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公开(公告)号：CN108929882A
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201810884050.9
申请日：2018-08-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/75
Abstract: 本发明公开了一种地衣芽孢杆菌的基因编辑方法及应用，实现了基因敲除及基因敲入，属于基因工程领域。该方法首先借助温度敏感型质粒PNZT1为载体构建温敏敲除(入)质粒；然后将敲除(入)质粒转化地衣芽孢杆菌经过变温传代实现敲除(入)盒同源替换靶基因；最后导入FLP重组酶表达质粒介导抗性基因的回收。本发明首次在地衣芽孢杆菌基因编辑中运用FLP/FRT重组系统并实现了无标记基因敲除及基因敲入，为地衣芽孢杆菌的代谢工程改造提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN107815475A
公开(公告)日：2018-03-20
申请号：CN201711293385.5
申请日：2017-12-08
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
CPC classification number: C12P7/48
Abstract: 本发明公开了一种通过两阶段发酵生产柠檬酸发酵液的方法，包括如下步骤：(1)取黑曲霉麸曲孢子，加入无菌水，制成孢子悬液，转接至种子罐内培养16～24h，得到种子液；(2)在发酵罐内加入占发酵罐有效体积8～12％的玉米液化液，将温度降至35～39℃；(3)将步骤(1)所得的种子液转至发酵罐内培养2～8h；(4)再在发酵罐内加入占有效体积60～64％的糖液继续培养，还原糖低于5g/L停止发酵，得到柠檬酸发酵液。本发明两阶段培养，避免了发酵前期pH下降和营养物质浓度对菌体生长的影响，提高淀粉质原料的利用效率和利用率，降低发酵残糖，提高糖酸转化率；增加产酸速率，缩短发酵周期。
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公开(公告)号：CN107287144A
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201710591287.3
申请日：2017-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞，所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞的制备方法为：首先经过重组过表达获得一种L-谷氨酸氧化酶，然后再对枯草芽孢杆菌内源谷氨酸分解途径进行代谢工程改造，最后改造了枯草芽孢杆菌对谷氨酸转运途径，制得所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞，即重组枯草芽孢杆菌。本发明为参与细胞内源代谢的全细胞转化系统的构建及改良提供了实验依据，为利用枯草芽孢杆菌全细胞高效转化L-谷氨酸生产α-酮戊二酸提供借鉴。
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公开(公告)号：CN107189990A
公开(公告)日：2017-09-22
申请号：CN201710546679.8
申请日：2017-07-06
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0071 , C12N9/12 , C12N9/93 , C12P13/24 , C12Y114/11002 , C12Y207/02011 , C12Y603/01002
Abstract: 本发明公开了一种脯氨酸‑4‑羟化酶，编码该所述酶的基因序列如SEQ ID No.1所示；所述酶的蛋白质序列如SEQ ID No.2所示。本发明依据芽孢杆菌密码子偏好性优化脯氨酸‑4‑羟化酶基因，并制备含有该基因的重组枯草芽孢杆菌，用于合成反式‑4‑羟脯氨酸；本发明为利用枯草芽孢杆菌合成反式‑4‑羟脯氨酸的工业化生产提供了良好的前景。
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公开(公告)号：CN105567749A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201610135144.7
申请日：2016-03-10
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
CPC classification number: C12P7/48
Abstract: 本发明公开一种淀粉质原料的处理方法，以柠檬酸废水为原料，包括原料粉碎、调浆、一次加酶一次喷射、闪蒸、固液分离步骤，所述酶选自耐酸型α—高温淀粉酶，该方法能适应低pH液化条件，既可大大简化操作，降低能耗和生产成本，又能保证理想的蛋白絮凝和提纯效果，减少对后续发酵和提纯造成的负面影响；将本发明方法应用柠檬酸制备工业，种子生长速率显著加快，种子培养周期缩短，发酵指标进一步提高，发酵周期缩短，转化率提高，具有重要工业应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104699997A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201510131784.6
