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公开(公告)号：CN118969085A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411141685.1
申请日：2024-08-20
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G16B25/00 , G16B20/30 , G16B25/20 , G16B50/10 , C12Q1/6809 , C12Q1/6851 , C12N5/073 , C12N5/077 , C12Q1/02
Abstract: 本发明涉及基因表达与调控技术领域，公开了一种筛选与鉴定猪胚胎附植关键基因的方法，包括：生物信息学鉴定，胚胎收集与培养。该筛选与鉴定猪胚胎附植关键基因的方法，通过分析了猪基因组中的env基因，并利用bulk转录组测序分析了正常和SCNT胚胎与胎盘之间表达差异，筛选到2个候选合胞素基因；通过结构分析发现Sus1与Sus2具经典合胞素基因结构，表达分析发现Sus1在早期胚胎合子基因组激活阶段高表达，Sus2仅在胎盘与肺中表达且胎盘特异高表达，揭示Sus1与Sus2可能介导猪胚胎发育并发挥重要作用，通过细胞融合与假型病毒试验验证发现，Sus1与Sus2均可促进细胞融合并且介导病毒进入，这进一步表明Sus1与Sus2可能参与早期胚胎发育与胎盘形成过程。
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公开(公告)号：CN116814691A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310808237.1
申请日：2023-07-04
Applicant: 西北农林科技大学 , 西宁市动物疫病预防控制中心(挂西宁市畜牧兽医站牌子)
Abstract: 本发明公开了提高epi‑BE4max介导GDF9基因靶位点编辑效率的方法。涉及细胞编辑技术领域。包括使用小分子化合物：NexturastatA与SB‑505124。本发明发现NexturastatA与SB‑505124小分子对GDF9基因G1与G4靶位点编辑效率具有促进作用，NexturastatA与SB‑505124小分子可提高藏绵羊成纤维细胞GDF9基因G1靶位点的编辑效率，其替换频率分别提高了48％与34％。NexturastatA与SB‑505124小分子可提高藏绵羊成纤维细胞GDF9基因G4靶位点的编辑效率，其替换频率分别提高了37％与36％。
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公开(公告)号：CN115896227A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211643365.7
申请日：2022-12-20
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种鉴定外源基因整合位点以增强转基因表达的方法，其方法包括如下步骤：首先从泌乳期和干奶期山羊乳腺组织中分离培养了乳腺上皮细胞，通过免疫染色检测乳腺上皮细胞中角蛋白8的表达，以确定细胞纯度，随后对乳腺上皮细胞进行ATAC‑seq和RNA‑seq；本发明通过筛选出可用于制备乳腺生物反应器的基因整合位点FAM13A，并在细胞水平上验证了该位点的有效性和安全性，将有助于在奶山羊乳腺生物反应器中生产重组蛋白。该增强转基因表达的方法，结合ATAC‑seq和RNA‑seq来筛选奶山羊泌乳期乳腺上皮细胞染色质特异性开放的区域，并利用CRISPR/Cas9将人溶菌酶基因整合到4个不同的开放区域，通过比较在不同打靶位点插入基因的表达水平，筛选出有利于转基因表达的整合位点FAM13A。
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公开(公告)号：CN107988257B
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201711322629.8
申请日：2017-12-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877 , C12N13/00
Abstract: 本发明公开了一种基于供体细胞DNA甲基化水平的修饰提高山羊克隆效率的载体、细胞和方法。本发明提供的载体包括阻遏蛋白TetR表达载体和含有操纵基因TetO的双向表达载体，在融合前将两者共转染到供体细胞中。筛选阳性转染的细胞，药物诱导表达山羊TET3，将TET3诱导表达的阳性细胞作为最终供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的山羊体细胞克隆胚培养。本发明可以有效的降低供体细胞的甲基化水平，纠正克隆胚胎中的异常高甲基化现象，从而显著提高后期山羊体细胞克隆胚胎的发育率和质量，可以高效地体外生产山羊体细胞克隆胚胎，胚胎移植后的克隆山羊的出生率也显著提高。
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公开(公告)号：CN108611371A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810457000.2
申请日：2018-05-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N15/873 , C12N15/62 , A01K67/027 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/85 , A01K67/0278 , A01K2217/072 , A01K2227/102 , A01K2267/01 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61P31/14 , C07K14/005 , C07K2319/00 , C07K2319/21 , C12N9/22 , C12N15/62 , C12N15/65 , C12N15/873 , C12N15/907 , C12N2770/10022 , C12N2770/10034 , C12N2800/107 , C12N2800/30 , C12N2830/50
