一种度胺类药物耐药性检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN117487916A

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202311424046.1

    申请日:2023-10-30

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 周亮 邹露 许国强

    Abstract: 本发明涉及一种度胺类药物耐药性检测试剂盒及其应用。本发明从CRBN的亲和质谱数据中发现KDM5C的多个短肽,首次发现赖氨酸特异性去甲基化酶KDM5C与CRBN蛋白的相互作用,并通过蛋白免疫共沉淀和免疫印迹法证实。降低KDM5C的表达能够使CRBN的表达量也相应降低,导致以CRBN作为靶点的度胺类药物出现耐药性强的情况,为改善由于对度胺类药物耐药性导致的治疗效果差的问题提供了新的可能性。

    一种类泛素修饰蛋白底物鉴定方法

    公开(公告)号:CN105087619B

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201510288478.3

    申请日:2015-05-29

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 朱莹 许国强

    Abstract: 本发明涉及一种类泛素修饰蛋白底物鉴定方法,该方法首先构建带有亲和标签的类泛素修饰结合酶与类泛素修饰蛋白融合基因表达质粒,然后将所述融合基因表达质粒转染到真核细胞中,48或72小时后收集细胞并裂解,获得全蛋白裂解液,通过亲和标签分离纯化类泛素修饰蛋白底物,进一步通过胰蛋白酶酶解类泛素修饰蛋白底物,提取纯化多肽,利用质谱分析鉴定修饰底物多肽,搜索数据库获得多肽序列,比对对照样品和修饰底物的分子量变化最终确证类泛素修饰蛋白底物,本发明通过表达类泛素修饰结合酶和类泛素修饰蛋白的融合蛋白来提高类泛素修饰蛋白对底物蛋白的修饰程度,并通过亲和层析提高对底物蛋白的分离效率,可更可靠地确证类泛素修饰蛋白的底物。

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