测定胰岛中A细胞与B细胞数目比例的方法

    公开(公告)号:CN103267752B

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201310215727.7

    申请日:2013-05-31

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 陈良怡 王意

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及测定胰岛中A细胞与B细胞数目比例的方法。该方法包括:从待测胰岛细胞团中取出一部分,从中分离出多个A细胞和B细胞;分别统计、测量它们的细胞数目和总面积;向胰岛培养基中加入锌离子荧光染料,再将A细胞置于其中培养;后检测A细胞荧光淬灭前的平均荧光值;再加入非荧光素锌离子络合剂,静置后检测A细胞荧光淬灭后的平均荧光值;再用同样的方法检测B细胞荧光淬灭前的平均荧光值和淬灭后的平均荧光值;再从待测胰岛细胞团中取出一部分胰岛细胞团作为检测样本,用同样的方法检测其荧光淬灭前的荧光值和淬灭后的荧光值;根据公式得到结果。本发明的方法可以在活细胞中进行,从而实现无损检测的目的。

    活细胞内蛋白质的免疫荧光标记方法

    公开(公告)号:CN103755778A

    公开(公告)日:2014-04-30

    申请号:CN201410061287.9

    申请日:2014-02-24

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 陈良怡 袁天一

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及活细胞内蛋白质的免疫荧光标记方法,包括下列步骤:本发明先通过将待标记蛋白质的抗体片段与荧光染料偶联,得到荧光标记的抗体片段;再使脂质体与荧光标记的抗体片段结合,得到可运输的标记物;最后将待标记细胞与可运输的标记物一起在培养基中培养,在培养过程中,利用脂质体可以与细胞膜相融合的特点,即可以透膜的性质,将可运输的标记物运至待标记的细胞中,并通过上面的抗原结合片段与待标记的细胞中的待标记蛋白质发生特异性免疫结合,从而将荧光染料连接在待测蛋白质上,最终实现免疫荧光标记活细胞内蛋白质的目的。

    一种微型化自适应光学双光子荧光成像系统及方法

    公开(公告)号:CN107028590B

    公开(公告)日:2023-06-06

    申请号:CN201611097006.0

    申请日:2016-12-02

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种微型化自适应光学双光子荧光成像系统及方法,该成像系统包括:激光光源装置,其用于输出激发光;微型探头装置,其用于接收激光光源装置输出的激发光,并产生荧光信号;以及用于根据活体样本内部的组织平面成像视场的各等晕区的平均波前畸变分布,对各等晕区进行波前校正;波前检测装置,其与微型探头装置连接,用于检测平均波前畸变分布;去扫描构件,其用于在波前检测装置检测平均波前畸变分布之前,实时补偿微型探头装置产生的等晕区离轴效应;荧光成像装置,其用于采集微型探头装置输出的荧光信号,完成活体样本内部组织平面的成像。本发明能够实现具有可在自由活动的动物中进行大视场、高时空分辨率、深层生物组织成像。

    微型双光子显微成像装置、活体样本行为成像系统

    公开(公告)号:CN107049247B

    公开(公告)日:2023-05-02

    申请号:CN201710183353.3

    申请日:2017-03-24

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种微型双光子显微成像装置和方法、活体样本行为成像系统,所述微型双光子显微成像装置包括:飞秒脉冲激光器,其用于产生波长为920纳米的激光;飞秒脉冲激光调制器,其用于接收所述飞秒脉冲激光器输出的激光,并预啁啾补偿激光的脉冲展宽至预设值,并输出;微型探头,所述微型探头包括:扫描成像部分,用于接收所述飞秒脉冲激光调制器输出的激光,该激光对活体样本内部的组织进行扫描,以激发所述活体样本产生荧光信号;和荧光输出光纤,其用于接收所述扫描成像部分输出的所述荧光信号,并进行输出。所述微型双光子显微成像装置能够在自然生理环境中对自由活动的动物的树突和树突棘活动进行稳定的观测。

    一种双模态显微成像系统和方法

    公开(公告)号:CN111610621B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202010059510.1

