公开(公告)号：CN103805621A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201410082515.0

申请日：2014-03-08

Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所

Inventor： 张国利 ,  史飞 ,  于佳 ,  何苗 ,  田园 ,  于新海 ,  刘雨玲 ,  吴广谋 ,  岳玉环

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的新型制备工艺，构建以转硫酶A（TrxA）-组氨酸标签（His6-Tag）-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段，以LHRH-PEA转膜肽-ONC（简称为LPO）为目的片段的融合表达蛋白质，并使这两部分蛋白质以正确的阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种，最终构建与表达六种物质串联的融合蛋白，粗提后，在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化，SUMO蛋白酶酶切，制备的LPO蛋白质比常规方法制备的LPO蛋白对结肠癌HT-29细胞、卵巢癌OVCAR3细胞、子宫颈腺癌HeLa细胞及肝癌HepG-2细胞等肿瘤细胞系的抑制作用均有明显的提高。