定表达Egfp的细胞株;再筛选稳定表达Egfp的细胞株,鉴定出睾丸间质祖细胞以后,继续传代50代以上,最终建立了食蟹猴睾丸间质祖细胞永生系。转入Large T的睾丸间质祖细胞细胞系体外传代已超过62代,表达睾丸间质细胞标志蛋白CYP11A1,CYP17A1和STAR,同时也表达Pdgfral和Lifr等间质干细胞的标记基因,细胞外形维持成纤维状,证明了获得了特征的睾丸间质祖细胞系。

    一种畜禽场专用的驱蚊抑菌熏香

    公开(公告)号:CN108684739B

    公开(公告)日:2020-07-31

    申请号:CN201810233344.5

    申请日:2018-03-21

    Abstract: 本发明公开一种畜禽场专用的驱蚊抑菌熏香。该熏香包括纸外壳以及驱蚊抑菌中药内芯,所述驱蚊抑菌中药内芯和纸外壳可燃,其中:所述内芯由下述重量份原料制作而成:代赭石2~4份、五倍子1~3份、芡实1~3份、玉竹1~3份、沙参1~3份、苍术1~2份、艾草1~2份、白芍1~2份、当归1~2份。将该熏香燃挂于畜禽舍中,不仅能满足畜禽场驱蚊蝇的作用,而且能有效抑制细菌的生长,减少病原菌传播,净化空气、同时还能增强畜禽免疫力、增强畜禽对疾病的抵抗力。该熏香成本低、制作工艺简单、贮藏、取用方便,驱蚊蝇见效快,抑菌效果好、面积大,同时燃烧时间长。

    一种畜禽场专用的驱蚊抑菌熏香

    公开(公告)号:CN108684739A

    公开(公告)日:2018-10-23

    申请号:CN201810233344.5

    申请日:2018-03-21

    Abstract: 本发明公开一种畜禽场专用的驱蚊抑菌熏香。该熏香包括纸外壳以及驱蚊抑菌中药内芯,所述驱蚊抑菌中药内芯和纸外壳可燃,其中:所述内芯由下述重量份原料制作而成:代赭石2~4份、五倍子1~3份、芡实1~3份、玉竹1~3份、沙参1~3份、苍术1~2份、艾草1~2份、白芍1~2份、当归1~2份。将该熏香燃挂于畜禽舍中,不仅能满足畜禽场驱蚊蝇的作用,而且能有效抑制细菌的生长,减少病原菌传播,净化空气、同时还能增强畜禽免疫力、增强畜禽对疾病的抵抗力。该熏香成本低、制作工艺简单、贮藏、取用方便,驱蚊蝇见效快,抑菌效果好、面积大,同时燃烧时间长。

    一种评定长白公猪受精能力的数学模型及其建立方法

    公开(公告)号:CN105046082B

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201510431752.8

    申请日:2015-07-21

    Abstract: 本发明公开了一种评定长白公猪受精能力的数学模型及其建立方法,其建立方法包括步骤:对长白公猪数据样本的预测变量进行数据描述;再进行系统聚类,并依据公猪精液受精能力相关的样本数据对不同受精力水平的长白公猪进行划分,划分为高受精能力公猪群和低受精能力公猪群;再进行聚类后的判别分析和Logistic回归分析,生成具体的数学函数。本发明所建立的数学模型的系数及预测准确率可靠,能够提供一种适合广东省种猪场评定在役长白公猪受精能力的函数模型,可作为评定长白公猪受精能力的依据;对于缩小公猪间受精能力的梯度变化区间,以及准确预测长白公猪受精能力水平具有重要意义。

    一种新生仔猪睾丸生殖干细胞的高效获取方法

    公开(公告)号:CN105647855A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610088028.4

    申请日:2016-02-16

    CPC classification number: C12N5/061 C12N2509/10

    Abstract: 本发明公开了一种新生仔猪睾丸生殖干细胞(mGSCs)的高效获取方法,其包括以下步骤:通过两步酶法消化获取新生仔猪的睾丸组织单细胞悬液;利用差速贴壁法去除睾丸组织中成纤维类的贴壁细胞;差速贴壁5次以后,收集未贴壁细胞,所述未贴壁细胞中含有淋巴细胞、红细胞和mGSCs;利用密度梯度离心方法将淋巴细胞和红细胞与mGSCs分离,即得到高纯度的mGSCs。本发明的方法操作简单,重复性好,成功率高,高效的获取高比例的mGSCs,对于后期研究mGSCs性质及其应用具有重要作用。不仅可应用于猪mGSCs生物学性质研究的科研平台、也可以在猪mGSCs介导的动物育种、品种改良和濒危品种保存等方面具有潜在的应用前景。

    一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法

    公开(公告)号:CN118716335B

    公开(公告)日:2024-11-29

    申请号:CN202411203811.1

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明公开了一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法。属于精液冷冻技术领域。本发明提供了一种冷冻精液稀释液改良配方,明确了稀释液中单独添加海藻糖和L‑半胱氨酸的最适添加浓度,以及两者组合添加的适宜浓度范围,并且在优化后的稀释液中添加EGCG,极大提升冻后精子质量和保存效果。本发明使用细胞冻存管进行精液冷冻保存,精子冻后活力与用冻精细管冷冻效果无差异,精液剂量提高了6倍。本发明还提供了一种精液中甘油的去除方法,甘油去除率高,且受精率和孵化率能达到与原精液授精相当的效果。

    一种猪IZUMO2真核蛋白及其单克隆抗体的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118598971A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410870321.0

    申请日:2024-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种猪IZUMO2真核蛋白及其单克隆抗体的制备方法和应用。本发明验证了猪IZUMO2核苷酸CDS全长序列,设计了一种去除其跨膜结构,仅将其膜外序列进行真核表达纯化与单克隆抗体制备的研究方法,IZUMO2蛋白通过CHO‑K1细胞进行分泌表达,该方法表达的蛋白接近天然蛋白,具有生物学活性且操作简单。通过qPCR和ELISA试验验证了IZUMO2蛋白可以降低由LPS诱导的RAW264.7细胞中炎症因子的表达,具有一定的抗炎能力。且实验发现IZUMO2蛋白处理后能促进公猪精子获能,证明该蛋白在制备促进公猪精子获能的试剂中也能够得到应用。

    一种猪精液冷冻保存液及提高猪精液冷冻保存品质的方法

    公开(公告)号:CN118556671A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410605931.8

    申请日:2024-05-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪精液冷冻保存液及提高猪精液冷冻保存品质的方法。在优化基本冷冻保存条件的基础上,通过向猪精液稀释液中添加10~50μM MG冷冻保存,实验结果发现,20μM MG可明显改善冷冻保存的猪精液品质;同时提高猪精子的运动能力,提高精子质膜和顶体完整性、线粒体活性。MG能够通过降降低细胞氧化应激水平,从而提高生殖细胞冷冻后活力,延长精子体外保存时间;同时,冷冻解冻后精子活力与对照组相比能提高10%左右。

Patent Agency Ranking