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公开(公告)号：CN111849848A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010715301.8
申请日：2020-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种抗噬菌体的大肠杆菌底盘细胞的构建及应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌BL21中过表达LysR家族转录调控因子YafC编码基因yafC，显著提高了大肠杆菌抗噬菌体能力；进一步利用本发明选育得到的抗噬菌体大肠杆菌BL21构建γ-氨基丁酸(GABA)生产菌株BL21-pET28a(+)-YafC-Gad，并用于生物转化生产γ-氨基丁酸发现，整个发酵进程中不再存在噬菌体感染的风险，且重组菌株GABA的产量高达278.3±16.8g/L，摩尔转化率达98.4±0.3％。
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公开(公告)号：CN117467682A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311398501.5
申请日：2023-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于N端编码序列增强L‑色氨酸合成的方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑色氨酸合成关键限速酶邻氨基苯甲酸合酶TrpE的N端编码序列前随机添加10个氨基酸的核苷酸序列，并与绿色荧光蛋白进行融合，构建TrpE‑NCS随机突变文库，最终筛选得到表达强度最高的N端编码序列序列比对照菌株约高出6.2倍。最后，将筛选得到的最优N端编码序列插入到基因trpE的N端，明显增强了ANTA合酶的表达，构建得到的工程菌株TRP08的L‑色氨酸产量在5L发酵罐中可达16.28g/L，约比对照菌株提高18.06％。综上，N端编码序列可作为合成生物学元件用于代谢途径的基因表达调控。
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公开(公告)号：CN114717172B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210277913.2
申请日：2022-03-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种合成L‑缬氨酸的大肠杆菌及其构建方法与应用，涉及生物技术领域。本发明所述大肠杆菌命名为大肠杆菌W3110，于2022年03月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏编号为CCTCC M 2022293。所述重组大肠杆菌以大肠杆菌为出发菌株，过表达转录调控因子，得到所述重组大肠杆菌。本发明所述的合成L‑缬氨酸的重组大肠杆菌在5L发酵罐微溶氧条件下发酵测试菌株，L‑缬氨酸产量达到92g/L，菌体OD为106。
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公开(公告)号：CN114958693A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210770685.2
申请日：2022-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一株枯草芽孢杆菌、一种重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于微生物发酵技术领域。本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)RF1‑6是以核黄素高产菌株RF1作为出发菌株，经过基因改造和诱变，筛选得到的核黄素产量最高的突变株，保藏编号为CCTCCNO：M2022565。与核黄素高产菌株RF1相比，核黄素产量能够提高22.8％。
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公开(公告)号：CN111849848B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202010715301.8
申请日：2020-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种抗噬菌体的大肠杆菌底盘细胞的构建及应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌BL21中过表达LysR家族转录调控因子YafC编码基因yafC，显著提高了大肠杆菌抗噬菌体能力；进一步利用本发明选育得到的抗噬菌体大肠杆菌BL21构建γ‑氨基丁酸(GABA)生产菌株BL21‑pET28a(+)‑YafC‑Gad，并用于生物转化生产γ‑氨基丁酸发现，整个发酵进程中不再存在噬菌体感染的风险，且重组菌株GABA的产量高达278.3±16.8g/L，摩尔转化率达98.4±0.3％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113564183A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110800395.3
申请日：2021-07-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过过表达基因psrA提高粘质沙雷氏菌合成灵菌红素的方法，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在粘质沙雷氏菌中过表达LysR家族转录调控因子PsrA编码基因BVG90_12635(psrA)，显著提高了粘质沙雷氏菌合成灵菌红素能力；将利用本发明的方法制备得到的重组粘质沙雷氏菌在发酵培养基中发酵72h产灵菌红素发现，重组菌株发酵产灵菌红素能力较野生型菌株JNB5‑1相比，提高了33.58％。
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公开(公告)号：CN110846339A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201910993862.1
申请日：2019-10-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高粘质沙雷氏菌抗酸胁迫能力的方法，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在粘质沙雷氏菌中过量表达DNA结合蛋白XrpA显著提高了粘质沙雷氏菌的抗酸胁迫能力；将利用本发明的方法制备得到的重组粘质沙雷氏菌在pH为4.0的环境下培养12h后的存活率为野生型粘质沙雷氏菌的1.4倍。
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公开(公告)号：CN117467588A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311398492.X
申请日：2023-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于转录调控因子TrpR2调节L‑色氨酸合成的方法，属于生物工程技术领域。本发明在L‑色氨酸生产菌株TRP10中对转录调控因子TrpR2进行敲除发现，构建得到的工程菌株TRP11能够显著提高L‑色氨酸的产量，于5L发酵罐中培养48h后测定发现L‑色氨酸产量提高至23.33g/L，比对照菌株的L‑色氨酸产量提高18.20％。同时，TrpR2的敲除不会影响发酵过程中菌株的生长。通过敲除转录因子TrpR2间接影响了L‑色氨酸合成的关键基因，从而影响了L‑色氨酸的合成。综上，采用转录因子工程策略在增强目标产物的合成中具有极大潜力。
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公开(公告)号：CN116334302A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310264922.2
申请日：2023-03-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/6897 , C12N15/70 , C12N15/65 , C12N15/113 , C40B30/06 , C40B50/06 , C40B40/02
Abstract: 本发明公开了一种筛选强组成型启动子的方法，属于生物技术领域。本发明为解决目前大多数启动子文库的构建都是基于在现有启动子的基础上进行随机突变或是通过组学数据筛选的技术问题，基于对大肠杆菌MG1655，枯草芽孢杆菌168及谷氨酸棒杆菌ATCC13032的基因组进行随机打断，并将打断后的片段连接在报告基因绿色荧光蛋白GFP的上游，然后克隆至载体pUC19中，构建得到3个不同来源的随机文库。采用流式细胞仪技术(FACS)分选荧光强度明显增高的突变子，最终筛选得到一株来源于枯草芽孢杆菌168的突变子，其荧光强度比对照菌株高出19.7倍。最后通过序列截短鉴定出这段序列中最关键的60bp启动子序列。
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公开(公告)号：CN114854780A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210386334.1
申请日：2022-04-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于平衡基因表达高效合成核黄素的方法，属于合成生物学技术领域。本发明通过生成可调基因间区文库(TIGR)来调节操纵子内mCherry和egfp基因的表达，并确认两个报告基因的相对表达。TIGR文库可以协调报告基因在大肠杆菌中的表达率超过180倍，在枯草芽孢杆菌中的表达率超过70倍。使用TIGR文库调节zwf、ribBA和ywlf基因的表达，以增加核黄素的生物合成。根据核黄素的荧光特性，用96孔板快速筛选出最佳组合突变体。筛选出最佳工程菌，其核黄素产量为2.7g/L，在摇瓶中增加64.35％。最后，在补料分批发酵中，核黄素效价增加59.27％，达到11.77g/L。将有助于枯草杆菌核黄素及相关产品的工业化生产。
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