红细胞富集与RT-PCR联合检测禽流感病毒方法

    公开(公告)号:CN1932042A

    公开(公告)日:2007-03-21

    申请号:CN200610041482.0

    申请日:2006-09-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 红细胞富集与RT-PCR联合检测禽流感病毒方法,本发明公开了一种鉴定病毒,特别是鉴定禽流感H5、H9亚型病毒的检测方法。先采用浓度为1%的红细胞凝集、解凝集,得到富集的禽流感病毒,然后用Trizol kit提取样本基因RNA,再进行反转录合成cDNA,然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因,最后电泳鉴定。该方法联合多重RT-PCR检测临床样品,提高快速检测方法对禽流感临床样品检出率,进一步完善了RT-PCR方法在禽流感临床检测中的应用。本发明较常规的禽流感病毒富集方法简单、快速,尤其是对少量禽流感病毒的富集。

    一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染ELIspot试剂盒

    公开(公告)号:CN118443936A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410668098.1

    申请日:2024-05-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染的ELISpot试剂盒及其在牛羊布鲁氏菌感染领域的应用。所述检测试剂盒中包括:支持介质、捕获抗体、检测抗体、阴性对照和阳性对照、特异性刺激剂,特异性刺激剂为布鲁氏菌纯蛋白变应原Br‑PPA。本发明试剂盒中所采用的由杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势;与布鲁氏菌试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RBT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法相比,能够更早地检测出牛羊布鲁氏菌感染,检测结果更为客观、准确,能更真实的反应机体细胞免疫状态,以改进现行布鲁氏菌感染的抗体检测方法中存在的准确率低、周期长、假阳性等缺点。

    一种具有抗炎作用的多肽SR4及其应用

    公开(公告)号:CN110294808A

    公开(公告)日:2019-10-01

    申请号:CN201910496590.4

    申请日:2019-06-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有抗炎作用的多肽SR4及其应用,利用实时荧光定量PCR和ELISA技术相结合的方法鉴定了多肽SR4的抗炎作用,并在小鼠模型中鉴定了其对流感病毒的攻毒保护作用。主要包括:鉴定SR4多肽对小鼠腹腔巨噬细胞炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的抑制作用,评价SR4多肽对细胞活性的影响,探索SR4多肽在小鼠体内的抗炎作用,及其对流感病毒的攻毒保护作用。SR4多肽能显著抑制LPS诱导的炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的产生,并维持良好的细胞生物活性,可在小鼠体内抑制过量LPS诱导的炎性细胞因子IL-6、IL-12p40和TNF-α的分泌,并保护小鼠抵抗流感病毒的攻击。该多肽具有抑制炎症反应和抵抗病原感染的功能,这将为新型抑炎小分子药物的设计提供新思路。

    一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白

    公开(公告)号:CN103204945A

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201310161803.0

    申请日:2013-05-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白,并将其应用于牛结核病的临床诊断。通过PCR扩增获得cfp10-esat6融合基因,构建重组质粒pPICZαA-(cfp10-esat6),转入毕赤酵母菌GS115,经甲醇诱导和亲和层析获得高纯度的CFP10-ESAT-6融合蛋白。将其作为刺激原用于牛结核病诊断的皮内变态反应和抗原特异的牛IFN-γ试验,前者与比较变态反应结果相比具有47.4%敏感性和83.3%特异性,后者与牛IFN-γ试剂盒的阳性和阴性符合率分别为82.8%和87.4%,显示其较好的牛结核病诊断价值。

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