    申请日:2020-01-19

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本申请实施例公开了一种双模态显微成像系统和方法。所述双模态显微成像系统包括光学衍射层析成像子系统和结构光照明荧光成像子系统;所述光学衍射层析成像子系统用于基于第一激光进行无标记光学衍射层析成像,以获取样本的光学衍射层析图像;所述结构光照明荧光成像子系统用于基于第二激光进行荧光成像,以获取所述样本的结构光照明荧光图像;其中,所述双模态显微成像系统包括相互独立的第一光源和第二光源,所述第一光源用于发射所述第一激光,所述第二光源用于发射所述第二激光。

    一种在体筛选促胰岛β细胞功能药物的方法

    公开(公告)号:CN106755099B

    公开(公告)日:2021-09-14

    申请号:CN201710010182.4

    申请日:2017-01-06

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种在体筛选促胰岛β细胞功能药物的斑马鱼模型,所述在体筛选促胰岛β细胞功能药物的斑马鱼模型,其基因BAC_CH211_69I14上ins基因的编码序列替换为荧光蛋白序列,荧光信号均特异性地表达在胰岛β细胞中,可以指示活体内胰岛β细胞钙离子信号变化。本发明创建了第一个可以指示活体内胰岛β细胞功能的动物模型,本发明的转基因斑马鱼系在其活体中可以实时观测胰岛β细胞内钙信号的变化,直观并准确地报告胰岛β细胞功能状态。运用该转基因斑马鱼系,可以在活体水平进行便捷、自动化和高通量地分析胰岛β细胞的功能特点,从而实现对于促进胰岛β细胞功能药物的高通量筛选,具有重要的现实意义和广泛的应用前景。

    显微光场体成像的重建方法及其正过程和反投影获取方法

    公开(公告)号:CN110989154A

    公开(公告)日:2020-04-10

    申请号:CN201911227287.0

    申请日:2019-12-04

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种显微光场体成像的重建方法及其正过程和反投影获取方法,该方法包括:步骤1,将3D体图像分解成图层图像,每一个图层图像由多个2D子图像组成,每一个2D子图像除坐标(i,j)外像素值为零;步骤2,在每一个图层图像上提取坐标(i,j)处的像素,以重新排列成单通道图像,将所有单通道图像堆叠为多通道图像;步骤3,将光场显微镜的5D点扩散函数重新排列为4D卷积核;步骤4,将步骤2获得的多通道图像作为卷积神经网络的网络输入,将步骤3获得的4D卷积核作为卷积神经网络的权重,采用4D卷积核对多通道图像进行卷积,输出多通道图像;步骤5,将步骤4输出的多通道图像重新排列为光场图像。本发明能够大幅提高卷积计算速度,从而提升图像的重建速度。

    活细胞内蛋白质的免疫荧光标记方法

    公开(公告)号:CN103755778B

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201410061287.9

    申请日:2014-02-24

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 陈良怡 袁天一

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及活细胞内蛋白质的免疫荧光标记方法,包括下列步骤:本发明先通过将待标记蛋白质的抗体片段与荧光染料偶联,得到荧光标记的抗体片段;再使脂质体与荧光标记的抗体片段结合,得到可运输的标记物;最后将待标记细胞与可运输的标记物一起在培养基中培养,在培养过程中,利用脂质体可以与细胞膜相融合的特点,即可以透膜的性质,将可运输的标记物运至待标记的细胞中,并通过上面的抗原结合片段与待标记的细胞中的待标记蛋白质发生特异性免疫结合,从而将荧光染料连接在待测蛋白质上,最终实现免疫荧光标记活细胞内蛋白质的目的。

    一种基于轴向超高速扫描的三轴数字扫描光片显微镜

    公开(公告)号:CN104407436A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410460425.0

    申请日:2014-09-05

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明提供一种基于轴向超高速扫描的三轴数字扫描光片显微镜,主要涉及荧光显微镜领域。通过在激发光路中设置光束光路快速变焦装置,用于快速调制光的焦点位置;和快速光强调制装置,用于快速调制光强;发明了一种在不改变光片厚度的条件下,可以增加并且调节扫描范围的光片显微镜。这项新技术能够提供亚微米级的z轴分辨率,在深层组织中(大于500μm)170×170μm2大小的视野以及高达1毫秒的时间分辨率。2P3A-DSLM解决了小型模式生物体的亚细胞结构以及活体动态过程的长时间成像问题。

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