抗H9N2亚型禽流感病毒的纳米抗体、制备方法和应用

    公开(公告)号:CN111171146A

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN202010104052.9

    申请日:2020-02-20

    Abstract: 本发明公开了一种抗H9N2亚型禽流感病毒的纳米抗体、制备方法和应用,该纳米抗体氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过原核表达技术表达了H9N2亚型禽流感病毒的核衣壳蛋白,然后将其作为免疫原免疫双峰驼,构建噬菌体库,再利用噬菌体展示技术筛选获得了1株抗H9N2核衣壳蛋白的纳米抗体,并将该纳米抗体与辣根过氧化物酶(HRP)进行融合表达,成功制备了纳米抗体与HRP的融合蛋白,将该融合蛋白应用到检测鸡血清中抗H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗体中,发现该融合蛋白构建的检测方法灵敏度高,并且具有操作简单、不需要使用二抗、检测样品耗时短等优点。

    表达抗新城疫病毒融合蛋白的细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110257339A

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201910543875.9

    申请日:2019-06-21

    Abstract: 本发明公开了表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体-HRP融合蛋白的细胞系,所述细胞系在中国典型培养物保藏中心的保藏号为C201981;还提供一种该细胞系的构建方法,通过该构建方法可成功将携带纳米抗体-HRP融合基因的慢病毒载体转入表达该外源基因的细胞株中,并稳定表达纳米抗体-HRP融合蛋白;还公开了由此构建方法构建的细胞系,以及该细胞系表达的融合蛋白在血清检测中的应用,具体应用于鸡血清中新城疫抗体的检测,通过本发明的细胞系培养后上清液,按效价1:1000稀释后直接检测阳性鸡血清新城疫抗体与新城疫病毒NP蛋白的结合情况,判断是否感染过新城疫病毒,此检测方法简便易操作,降低生产成本,且提高检测效率。

    一种用于检测PRRSV的RT-RAA-LFD引物探针组、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN118086593A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410430459.9

    申请日:2024-04-11

    Abstract: 本发明涉及家畜病毒检测技术领域,具体涉及一种用于检测PRRSV的RT‑RAA‑LFD引物探针组、试剂盒及应用;本发明引物探针组的核苷酸序列为SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:5,其中下游引物的5'端用生物素标记;所述探针的5'端标记FAM基团,中间用四氢呋喃残基THF替换核苷酸,3'末端标记聚合酶延伸阻断基团C3‑spacer;形成的RT‑RAA‑LFD试剂盒仅需一台恒温加热设备在45min之内即可完成可视化判读最终结果,不受实验场地和操作人员技术水平限制,通过对疑似PRRSV病毒感染病料1326份进行检测,本发明的试剂盒与常规荧光定量RT‑PCR试剂盒作对比发现符合率可达100%,且检测更便捷、灵敏、特异及快速,弥补了现有检测技术的不足。

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