一种稳定表达猪源TLR7受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞及构建方法

    公开(公告)号:CN107603953A

    公开(公告)日:2018-01-19

    申请号:CN201711089721.4

    申请日:2017-11-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源TLR7受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源TLR7受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pTLR7活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测稳定细胞系。本发明也为RNA-Seq技术高通量筛选pTLR7静默和活化状态下稳定细胞内差异表达基因提供了生物材料,并为进一步研究TLR7的种属特异性奠定了基础和平台。

    感染性PRRSV的PMA-qPCR通用检测试剂盒和三重鉴别试剂盒

    公开(公告)号:CN117604167B

    公开(公告)日:2024-08-16

    申请号:CN202311570243.4

    申请日:2023-11-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种感染性PRRSV的PMA‑qPCR通用检测试剂盒以及一种三重鉴别试剂盒。本发明使用PMA‑qPCR的通用检测试剂盒可以检测待检样品中所有类型PRRSV毒株的感染性病毒。本发明使用PMA‑qPCR的三重鉴别试剂盒可以同时鉴别待检样品中HP‑PRRSV2、NADC30‑like PRRSV2和NADC34‑like PRRSV2感染性病毒,能够快速、高效、准确的对我国猪群中不同感染性PRRSV流行株感染情况进行鉴别。本发明使用PMA‑qPCR的通用检测试剂盒以及三重鉴别试剂盒均能在保持强特异性的情况下,其敏感性比普通PCR方法还要高出10‑100倍。

    CRISPR-Cas12a侧向流试纸条快速可视化检测非洲猪瘟病毒的方法

    公开(公告)号:CN116732238A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202211532955.2

    申请日:2022-12-01

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种CRISPR‑Cas12a侧向流试纸条快速可视化检测非洲猪瘟病毒的方法,首先设计并合成金颗粒生物素单链DNA探针;其次建立CRISPR‑Cas12a反应体系,所述反应体系包括:LbCas12a、D117L‑crRNA、RNase抑制剂、检测缓冲液和金颗粒生物素单链DNA探针;然后将靶标DNA加入到CRISPR‑Cas12a反应体系中进行反应,得到CRISPR‑Cas12a反应液;最后将胶体金试纸条插入到CRISPR‑Cas12a反应液中,观察检测结果。本发明的ASFV检测方法简单、快速灵敏且特异性强,显示出了现场检测ASFV的潜力。

    一株NADC34-like PRRSV-2疫苗候选株及其应用

    公开(公告)号:CN119193697A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202411356016.6

    申请日:2024-09-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种rBJ‑VVL质粒和一种NADC34‑like PRRSV‑2突变型毒株及其制备方法和应用。本发明还公开了一种NADC34‑like PRRSV‑2特异性疫苗。本发明通过精确突变GP2a中91/97/98氨基酸位点而获得Marc‑145细胞嗜性的改造毒株rBJ‑VVL;本发明所构建的改造病毒接种Marc‑145细胞传代培育可引起细胞病变并形成空斑;本发明获得的Marc‑145细胞传代病毒具有极高的病毒载量,能够在短时间内获得大量新子代病毒;本发明培育的Marc‑145细胞适应型改造传代毒株用于创制首个NADC34‑like PRRSV‑2疫苗。

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