申请日：2015-03-24
Applicant: 江南大学
IPC: G06F19/12
Abstract: 本发明公开了一种基因组代谢网络模型自动化修正方法，利用了超文本传送协议和Java控件HttpClient相结合、并利用图像处理算法，实现自动提交并分析网站脚本语义，基于KEGG、MetaCyc、MetRxn在线数据库以及多个蛋白区间定位预测网站对基因组规模代谢网络模型进行了自动化断点补齐，同时通过蛋白区间预测结果和权重打分机制确定可信度高的特异性反应，完成代谢网络粗模型的自动化修正过程。利用本发明所述的方法进行基因组代谢网络模型修正的优点是更加省时、方便，且所得修正模型更为全面、准确。
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公开(公告)号：CN104651391A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510078380.5
申请日：2015-02-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 干酪乳杆菌磷脂酶A2基因的重组表达方法，依次包括基因信号肽预测、重组载体的构建﹑转化与筛选﹑表达产物的检测，重组菌产酶发酵；首先根据干酪乳杆菌磷脂酶A2基因序列，signalP进行基因信号肽预测，利用特异性引物在成熟肽两端引入限制性酶切位点，将其亚克隆到载体pKLAC1中，得到表达载体pKLAC1-pla2；然后筛选重组乳酸克鲁维酵母菌株实现重组磷脂酶A2的表达；接着收集发酵上清液，卵黄平板初步检测酶活；最后对酵母进行摇瓶发酵培养。本发明根据克隆到的干酪乳杆菌磷脂酶A2基因，构建真核表达载体，利用酵母表达系统表达了干酪乳杆菌磷脂酶A2基因，并研究了不同发酵条件对重组菌株生长及产酶影响。
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公开(公告)号：CN117825326A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311838176.X
申请日：2023-12-27
Applicant: 江南大学
IPC: G01N21/359 , G01N21/01
Abstract: 本发明涉及一种基于近红外光谱的大肠杆菌发酵在线检测装置，属于近红外光谱技术领域。本发明通过设置发酵罐与红外光谱分析仪的结合装置结构，实现了通过在线采集发酵液样本的近红外光谱数据分析并构建大肠杆菌发酵最佳的定量模型，指导并优化发酵过程，便于选择合适的发酵条件，使得发酵结果更为准确，整个过程仅需通过控制平台完成在线检测和分析，解决了破坏性处理的不可逆消耗问题；同时，本发明增设三通管、气体流量计和无菌空气滤膜，避免了发酵过程中连续不均匀的气泡对光谱数据采集的影响以及防止外界空气污染发酵过程，进一步提升了发酵过程调控的精准性和安全性。
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公开(公告)号：CN113817736B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202111192261.4
申请日：2021-10-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/10
Abstract: 本发明公开了一种具有群体感应特征的启动子及其应用，具有与SEQ ID NO.1所示的序列同源性≥95％的核酸序列，本发明提供的启动子Ptr1来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis BL2)。本发明所述启动子具有前期(1‑5h)表达极弱，后期(16‑48h)表达脉冲型增长的特性，是响应群体密度的自诱导高效表达系统。本发明提供的启动子确保细菌种群达到一定数量后才产生目标产物，无需添加诱导剂，保证了细胞在“生长”与“生产”两相之间进行适时的转变。
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公开(公告)号：CN116004606A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202310065215.0
申请日：2023-01-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备，涉及固定化酶的技术领域。该固定化酶载体以壳聚糖和海藻酸钠为原料，利用碱性溶液冷冻条件下的溶解及氢键重排的方法，制备出力学性质优良且耐高温的壳聚糖复合水凝胶，进一步采用化学交联法制备固定化耐高温酶。基于此，本研究建立的固定化酶制备方法，有助于解决工业酶高温情况下易失活，且难以连续使用的问题。
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