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公开(公告)号:CN119139459A
公开(公告)日:2024-12-17
申请号:CN202411603641.6
申请日:2024-11-12
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用。本发明选择(H4)2连接肽将ISG15与IFN‑λ3连接制备得到ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,可以实现IFN‑λ3蛋白的稳定、大量表达,解决了无法使用原核表达系统大量生产IFN‑λ3的技术问题,同时,本发明对ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在体内的抗PRRSV活性进行了验证,证明重组表达的ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白对抑制PRRSV在体内的复制有抑制效果,减轻肺脏中的炎性因子的分泌并改善了PRRSV感染后引起的病毒血症。
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公开(公告)号:CN113512555B
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202110663798.8
申请日:2021-06-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明通过对GP5‑M蛋白进行改造,得到了能够高效复制的重组杆状病毒,其培养滴度相对更高,且利用制备得到的PRRSV病毒粒子相似的病毒样颗粒进一步制备疫苗,所述疫苗能够产生更高滴度的中和抗体,且免疫仔猪的抗体消涨规律表明,本发明的疫苗能够更早地刺激机体产生高浓度的抗体,且能够在二免后刺激机体产生更高的平均抗体效价,实现更好的免疫保护。
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公开(公告)号:CN113425838B
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202110663821.3
申请日:2021-06-16
Applicant: 西北农林科技大学 , 陕西诺威利华生物科技有限公司
Abstract: 本发明通过对GP5‑M蛋白进行改造,得到了能够高效复制的重组杆状病毒,其培养滴度相对更高,且利用制备得到的PRRSV病毒粒子相似的病毒样颗粒与IgM进一步复合制备得到IgM‑RPPSV VLPs免疫复合物,所述IgM‑RPPSV VLPs免疫复合物能够更早地刺激机体产生高浓度的抗体。
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公开(公告)号:CN113512555A
公开(公告)日:2021-10-19
申请号:CN202110663798.8
申请日:2021-06-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明通过对GP5‑M蛋白进行改造,得到了能够高效复制的重组杆状病毒,其培养滴度相对更高,且利用制备得到的PRRSV病毒粒子相似的病毒样颗粒进一步制备疫苗,所述疫苗能够产生更高滴度的中和抗体,且免疫仔猪的抗体消涨规律表明,本发明的疫苗能够更早地刺激机体产生高浓度的抗体,且能够在二免后刺激机体产生更高的平均抗体效价,实现更好的免疫保护。
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公开(公告)号:CN113425838A
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202110663821.3
申请日:2021-06-16
Applicant: 陕西诺威利华生物科技有限公司 , 西北农林科技大学
Abstract: 本发明通过对GP5‑M蛋白进行改造,得到了能够高效复制的重组杆状病毒,其培养滴度相对更高,且利用制备得到的PRRSV病毒粒子相似的病毒样颗粒与IgM进一步复合制备得到IgM‑RPPSV VLPs免疫复合物,所述IgM‑RPPSV VLPs免疫复合物能够更早地刺激机体产生高浓度的抗体。
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公开(公告)号:CN111087468A
公开(公告)日:2020-05-01
申请号:CN202010069336.9
申请日:2020-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液-SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体5D9。用ELISA技术测定该单克隆抗体5D9的亚型为IgM型单克隆抗体。PRRSV-I型和PRRSV-II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体5D9对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN111471104B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202010355075.7
申请日:2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体MAB‑GP3。用ELISA技术测定该单克隆抗体MAB‑GP3的亚型为IgG2b型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体MAB‑GP3对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN112285347A
公开(公告)日:2021-01-29
申请号:CN202011062115.5
申请日:2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569 , G01N27/62 , C07K14/08
Abstract: 本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗原的猪白细胞抗原II类DR分子(SLA‑DR),将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后,脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列,鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列,并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化,作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测,以寻找可被病原感染的猪血清样本识别的CD4+T表位抗原肽序列,进一步将所有抗体ELISA检测为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行重组表达,作为人工抗原用于给定病原的特异性抗体检测。
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公开(公告)号:CN111471104A
公开(公告)日:2020-07-31
申请号:CN202010355075.7
申请日:2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液-SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体MAB-GP3。用ELISA技术测定该单克隆抗体MAB-GP3的亚型为IgG2b型单克隆抗体。PRRSV-I型和PRRSV-II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体MAB-GP3对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN111450248A
公开(公告)日:2020-07-28
申请号:CN202010354506.8
申请日:2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明采用筛选得到的对于PRRSV具有广谱中和活性的单克隆抗体MAB-GP3为活性成分,制备得到对PRRSV感染具有预防和治疗效果的药物制剂,将其用于PRRSV感染的治疗,其可以有效的减轻肺部宏观病变,同时还能有效的提升感染动物的存活率。
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