公开(公告)号：CN112014558A

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN202010816273.9

申请日：2020-08-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张坤 ,  徐红梅 ,  陈佳欢 ,  贺振 ,  庄新建 ,  甘海峰

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  C07K16/10

Abstract: 本发明公开了一种蚕豆潜隐病毒M双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒及制备与检测方法，测试剂盒包括ELISA用微孔板，酶标抗体，缓冲液，显色液，终止液，其中微孔板上包被有氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的VCV-M特异的多克隆抗体，酶标抗体为碱性磷酸酶标记得VCV-M特异性多克隆抗体。本发明采用的免疫原为基因工程表达的VCV-M外壳蛋白抗原，在血清学水平上为VCV-M的检测提供了一种快速、灵敏、简便的方法，不仅经济实用，也为后续蚕豆的田间种植及其病毒病的防控提供一定的有效方法。

公开(公告)号：CN115785113A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211515989.0

申请日：2022-11-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈佳欢 ,  周雨晨 ,  张坤 ,  黄梦妮

IPC: C07D493/04 ,  A01N43/90 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一种制备鲁望桔内酯的方法，提取：称取簕欓花椒原料，粉碎，提取，合并提取液，过滤，得到总提取液；浓缩：将总提取液进行浓缩，去除有机溶剂，得到浓缩膏；精制：将浓缩膏制成固定相干法上样于硅胶柱，使用石油醚‑乙酸乙酯作为流动相进行梯度洗脱，所述石油醚‑乙酸乙酯的体积比为1:0～0:1，浓缩，得到精制组分；重结晶：将精制组分于有机溶剂中加热至完全溶解，冷却至室温后析出结晶，即为鲁望桔内酯。本发明的制备方法能够从簕欓花椒植物中将鲁望桔内酯提纯，产率高，杂质少，制备方法简单。本发明还公开了一种鲁望桔内酯在植物农药中的应用，可用于抑制大斑凸脐蠕孢菌和腐皮镰刀菌，效果显著。

公开(公告)号：CN112301044B

公开(公告)日：2022-04-22

申请号：CN202011156014.4

申请日：2020-10-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张坤 ,  庄新建 ,  陈佳欢 ,  徐红梅 ,  贺振 ,  甘海峰

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/08 ,  C12N15/70 ,  C07K16/40 ,  C07K16/06 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开了一种本生烟NbAPX3基因多克隆抗体及其制备方法和应用，包括(1)构建含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的重组表达载体，将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得NbAPX3蛋白；(2)以所述NbAPX3蛋白为抗原免疫动物，经血清分离纯化获得NbAPX3蛋白多克隆抗体，利用本发明所提供的方法制备的多克隆抗体，能够特异性识别本生烟NbAPX3，在本生烟NbAPX3蛋白的检测和功能鉴定及其研究中具有广泛用途。NbAPX3蛋白抗体的制备为检测本生烟NbAPX3基因在病毒侵染过程中的表达情况及研究NbAPX3蛋白的功能具有重要意义。

公开(公告)号：CN112301037B

公开(公告)日：2022-04-22

申请号：CN202011154988.9

申请日：2020-10-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张坤 ,  庄新建 ,  陈佳欢 ,  徐红梅 ,  贺振 ,  甘海峰

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/70 ,  C07K14/415 ,  C07K16/16 ,  C07K16/06 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种本生烟NbPLP基因多克隆抗体及其制备方法和应用，包括(1)构建含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的重组表达载体，将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得NbPLP蛋白；(2)以所述NbPLP蛋白为抗原免疫动物，经血清分离纯化获得NbPLP蛋白多克隆抗体，利用本发明所提供的方法制备的多克隆抗体，能够特异性识别本生烟NbPLP，在本生烟NbPLP蛋白的检测和功能鉴定及其研究中具有广泛用途。NbPLP蛋白抗体的制备为检测本生烟NbPLP基因在病毒侵染过程中的表达情况及研究NbPLP蛋白的功能具有重要意义。