用于鉴定火烈鸟性别的RAA-PfAgo组合物、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN118813824A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202411086033.2

    申请日:2024-08-08

    Abstract: 本发明涉及一种用于鉴定火烈鸟性别的RAA‑PfAgo组合物、试剂盒及应用,涉及生物检测技术领域。RAA‑PfAgo组合物包括RAA引物对、guide DNA、探针;RAA引物对如SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示,所述guide DNA如SEQ ID NO.13所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.19所示。利用该RAA‑PfAgo组合物能够对雌性火烈鸟检测到扩增信号,而雄性火烈鸟无扩增信号,进而对火烈鸟的性别进行判别,以此RAA‑PfAgo组合物为基础对火烈鸟进行性别鉴定,整个反应不需要复杂的仪器,效率高、特异性好、灵敏度高、检测时间短、无创检测,更适用于现场检测。

    一种与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记IZUMO2及其应用

    公开(公告)号:CN108840919B

    公开(公告)日:2020-07-03

    申请号:CN201810614803.4

    申请日:2018-06-14

    Abstract: 本发明公开一种与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记IZUMO2及其应用。本发明提供了一种新的与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记IZUMO2,其相对含量与种公猪繁殖性能呈显著正相关,通过检测精子蛋白IZUMO2的相对含量,就可判断种公猪的精液受精能力和繁殖性能的高低,可以实现对现有种公猪的繁殖性能进行较准确的评定,在生产中可以利用该蛋白标记准确地进行高繁殖性能种公猪的选育,剔除淘汰繁殖性能差的公猪,有利于提高猪场的繁殖生产成绩和经济效益。在生产上使用方便,通过检测精液蛋白标记IZUMO2含量即可,不会造成种公猪采样损伤和应激。

    一种重组慢病毒载体、重组慢病毒及其应用

    公开(公告)号:CN109439688A

    公开(公告)日:2019-03-08

    申请号:CN201811476996.8

    申请日:2018-12-04

    Abstract: 本发明公开一种重组慢病毒载体、重组慢病毒及其应用。本发明是在慢病毒载体多克隆位点的上游插入HSA信号肽,下游插入纯化标签6×His序列,得到改装的慢病毒载体,然后将6′His-OPN片段插入到改装的慢病毒载体的XbaI和BamHI酶切位点之间得到重组慢病毒载体。本发明通过稳转CHO细胞系,纯化后得到OPN重组蛋白,表达时间和水平可以人为的控制,纯化便捷,结构更接近于天然蛋白,本身更加有活性,功能更全面。该蛋白加入到猪体外受精培养系中,可大大提高受精率,改善胚胎的发育。可进一步应用到猪精液中,提高种猪的繁殖率。此蛋白的出现会给猪场带来更好的发展前景,将养猪业推向新的发展阶段。

    一种与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记SPACA4及其应用

    公开(公告)号:CN108872588A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810613485.X

    申请日:2018-06-14

    Abstract: 本发明公开一种与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记SPACA4及其应用。本发明提供了一种新的与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记SPACA4,其相对含量与种公猪繁殖性能呈显著正相关,通过测定精子蛋白SPACA4的相对含量,用来判断种公猪精液的受精能力和繁殖性能的高低,可实现对现有种公猪的繁殖性能进行较准确的评定,在生产中可以利用该蛋白标记较准确地进行高繁殖性能种公猪的选育,剔除淘汰繁殖性能差的公猪,有利于提高猪场的繁殖生产成绩和经济效益。在生产上使用方便,通过检测精液蛋白标记SPACA4的含量即可,不会造成种公猪采样损伤和应激。

    一种猪生殖干细胞体外分化精子的建立方法

    公开(公告)号:CN105624101A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610087392.9

    申请日:2016-02-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪生殖干细胞体外分化精子的建立方法,其包括步骤:仔猪睾丸组织经分离培养,获取原代仔猪睾丸组织成纤维细胞和生殖干细胞;采用构建体外诱导精子分化的“Niche”的培养基培养睾丸组织成纤维细胞15天,得到体外诱导精子分化的“Niche”饲养层;将生殖干细胞接种至“Niche”饲养层上,培养27~30天,经细胞生物学分析,体外获得单倍体精子样细胞。本发明方法操作简单,重复性好,是猪mGSCs体外分化研究的一项重要突破,这项发明对于猪胚胎体外操作和转基因育种研究将提供重要的基础技术,同时对于其他物种精子体外分化和人类辅助生殖的研究也具有重要的参考价值。

    一种机械法分离培养猪精原干细胞的方法

    公开(公告)号:CN102311941A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110272928.1

    申请日:2011-09-15

    Inventor: 张守全 白银山

    Abstract: 本发明公开了一种机械法分离培养猪精原干细胞的方法。本发明所述方法是结合动物睾丸组织的特点,采用机械法分离后将组织块进行培养,丰富了现有精原干细胞的分离纯化方法。本发明所述方法不用通过酶消化就能获得猪精原干细胞,细胞克隆快,状态好,解决了精原干细胞分离难、数量少、培养条件要求高等问题,比起现有的分离技术,本发明方法操作简单,降低了获得细胞的难度,大大降低了实验成本,提高了实验成功率,应该在本领域进行推广。

    一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法

    公开(公告)号:CN118716335B

    公开(公告)日:2024-11-29

    申请号:CN202411203811.1

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明公开了一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法。属于精液冷冻技术领域。本发明提供了一种冷冻精液稀释液改良配方,明确了稀释液中单独添加海藻糖和L‑半胱氨酸的最适添加浓度,以及两者组合添加的适宜浓度范围,并且在优化后的稀释液中添加EGCG,极大提升冻后精子质量和保存效果。本发明使用细胞冻存管进行精液冷冻保存,精子冻后活力与用冻精细管冷冻效果无差异,精液剂量提高了6倍。本发明还提供了一种精液中甘油的去除方法,甘油去除率高,且受精率和孵化率能达到与原精液授精相当的效果。

    一种猪IZUMO2真核蛋白及其单克隆抗体的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118598971A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410870321.0

    申请日:2024-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种猪IZUMO2真核蛋白及其单克隆抗体的制备方法和应用。本发明验证了猪IZUMO2核苷酸CDS全长序列,设计了一种去除其跨膜结构,仅将其膜外序列进行真核表达纯化与单克隆抗体制备的研究方法,IZUMO2蛋白通过CHO‑K1细胞进行分泌表达,该方法表达的蛋白接近天然蛋白,具有生物学活性且操作简单。通过qPCR和ELISA试验验证了IZUMO2蛋白可以降低由LPS诱导的RAW264.7细胞中炎症因子的表达,具有一定的抗炎能力。且实验发现IZUMO2蛋白处理后能促进公猪精子获能,证明该蛋白在制备促进公猪精子获能的试剂中也能够得到应用。

    一种猪精液冷冻保存液及提高猪精液冷冻保存品质的方法

    公开(公告)号:CN118556671A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410605931.8

    申请日:2024-05-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪精液冷冻保存液及提高猪精液冷冻保存品质的方法。在优化基本冷冻保存条件的基础上,通过向猪精液稀释液中添加10~50μM MG冷冻保存,实验结果发现,20μM MG可明显改善冷冻保存的猪精液品质;同时提高猪精子的运动能力,提高精子质膜和顶体完整性、线粒体活性。MG能够通过降降低细胞氧化应激水平,从而提高生殖细胞冷冻后活力,延长精子体外保存时间;同时,冷冻解冻后精子活力与对照组相比能提高10%左右。

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