公开(公告)号：CN104025904B

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201410227831.2

申请日：2014-05-27

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 朴春根 ,  李永 ,  郭民伟 ,  薛寒 ,  田国忠 ,  汪来发 ,  王曦茁 ,  林彩丽

IPC: A01G1/04

Abstract: 本发明公开了一种松茸菌丝的培养方法及专用装置，属于松茸菌丝的人工培养领域。所述专用装置包括：罐体(1)、罐盖(2)、搅拌棒(3)、搅拌叶(4)、出气口(5)、接种口(6)、两个外部循环接口(7)和(8)、取样口(9)、入气口(11)；其中罐体(1)的上部和中部呈球型，下部呈缓坡型罐脖，整个罐体(1)呈气球形。本发明进一步公开了用所述的专用装置大量培养松茸菌丝的方法。本发明松茸菌丝专用培养罐解决了松茸菌丝培养生长缓慢、难以大量生产等问题，具有体积小、成本低、能耗低、操作简便、效率高等优点，在松茸野外人工促繁和功能性代谢产物的深度利用等方面具有重要的应用潜力。

公开(公告)号：CN103555840A

公开(公告)日：2014-02-05

申请号：CN201310538469.6

申请日：2013-11-04

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 汪来发 ,  王曦茁 ,  苟大平 ,  田国忠 ,  朴春根

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明公开了一种检测松材线虫的方法、检测引物及其LAMP检测试剂盒。本发明提供一种检测松材线虫的方法，包括：（1）提取松树木材样品中松材线虫DNA；（2）建立LAMP反应体系，进行环介导等温扩增；（3）根据扩增产物荧光或浊度的变化，判定松树木材样品中是否存在松材线虫。本发明还提供了一种操作简便、成本低、稳定性强的从松树木材中提取松材线虫DNA的方法。本发明进一步提供了检测松材线虫的特异性强、灵敏度高的LAMP引物组。本发明还提供了松材线虫LAMP检测试剂盒，包括：LAMP引物组，反应缓冲液，DNA链置换酶和荧光染料/特异探针。本发明检测试剂盒具有特异性强、灵敏度高、检测方便快捷等优点。

公开(公告)号：CN102428909B

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201110282637.0

申请日：2011-09-22

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 汪来发 ,  朴春根 ,  王曦茁 ,  朱天辉 ,  李永 ,  李沁 ,  郭民伟 ,  林彩丽 ,  田国忠

IPC: A01N1/02

Abstract: 本发明公开了一种松材线虫的冷冻保存及解冻方法，属于线虫的冷冻保存领域。本发明方法包括以下步骤：（1）预处理松材线虫悬液；（2）预处理后的松材线虫悬液中加入冷冻保护剂，平衡处理；（3）平衡处理后的松材线虫悬液程序化降温后冷冻保存；（4）解冻复苏；所述的程序化降温的程序如下：以1℃/min的降温速率将松材线虫悬液从4℃降温至-6℃；再以20℃/min的降温速率降温至-40℃；以10℃/min的升温速率升温至-20℃；最后以1-0.5℃/min的速率将松材线虫悬液降温至-45℃后投入液氮中保存。本发明冷冻保存及解冻方法能显著提高松材线虫的存活率和繁殖能力，能适用于不同株系松材线虫的冷冻保存。

公开(公告)号：CN102524307A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201110433301.X

申请日：2011-12-21

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 王曦茁 ,  汪来发 ,  朴春根 ,  李永 ,  朱天辉 ,  杨佐忠 ,  林彩丽 ,  田国忠 ,  郭民伟

IPC: A01N63/04 ,  A01P5/00

Abstract: 本发明公开了一种防治根结线虫的复合微生物菌剂及其制备方法。本发明复合微生物菌剂包括以下组分：淡紫拟青霉（Paecilomyceslilacinus(Thom)Samson）发酵液，厚垣轮枝菌（Verticilliumchlamydosporium）发酵液。田间防治根结线虫试验结果表明，将淡紫拟青霉菌剂和厚垣轮枝菌菌剂复配在一起后，相比于单独的淡紫拟青霉菌剂或厚垣轮枝菌菌剂，二者呈现出非常显著的协同增效的防治根结线虫功效，对于根结线虫的防效有了显著改善。此外，本发明复合微生物菌剂对于根结线虫的整体防效也更趋稳定。

公开(公告)号：CN101696411B

公开(公告)日：2012-01-11

申请号：CN200910235594.3

申请日：2009-09-29

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 林彩丽 ,  王曦茁 ,  朴春根 ,  田国忠 ,  李永 ,  汪来法 ,  郭民伟

IPC: C12N15/10 ,  C12R1/645 ,  C12R1/79 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明公开了一种用于PCR扩增的真菌DNA快速提取方法，包括以下步骤：(1)培养真菌，得到真菌菌丝体；(2)将真菌菌丝体置于装有裂解液的离心管中；(3)将离心管交替冻融；(4)离心，取上清，加入95％乙醇，混匀，液氮速冻，离心，弃上清，将沉淀风干，即得。本发明方法操作简单，省时省力且减少了研磨过程中真菌DNA的损失，无需用苯酚和氯仿抽提，避免了有毒试剂的接触。本发明方法所提取DNA完整性好，纯度高，收率高，可直接用于PCR扩增反应，能够高效扩增出用于克隆和测序的目的产物。本发明方法提高了真菌DNA的提取效率，降低了真菌DNA提取的成本，可有效提高真菌的分子鉴定和检测效率。

公开(公告)号：CN204090602U

公开(公告)日：2015-01-14

申请号：CN201420275415.5

申请日：2014-05-27

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 朴春根 ,  李永 ,  郭民伟 ,  薛寒 ,  田国忠 ,  汪来发 ,  王曦茁 ,  林彩丽

IPC: A01G1/04

Abstract: 本实用新型公开了一种松茸菌丝培养罐，属于松茸菌丝的人工培养领域。所述培养罐包括：罐体(1)、罐盖(2)、搅拌棒(3)、搅拌叶(4)、出气口(5)、接种口(6)、两个外部循环接口(7)和(8)、取样口(9)、入气口(11)；其中罐体(1)的上部和中部呈球型，下部呈缓坡型罐脖，整个罐体(1)呈气球形。本实用新型松茸菌丝专用培养罐解决了松茸菌丝培养生长缓慢以及难以大量生产等问题，具有体积小，成本低，能耗低，操作简便，效率高等优点，在松茸野外人工促繁和功能性代谢产物的深度利用等方面具有重要的应用潜力。