公开(公告)号：CN1291024C

公开(公告)日：2006-12-20

申请号：CN200510085470.3

申请日：2005-07-21

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  李雪

Inventor： 韩烈保 ,  李雪 ,  刘君 ,  曾会明 ,  信金娜

IPC: C12N15/82 ,  C12N5/04 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明一种高效获得多年生黑麦草转基因植株的农杆菌介导转化体系及其应用，包括以下步骤：通过高频再生体系获得胚性愈伤受体材料；供体菌株的培养；抑菌素浓度的确定；农杆菌转化条件的优化；转化愈伤的筛选培养和植株再生和抗性植株的分子检测。通过优化农杆菌转化时所涉及到的各项影响条件，包括菌液浓度、侵染时间、侵染条件、共培养时间、抑菌素的添加浓度等，提供了一种适用于多年生黑麦草的农杆菌介导转化体系。克服了现有农杆菌介导技术难以应用于禾本科植物遗传转化的缺陷，建立起了以胚性愈伤为受体材料的高效多年生黑麦草农杆菌介导转化体系。

公开(公告)号：CN1284856C

公开(公告)日：2006-11-15

申请号：CN200510085472.2

申请日：2005-07-21

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  李雪

Inventor： 韩烈保 ,  李雪 ,  刘君 ,  曾会明 ,  信金娜

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/89 ,  C12N15/82 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明一种建立多年生黑麦草高效基因枪转化体系的方法及其应用，通过调控基因枪轰击过程中的各影响因子，包括轰击愈伤组织块大小、金粉包被物、金粉直径、轰击高度、轰击次数等，以及筛选剂的筛选压和筛选时间，成功建立起多年生黑麦草的遗传转化体系。应用该转化体系在建立转基因多年生黑麦草中的用途和应用该转化体系得到的转基因抗旱、耐盐、耐低温多年生黑麦草植株。

公开(公告)号：CN1715418A

公开(公告)日：2006-01-04

申请号：CN200510085474.1

申请日：2005-07-21

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  信金娜

Inventor： 韩列保 ,  信金娜 ,  刘君 ,  曾会明 ,  李雪 ,  何宇锋

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/89 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明采用基因枪转化法对草地早熟禾胚性愈伤组织进行轰击，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。适合于草地早熟禾的基因枪转化参数为：Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA；使用1μm金粉作为质粒DNA的载体；处理1(打枪高度6cm、轰击1次、无渗透处理)与处理5(打枪高度6cm、轰击2次、有渗透处理)进行轰击，转化效果最好。适合于转化愈伤筛选的抗生素浓度为100mg/L。运用此转化体系，成功将三种与干旱、盐胁迫有关的功能基因转入草地早熟禾愈伤组织中，获得了转基因植株。转化频率高达3.92％。

公开(公告)号：CN1715416A

公开(公告)日：2006-01-04

申请号：CN200510085470.3

申请日：2005-07-21

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  李雪

Inventor： 韩烈保 ,  李雪 ,  刘君 ,  曾会明 ,  信金娜

IPC: C12N15/82 ,  C12N5/04 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明一种高效获得多年生黑麦草转基因植株的农杆菌介导转化体系及其应用，包括以下步骤：通过高频再生体系获得胚性愈伤受体材料；供体菌株的培养；抑菌素浓度的确定；农杆菌转化条件的优化；转化愈伤的筛选培养和植株再生和抗性植株的分子检测。通过优化农杆菌转化时所涉及到的各项影响条件，包括菌液浓度、侵染时间、侵染条件、共培养时间、抑菌素的添加浓度等，提供了一种适用于多年生黑麦草的农杆菌介导转化体系。克服了现有农杆菌介导技术难以应用于禾本科植物遗传转化的缺陷，建立起了以胚性愈伤为受体材料的高效多年生黑麦草农杆菌介导转化体系。