-
公开(公告)号:CN111171146A
公开(公告)日:2020-05-19
申请号:CN202010104052.9
申请日:2020-02-20
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H9N2亚型禽流感病毒的纳米抗体、制备方法和应用,该纳米抗体氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过原核表达技术表达了H9N2亚型禽流感病毒的核衣壳蛋白,然后将其作为免疫原免疫双峰驼,构建噬菌体库,再利用噬菌体展示技术筛选获得了1株抗H9N2核衣壳蛋白的纳米抗体,并将该纳米抗体与辣根过氧化物酶(HRP)进行融合表达,成功制备了纳米抗体与HRP的融合蛋白,将该融合蛋白应用到检测鸡血清中抗H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗体中,发现该融合蛋白构建的检测方法灵敏度高,并且具有操作简单、不需要使用二抗、检测样品耗时短等优点。
-
公开(公告)号:CN110257339A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910543875.9
申请日:2019-06-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体-HRP融合蛋白的细胞系,所述细胞系在中国典型培养物保藏中心的保藏号为C201981;还提供一种该细胞系的构建方法,通过该构建方法可成功将携带纳米抗体-HRP融合基因的慢病毒载体转入表达该外源基因的细胞株中,并稳定表达纳米抗体-HRP融合蛋白;还公开了由此构建方法构建的细胞系,以及该细胞系表达的融合蛋白在血清检测中的应用,具体应用于鸡血清中新城疫抗体的检测,通过本发明的细胞系培养后上清液,按效价1:1000稀释后直接检测阳性鸡血清新城疫抗体与新城疫病毒NP蛋白的结合情况,判断是否感染过新城疫病毒,此检测方法简便易操作,降低生产成本,且提高检测效率。
-
公开(公告)号:CN109593122A
公开(公告)日:2019-04-09
申请号:CN201910023151.1
申请日:2019-01-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/085 , C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/576 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开一种抗猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白单克隆抗体及其制备与应用,主要涉及生物技术领域,该单克隆抗体主要由杂交瘤细胞株1E4分泌,利用原核表达纯化的猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端267个氨基酸为包被抗原,针对该区域的亲和层析纯化的单克隆抗体mAb-1E4为阻断抗体,通过HRP标记的特异性单克隆抗体,使其能够通过HRP的底物TMB或DAB直接检测到该单克隆抗体,并应用于制备检测猪戊型肝炎病毒的药物中。
-
公开(公告)号:CN116082497B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202210866959.8
申请日:2022-07-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/08 , C07K19/00 , C12N15/13 , C12N15/62 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于病毒诊断以及治疗药物技术领域,具体涉及一种抗ASFV‑CD2v蛋白的纳米抗体及其应用。该抗ASFV‑CD2v蛋白的纳米抗体的氨基酸序列包含如SEQ ID No.1所示序列,该抗ASFV‑CD2v蛋白的纳米抗体用于检测猪血清中ASFV‑CD2v抗体时,检测方法简单,检测样品耗时短,且不需要使用酶标二抗。
-
公开(公告)号:CN118184775A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410335831.8
申请日:2024-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/12 , C07K19/00 , C12N9/08 , C12N15/13 , C12N15/62 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种牛布鲁氏菌纳米抗体及其制备方法和应用,属于疫病抗体检测技术领域。所述牛布鲁氏菌纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,该纳米抗体或者其与辣根过氧化物酶的融合蛋白可作为检测试剂建立竞争ELISA,用于检测牛血清中抗布鲁氏菌抗体,操作简单,检测样品耗时短,且不需要使用酶标二抗。简化了后续基于该方法生产ELISA试剂盒的工艺,极大的降低了生产成本。因此,利用纳米抗体建立动物疫病的检测技术具有很好的市场应用前景。
-
公开(公告)号:CN118086593A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410430459.9
申请日:2024-04-11
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及家畜病毒检测技术领域,具体涉及一种用于检测PRRSV的RT‑RAA‑LFD引物探针组、试剂盒及应用;本发明引物探针组的核苷酸序列为SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:5,其中下游引物的5'端用生物素标记;所述探针的5'端标记FAM基团,中间用四氢呋喃残基THF替换核苷酸,3'末端标记聚合酶延伸阻断基团C3‑spacer;形成的RT‑RAA‑LFD试剂盒仅需一台恒温加热设备在45min之内即可完成可视化判读最终结果,不受实验场地和操作人员技术水平限制,通过对疑似PRRSV病毒感染病料1326份进行检测,本发明的试剂盒与常规荧光定量RT‑PCR试剂盒作对比发现符合率可达100%,且检测更便捷、灵敏、特异及快速,弥补了现有检测技术的不足。
-
公开(公告)号:CN114456263A
公开(公告)日:2022-05-10
申请号:CN202210071936.8
申请日:2022-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明适用于基因工程技术领域,提供了一种特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体及应用,纳米抗体的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,纳米抗体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。本发明的特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体可以特异性结合人、猪和兔HEV 239蛋白,利用原核表达系统表达并纯化纳米抗体,与猪HEV 239蛋白或猪HEV分别孵育后接种HpG2细胞,从而发挥抗病毒功能。
-
公开(公告)号:CN111944044A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN202010883659.1
申请日:2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了2株抗ASFV-p30蛋白的纳米抗体及其制备方法和应用,以及所述纳米抗体与HRP融合蛋白的表达制备方法,同时评价了所述纳米抗体与HRP融合蛋白在检测猪血清中抗ASFV抗体中的应用,属于生物技术领域。将所述抗ASFV-p30蛋白纳米抗体与HRP融合蛋白应用于建立检测猪血清中抗ASFV抗体的ELISA中,建立的方法操作简单,检测样品耗时短,不需要使用酶标二抗。为后续将该两株纳米抗体应用于ASFV抗体检测的商品化ELISA试剂盒的开发提供了关键的材料。
-
公开(公告)号:CN116554316B
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202310616437.7
申请日:2023-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明适用于基因工程技术领域,提供了一种特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体及应用,纳米抗体的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,纳米抗体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。本发明的特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体可以特异性结合人、猪和兔HEV 239蛋白,利用原核表达系统表达并纯化纳米抗体,与猪HEV 239蛋白或猪HEV分别孵育后接种HpG2细胞,从而发挥抗病毒功能。
-
公开(公告)号:CN116082497A
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN202210866959.8
申请日:2022-07-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/08 , C07K19/00 , C12N15/13 , C12N15/62 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于病毒诊断以及治疗药物技术领域,具体涉及一种抗ASFV‑CD2v蛋白的纳米抗体及其应用。该抗ASFV‑CD2v蛋白的纳米抗体的氨基酸序列包含如SEQ ID No.1所示序列,该抗ASFV‑CD2v蛋白的纳米抗体用于检测猪血清中ASFV‑CD2v抗体时,检测方法简单,检测样品耗时短,且不需要使用酶标二抗。
-
-
-
-
-
-
-
-
-