枇杷黄酮醇3-O-半乳糖基转移酶EjUGT78T4基因及其编码蛋白和应用

    公开(公告)号:CN117867058A

    公开(公告)日:2024-04-12

    申请号:CN202410091487.2

    申请日:2024-01-23

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种黄酮醇3‑O‑半乳糖基转移酶EjUGT78T4基因,该基因从枇杷果实中分离获得,核苷酸序列如SEQ:NO.1所示,其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ:NO.2所示。本发明首次克隆并验证了枇杷黄酮醇3‑O‑半乳糖苷合成相关的EjUGT78T4基因的功能。本发明通过构建重组质粒,实现了EjUGT78T4基因在大肠杆菌中的重组表达,提供转基因工程菌。在体外,EjUGT78T4重组蛋白可将黄酮醇转化为黄酮醇3‑O‑半乳糖苷。本发明可应用于基于基因工程的植物基因组改造,定向改良植物黄酮醇组分,增加食物的保健功能;也可应用于基于代谢工程的黄酮醇糖苷工业化生产。

    一种从杨梅叶中同时分离纯化两种没食子酰基化杨梅苷的方法及用途

    公开(公告)号:CN115636859A

    公开(公告)日:2023-01-24

    申请号:CN202211327485.6

    申请日:2022-10-26

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种从杨梅叶中同时分离纯化杨梅素‑3‑O‑(2''‑没食子酰基)‑α‑l‑鼠李糖苷和杨梅素‑3‑O‑(4''‑没食子酰基)‑α‑l‑鼠李糖苷的方法及在制备α‑葡萄糖苷酶抑制剂中的应用,所述方法包括:醇提浓缩、固相萃取柱吸附、制备液相色谱纯化,分离制备得到高纯度的杨梅素‑3‑O‑(2''‑没食子酰基)‑α‑l‑鼠李糖苷单体和杨梅素‑3‑O‑(4''‑没食子酰基)‑α‑l‑鼠李糖苷单体,其纯度均可高达98%以上。与以往的黄酮醇分离纯化的方法相比,该工艺分离步骤简单易操作,且耗时短,对环境污染小;经活性试验发现,所述杨梅素‑3‑O‑(2''‑没食子酰基)‑α‑l‑鼠李糖苷单体和杨梅素‑3‑O‑(4''‑没食子酰基)‑α‑l‑鼠李糖苷单体能够显著抑制α‑葡萄糖苷酶的活性,可用于制备α‑葡萄糖苷酶抑制剂,对杨梅叶的深入研究与进一步开发利用具有重大的意义。

    一种基于分离的分段同源多糖组的多糖结构解析方法

    公开(公告)号:CN117990732A

    公开(公告)日:2024-05-07

    申请号:CN202410394775.5

    申请日:2024-04-02

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明属于生物检测分析技术领域,具体提供一种基于分离的分段同源多糖组的多糖结构解析方法,所述方法包括分离同源多糖,绘制洗脱曲线,选出n种多糖构建分段同源多糖组,测定所述分段同源多糖组中每种多糖的纯度和分子量,对每种多糖进行均一性分析,测定每种多糖的单糖组成、糖苷键和官能团判断每种多糖的结构相似性,利用特定的分段同源多糖组中每种多糖之间的结构相似性进行核磁解析,利用所述分段同源多糖组中的每种多糖的强信号峰互相补充所述分段同源多糖组中的每种多糖的弱信号峰,从而达到准确、快速的一次性解析多个多糖的完整化学结构的目的,显著提高了弱信号峰的解析程度和解析准确性、多糖的解析完整性,对解析人员的要求低。

    一种基于聚乙二醇型离子液体分离纯化粗多糖的方法

    公开(公告)号:CN114409825A

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202210199663.5

    申请日:2022-03-01

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明具体公开了一种基于聚乙二醇型离子液体分离纯化粗多糖的方法,属于活性物质分离纯化技术领域,所述的聚乙二醇型离子液体为[PEG3mim][PF6],[PEG3mim][PF6]可用于选择性沉淀多糖类化合物。其特征主要包括以下步骤:以葡聚糖为模型化合物,考察离子液体阳离子侧链链长对多糖回收率的影响;沸水提取中草药多糖,离心,醇沉,冷冻干燥,获得粗多糖;[PEG3mim][PF6]组成的离子液体体系对多糖进行沉淀,获得精制多糖;精制多糖的单糖组成分析。本发明的离子液体适合于快速大量生产活性多糖,具有绿色、环保和高效等优点,普遍适用于粗多糖的纯化和精制。

    一种从早香柚油胞层中分离纯化佛手柑素的方法

    公开(公告)号:CN107383040B

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201710543355.9

    申请日:2017-07-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供一种从早香柚油胞层中分离纯化佛手柑素的方法,采用硅胶柱色谱和高速逆流色谱(HSCCC)联用技术,以早香柚油胞层冷干粉为原料,先制备硅胶粗提物粉末,再经HSCCC进一步分离纯化得到高纯度的佛手柑素。本发明工艺简单,不需要惰性气体保护及高温高压;生产周期短,流程安全、易操作;整个过程使用HPLC精确定量,准确度高;提取和HSCCC所用溶剂可回收后反复使用,成本低。本发明纯化的产物纯度高,回收率高,最终纯化得到的佛手柑素纯度≥94%,适用于科学研究和工业化生产。

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