公开(公告)号：CN103103221B

公开(公告)日：2014-12-03

申请号：CN201310033476.0

申请日：2013-01-29

Applicant: 广州分子生物技术有限公司 ,  暨南大学

Inventor： 刘泽寰 ,  林蒋海 ,  胡佳 ,  黎惠忠 ,  李晶博 ,  龚映雪 ,  肖文娟

IPC: C12P7/10

CPC classification number: Y02E50/16

Abstract: 本发明涉及基因工程及发酵工程领域，具体公开了一种利用基因重组酵母混合培养将纤维素转化为乙醇的方法。该方法是利用基因工程技术构建能分别分泌表达内切葡聚糖酶EG、外切葡聚糖酶CBH和β-葡萄糖苷酶BGL的三种基因重组酿酒酵母菌株，然后将上述三种基因重组酵母菌株混合培养，并以纤维素原料为唯一碳源发酵，可较高效地将纤维素直接转化为乙醇。本发明方法将产酶、纤维素水解和乙醇发酵在一个体系中完成，不需额外添加纤维素酶，可在发酵过程中直接分解纤维素并转化为乙醇，省略了糖化步骤，简化了操作，节省了成本，是一套绿色环保低碳的纤维素乙醇生产工艺。

公开(公告)号：CN103382444A

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201310033477.5

申请日：2013-01-29

Applicant: 广州分子生物技术有限公司 ,  暨南大学

Inventor： 刘泽寰 ,  林蒋海 ,  胡佳 ,  黎惠忠 ,  李晶博 ,  龚映雪 ,  肖文娟

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及遗传工程和发酵工程领域，具体公开了一种能降解结晶纤维素的基因重组酿酒酵母。该基因重组酿酒酵母是将内切β-1,4-葡聚糖酶基因、外切β-1,4-葡聚糖酶基因和β-葡萄糖苷酶基因按照1:3:2的比例通过酿酒酵母表达载体同时转入酿酒酵母并获得正确的分泌表达而构建成的。本发明将上述三种酶基因按1:3:2的比例同时转入酿酒酵母中实现分泌表达，从而使得本发明的重组酵母能够按1:3:2的最佳协同作用比例同时分泌EG、CBH、BGL三种纤维素酶，因此能够较高效地降解结晶纤维素，进一步提高了纤维素-乙醇的转化效率。

公开(公告)号：CN101319225A

公开(公告)日：2008-12-10

申请号：CN200810029630.6

申请日：2008-07-22

Applicant: 暨南大学

Inventor： 刘泽寰 ,  台艳 ,  肖文娟 ,  王峻梅

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/69

Abstract: 本发明公开一种酿酒酵母多基因表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是将酿酒酵母基因组rDNA的1.8kb片段、磷酸甘油激酶启动子和磷酸甘油激酶终止子三个表达元件插入到大肠杆菌－酿酒酵母穿梭表达载体中，并在启动子上游和终止子下游设计了两个同尾酶的酶切位点而构建成的。本发明的酿酒酵母多基因表达载体具有同时表达多个外源基因的特点，其载体上的同尾酶设计可以使得多个外源基因以串联表达盒的方式连接到该载体上获得同时表达。本发明的表达载体由于采用了来源于宿主酿酒酵母自身的三个表达元件，有利于外源基因在宿主中稳定、高效的表达。

公开(公告)号：CN103103139A

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201310033518.0

申请日：2013-01-29

Applicant: 广州分子生物技术有限公司 ,  暨南大学

Inventor： 刘泽寰 ,  龚映雪 ,  唐根云 ,  黎惠忠 ,  肖文娟 ,  李晶博 ,  林蒋海

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12P7/10 ,  C12R1/865

CPC classification number: Y02E50/16

Abstract: 本发明涉及遗传工程和发酵工程领域，公开了一种能降解无定形纤维素的基因重组酿酒酵母。该基因重组酿酒酵母是将内切β-1,4-葡聚糖酶（EG）基因和β-葡萄糖苷酶（BGL）基因通过酿酒酵母表达载体同时转入酿酒酵母并获得正确的分泌表达而构建成的。该基因重组酿酒酵母可利用无定形纤维素做原料生产乙醇且具有操作简便、节能降耗、绿色环保的特点，在新一代石油替代产品——纤维素燃料乙醇的研制方面具有积极的推动作用。

公开(公告)号：CN1303948A

公开(公告)日：2001-07-18

申请号：CN00114010.8

申请日：2000-01-07

Applicant: 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心

Inventor： 李校坤 ,  刘泽寰 ,  吴晓萍 ,  付小兵 ,  冯成利

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C07K14/50 ,  A61K38/18

Abstract: 本发明涉及生产酸性成纤维细胞生长因子的方法,特别是涉及利用分子伴侣与人酸性成纤维细胞生长因子在原核生物体内的共表达,以生产可溶性酸性成纤维细胞生长因子蛋白的方法。

公开(公告)号：CN103103221A

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201310033476.0

申请日：2013-01-29

Applicant: 广州分子生物技术有限公司 ,  暨南大学

Inventor： 刘泽寰 ,  林蒋海 ,  胡佳 ,  黎惠忠 ,  李晶博 ,  龚映雪 ,  肖文娟

IPC: C12P7/10

CPC classification number: Y02E50/16

Abstract: 本发明涉及基因工程及发酵工程领域，具体公开了一种利用基因重组酵母混合培养将纤维素转化为乙醇的方法。该方法是利用基因工程技术构建能分别分泌表达内切葡聚糖酶EG、外切葡聚糖酶CBH和β-葡萄糖苷酶BGL的三种基因重组酿酒酵母菌株，然后将上述三种基因重组酵母菌株混合培养，并以纤维素原料为唯一碳源发酵，可较高效地将纤维素直接转化为乙醇。本发明方法将产酶、纤维素水解和乙醇发酵在一个体系中完成，不需额外添加纤维素酶，可在发酵过程中直接分解纤维素并转化为乙醇，省略了糖化步骤，简化了操作，节省了成本，是一套绿色环保低碳的纤维素乙醇生产工艺。