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公开(公告)号:CN116286686A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310299205.3
申请日:2023-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种双基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失MGF505‑7R和I267L基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪100%存活,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114107228B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202111335696.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 李攀 , 刘华南 , 石正旺 , 马昭 , 申超超 , 齐晓兰 , 吴盼雪 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种缺失十二个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失G‑ACD‑00190、MGF 110‑9L、G‑ACD‑00210、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康、免疫后在猪血液内检测不到病毒的存在,且能够对ASFVCN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114015660B
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202111334156.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN112592401A
公开(公告)日:2021-04-02
申请号:CN202011452599.4
申请日:2020-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种抗非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ11及其制备方法。ScFv抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,ScFv抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞,提取分离淋巴细胞的总mRNA,通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段,以cDNA为模板,在相应的带有Linker接头的引物的作用下,通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列,将ScFv抗体基因序列构建至PET‑30a载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,筛选得到一个针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ11,对筛选得到的ScFv抗体VH‑VLλ11进行初步活性鉴定发现此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN111040031B
公开(公告)日:2020-11-03
申请号:CN201911283478.9
申请日:2019-12-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗非洲猪瘟病毒ScFv抗体及其制备方法,本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞,提取分离到的淋巴细胞的总mRNA,通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段,以cDNA为模板,在相应的带有Linker接头的引物的作用下,通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列,将ScFv抗体基因序列连接至PET‑30a载体,然后转化BL21感受态细胞,从转化后的单个菌落中筛选得到针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体,采用ELISA试验对筛选得到的ScFv抗体进行初步活性鉴定,表明此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN111440900A
公开(公告)日:2020-07-24
申请号:CN202010357491.0
申请日:2020-04-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种用于猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒双重一步直扩实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包含核酸提取液、2×Direct qRT-PCR Mix、酶混合液、阴性对照,阳性对照以及引物和探针的混合物,其中所述的引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.4所示,所述的探针的核苷酸序列为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示,SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示探针的5’端分别标记荧光报告基团HEX和FAM;所述探针的3’端标记小沟结合物(MGB)和荧光淬灭基团(BHQ-1)。本发明可实现在一个反应中同时对猪瘟病毒与非洲猪瘟病毒进行快速鉴别检测,具有特异性高,稳定性好,操作简便的优点。不仅适用于科研单位定量分析,而且适合于各级防控单位,基层兽医站,大中型养殖场等的病原检测分析,具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118852447B
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202410996016.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鼠源抗猪IgA的单链抗体及应用,所述的单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,将鼠源抗体可变区的基因序列与所制备的单链抗体的基因序列进行了比对分析,结果表明所述的单链抗体的基因序列与鼠源抗体可变区的基因序列基本一致,证明所构建的抗体基因序列是正确的,所述的单链抗体填补了目前市场上抗猪源IgA单链抗体的空白,为猪源IgA抗体的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制猪腹泻疾病的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN118852447A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410996016.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鼠源抗猪IgA的单链抗体及应用,所述的单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,将鼠源抗体可变区的基因序列与所制备的单链抗体的基因序列进行了比对分析,结果表明所述的单链抗体的基因序列与鼠源抗体可变区的基因序列基本一致,证明所构建的抗体基因序列是正确的,所述的单链抗体填补了目前市场上抗猪源IgA单链抗体的空白,为猪源IgA抗体的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制猪腹泻疾病的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN117964745A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410170825.1
申请日:2024-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种抗猪圆环病毒2型Cap蛋白的特异性单克隆抗体及应用,单克隆抗体重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR3;单克隆抗体轻链可变区CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR3;并建立了蛋白含量测定的夹心ELISA方法,具有操作简单,灵敏性好、特异性高、应用广泛,可以高通量测定多个样品,检测多种类型PCV2疫苗有效抗原Cap蛋白含量,缩短疫苗检验时间。
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公开(公告)号:CN116589538B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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