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公开(公告)号：CN112410236A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011322518.9
申请日：2020-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种类大牻牛儿烯合成酶C突变体及构建方法与应用，属于生物催化技术领域。本发明采用重组DNA技术将类大牻牛儿烯合成酶C编码基因，将其克隆至表达载体，并转化宿主，获得一株高产类大牻牛儿烯合成酶C的重组菌株。针对类大牻牛儿烯合成酶C活性位点E474周围loop结构上的氨基酸残基进行定向进化，筛选获得高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体。本发明还提供了上述方法在制备含西柏三烯醇的产品中的应用。采用本发明获得的高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体及方法可高效催化生产西柏三烯醇，可促进其在农业及烟草等领域中的应用。
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公开(公告)号：CN111826389A
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN202010455589.X
申请日：2020-05-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/57 , C12N1/21 , C12N9/04 , C12N9/08 , C12N9/10 , C12N9/16 , C12N9/26 , C12N9/48 , C07K14/78 , C07K14/435 , C12P21/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，通过同源重组的方法将包含1-4个SD序列的基因片段整合至编码D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶DacA的启动子与DacA编码基因之间。本发明通过整合不同的SD序列至大肠杆菌DacA基因的启动子与DacA编码基因之间，提高了D,D-羧肽酶DacA的表达，从而提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号：CN105063131B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201510533363.6
申请日：2015-08-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明是在黑曲霉GB0506糖化酶发酵酶活线性增长末期，将发酵液分配到几个未使用的发酵罐中，加新鲜发酵培养基继续发酵，确定发酵液分割的最佳时机为发酵118‑120小时，最佳分割方式为1罐分割为3罐。与原有工艺相比，采用该法获得的发酵液最终发酵酶活没有明显变化，但平均每一发酵罐在罐发酵时间大幅下降，极大节约发酵过程电能消耗。本发明还提供一种针对将发酵液平均分配到3个发酵罐的发酵罐组合使用方法，在相应工艺条件下，单位发酵体积的发酵强度提高54%以上。利用发酵液分割法的糖化酶发酵新工艺为酶制剂生产企业在原有设备基础上大幅提高发酵罐使用效率。
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公开(公告)号：CN105104927B
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201510439893.4
申请日：2015-07-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种以淀粉支链水解酶替代明矾的酶法粉丝制作方法，属于食品工程和酶工程技术领域。本发明以各种植物淀粉为原料，在粉丝制作传统方法的基础上，在粉丝制作的淀粉糊化阶段后，增加一个淀粉支链水解酶作用阶段，即在淀粉糊化阶段后将淀粉糊化液温度降至适合淀粉支链水解酶作用的温度再加入普鲁兰酶、异淀粉酶等水解淀粉支链即α‑1,6糖苷键的水解酶，适当保温。也可以在糊化前加入淀粉支链水解酶，在淀粉糊化后将糊化液在适合淀粉支链水解酶作用的温度适当保温。其它步骤与粉丝制作的传统方法一样。本发明提供一种不使用明矾的粉丝制作方法，所使用的添加剂淀粉支链水解酶相对明矾有较好的食品安全性并且用量较小，与现有的方法相比可以减少食品添加剂的使用并且具有易于放大的优点。
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公开(公告)号：CN105018364B
公开(公告)日：2019-01-29
申请号：CN201510413914.5
申请日：2015-07-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株表达果胶酯酶的酿酒酵母工程菌及应用，属于发酵工程领域。本发明所提供的酿酒酵母工程菌，是将果胶酯酶的编码基因与α‑凝集素的编码基因融合后转化酿酒酵母，重组质粒整合到宿主的染色体NDA上，得到在细胞表面锚定表达果胶酯酶的菌株，果胶酯酶酶活达到2.6U/g。所述菌株用于甘薯和木薯等原料的酒精发酵生产，不仅能够提高酒精发酵效率，而且能显著降低发酵过程中发酵液的粘度，有利于酶的作用和酿酒酵母代谢，还可以降低设备负担，节约能耗。
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公开(公告)号：CN105671025A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610123619.0
申请日：2016-03-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB基因及应用。本发明提供了一种来源于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述dacB的编码基因dacB。本发明的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-丙氨酸(D-Ala)，导致转肽反应中供体不可用，从而控制肽聚糖的网状交联水平，可以提高E.coli蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号：CN104774817A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510179542.4
申请日：2015-04-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12P19/18 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT-01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质：1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达；2)具有较宽的温度稳定性性，在50以下酶稳定；3)具有较宽的pH稳定范围：在pH4.0-9.0条件下稳定(酶活力残留＞90％)；4)具有高低聚果糖转化率，其浓度为57.3％(w/w)。
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公开(公告)号：CN101974543B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010256287.6
申请日：2010-08-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种来源于芽孢杆菌的胞外普鲁兰酶编码基因及其应用，属于微生物、酶工程技术领域。本发明筛选到一株具有普鲁兰分解能力的芽孢杆菌Bacillus sp.042，利用反向PCR技术克隆了普鲁兰酶编码基因pulA042编码区完整序列，序列分析显示该基因编码区全长2571碱基，编码一856个氨基酸残基的多肽链，多肽链N端32个氨基酸残基组成一典型的信号肽，因此基因pulA042编码一种胞外普鲁兰酶。Bacillus sp.042普鲁兰酶基因pulA042的表达产物具有分解普鲁兰和红色普鲁兰的活性，能降解淀粉中α-1，6糖苷键，不降解α-1，4糖苷键，是一种I型普鲁兰酶。利用基因pulA042生产的重组酶在淀粉加工中用于分解淀粉或糊精分子中α-1，6糖苷键。
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公开(公告)号：CN102277308A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215771.9
申请日：2011-07-29
Applicant: 江南大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 本发明涉及一种用于麦芽糖生产的固定化催化剂及其制备方法，属于酶工程和农副产品深加工技术领域。本发明以红薯为原料，用反转录技术提取其β-淀粉酶基因，再与来源于酿酒酵母的α凝集素编码基因在读框内进行融合，融合基因转化酿酒酵母W303-1A，获得了β-淀粉酶在酵母表面锚定的酿酒酵母，进一步大规模培养此重组酵母细胞，收获细胞，用化学、物理方法稳定和交联此重组酵母，获得固定化β-淀粉酶，该酶活为50~250DPo/g。运用该固定化β-淀粉酶可从液化淀粉直接生产出55%~65%的高麦芽糖浆；此固定化β-淀粉酶反复使用10次，酶活丢失率小于20%。
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