Abstract: 本发明公开了乳汁中表达GP5-M融合蛋白的羊乳腺生物反应器的制备方法，制备GP5-M融合表达的基因打靶载体，敲入奶山羊β-乳球蛋白第一外显子上，筛选中靶细胞，利用体细胞核移植技术制备转基因奶山羊，通过乳腺生物反应器生产含有GP5-M融合蛋白的乳汁，从乳汁中分离纯化GP5-M融合蛋白，添加佐剂制备基因工程亚单位疫苗，达到防控PRRS的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103305551B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201310232306.5
申请日：2013-06-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基于囊胚上基因表达水平筛选供体细胞系的方法，将来源不同个体的供体细胞系进行核移植后，在囊胚期检测TCF7、DGCR8、SENP7、DNMT3B、Vimentin、IFI6、EFNA2、F5、IRAK1、PRICKLE1、TNFRSF1A、ARG2、NEK6、OCT4、NANOG、SOX2、CDX2、XIST和IGF2R的表达水平，选择在克隆囊胚上这些基因的表达水平全部与正常发育的体外受精囊胚上的表达水平差异不显著的供体细胞系为核供体细胞，可显著提高牛体细胞克隆效率。
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公开(公告)号：CN102807993B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210319587.3
申请日：2012-08-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种骨骼肌特异性的靶向Myostatin基因的miRNA表达载体及重组细胞，首先构建含有靶向Myostatin基因的pre-miRNA和MYL1基因启动子的骨骼肌特异性miRNA表达载体pmiR-MNM2，然后通过电转染法将外源性表达载体pmiR-MNM2导入红安格斯新生牛成纤维细胞并经G418筛选获得阳性细胞，进行PCR鉴定，证实目的基因整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组；将转染pmiR-MNM2的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚，将这些胚胎移入受体牛的子宫，为生产具有双肌性状的红安格斯克隆牛奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN103305551A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310232306.5
申请日：2013-06-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基于囊胚上基因表达水平筛选供体细胞系的方法，将来源不同个体的供体细胞系进行核移植后，在囊胚期检测TCF7、DGCR8、SENP7、DNMT3B、Vimentin、IFI6、EFNA2、F5、IRAK1、PRICKLE1、TNFRSF1A、ARG2、NEK6、OCT4、NANOG、SOX2、CDX2、XIST和IGF2R的表达水平，选择在克隆囊胚上这些基因的表达水平全部与正常发育的体外受精囊胚上的表达水平差异不显著的供体细胞系为核供体细胞，可显著提高牛体细胞克隆效率。
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公开(公告)号：CN102533857A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210039495.X
申请日：2012-02-21
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞，构建了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3，以及基于该载体的包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞系，利用该细胞系作为核供体细胞，为解决奶牛结核病的转基因奶牛提供坚实的基础。本发明通过电转染法将外源性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3导入牛胎儿成纤维细胞，荧光显微镜观察标记基因EGFP的表达情况，并经G418筛选获得阳性细胞，经PCR鉴定，证实目的基因HBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组；最后，将转染HBD3基因的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚。
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公开(公告)号：CN119548286A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411750997.2
申请日：2024-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61D19/02
Abstract: 本发明属于畜牧人工授精技术领域，涉及一种家畜用子宫内连续输精装置，包括装置主体，其内部贯穿设置有一注射通道，注射通道的一端设置注射头，装置主体的一侧设置有装填孔，装填孔与注射通道连通，装填孔内可拆卸设置有密封盖，还包括保护机构和复位机构。通过第一保护外壳配合第二保护外壳，利用复位机构使第一保护外壳和第二保护外壳以向内转动，使第一保护外壳和第二保护外壳相对扣合形成容纳注射头的腔室，从而对注射头进行保护，在闲置和携带装置时对注射头进行防护，通过设置装填孔，在不同母畜个体之间注射时不需要重复进行精液样本补充，提高连续授精的灵活性，同时进一步降低母畜输精时的感染风险，也降低了操作难度。
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