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公开(公告)号:CN116120408B
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202211599991.0
申请日:2022-12-09
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了携带幽门螺杆菌Hp毒力因子CagA和VacA的B细胞表位靶标抗原(TBEA)及其分别在鸡伤寒沙门氏菌SadA类型和YaiU类型的T5SS展呈表达及其检测Hp凝集抗体中的应用。本发明的特异性TBEA分别来自CagA和VacA,分别利用两种类型的T5SS展呈表达。通过间接凝集试验,验证菌体表面能展呈两种TBEAs,两种TBEAs精准识别和结合针对Hp抗体,形成TBEA‑抗体复合物聚合体,肉眼清晰可见,从而实现特异、敏感、快速的Hp凝集抗体检测。本发明能够特异性检测特异性凝集抗体,且该敏感性显著高于基于蛋白质抗原的传统血清学检测技术,且能定量检测特异性凝集抗体效价。
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公开(公告)号:CN114752531B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202210478018.7
申请日:2022-04-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , C07K16/12 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一株同时表达F4和F18菌毛的猪源大肠杆菌无毒分离株及其应用,所述猪源大肠杆菌无毒分离株F418的保藏编号为CCTCC M 2022089,保藏日期为2022年1月18日。本发明分离菌株为大肠杆菌,能同时表达F4和F18两种菌毛抗原,为猪源自然分离株,PCR测试表明该菌株缺乏LT和STb肠毒素基因,不产生肠毒素,能够良好地黏附定植于宿主猪,该菌株具有开发成细菌无毒活疫苗候选株的潜力,通过口服该毒株能够良好地黏附定植于宿主猪,诱导仔猪产生抗F4和F18两种菌毛抗原的免疫应答,发挥一定免疫效力,安全性具有保障,有望成为防控F4和F18大肠杆菌感染的潜在活疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN109628361B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN201811437985.9
申请日:2018-11-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及到生物技术领域,具体涉及整合双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因猪源益生菌EP1克隆株、构建方法及应用,包括如下步骤:pTargetT‑maeB::PtetF4和pTargetT‑nth/tppB::PtetF4重组质粒的构建;通过整合双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建,得到无抗性的双拷贝F4菌毛基因整合克隆株。该益生菌克隆株作为益生菌活疫苗候选株和仔猪断奶后腹泻和水肿病的治疗用药物。相对于现有技术,本发明的有益效果为:猪源益生菌NY10(EP1),无抗性基因的存在;该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能;体外细胞感染抑制实验表明,预孵育重组菌和IPEC‑J2细胞可竞争抑制F4菌毛阳性大肠杆菌病原3030‑2对IPEC‑J2细胞的感染并显著降低其黏附数量。
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公开(公告)号:CN114752532A
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202210479049.4
申请日:2022-04-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , G01N33/569 , G01N33/531 , C07K16/12 , C12P21/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一株能同时黏附定植和改变小鼠易感性的大肠杆菌分离株F4NT,所述大肠杆菌分离株F4NT保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2022090,保藏日期为2022年1月18日。该分离株同时表达Peg和F4两种菌毛黏附素抗原,在小鼠体内持续定植7天并诱导小鼠产生针对Peg菌毛和F4菌毛的特异性抗体,其中Peg菌毛抗体滴度在21天达1:8,具有作为诱导小鼠宿主产生免疫应答的大肠杆菌活疫苗候选株的潜在应用价值。值得注意的是,产肠毒素致病性大肠杆菌(ETEC)F4 ETEC标准株C83902仅能在小鼠体内1天内存在(黏附定植),且无特异性抗体产生。
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公开(公告)号:CN110714089B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN201911036658.7
申请日:2019-10-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种特异靶向鞭毛钩基因flgE的PCR引物及其快速检测有鞭毛和无鞭毛沙门氏菌的应用,属于微生物检测技术领域。本发明特异靶向鞭毛钩基因flgE的PCR引物包括上游引物flgE‑UP和下游引物flgE‑LO,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该引物通过特异靶向鞭毛基因flgE,PCR快速检测包括有鞭毛沙门氏菌和无鞭毛沙门氏菌在内的所有沙门氏菌,检测快速、敏感、特异,操作简单,成本低廉,且准确检测出待检样品中存在和污染的沙门氏菌,可在24小时内得到检测结果,为食品、饲料、环境样品或粪便中沙门氏菌监测和防控人类、畜禽和各种动物沙门氏菌感染发生提供有效的技术支持。
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公开(公告)号:CN112481287B
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202011289887.2
申请日:2020-11-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开一种重组质粒,重组质粒为将sef14操纵子基因插入表达载体pBR322中即得。本发明还公开了一种重组菌株,重组菌株为将所述重组质粒导入惰性载体菌S9即得。本发明还公开该重组菌株的制备方法和应用。本发明首次将SEF14在惰性载体菌S9进行了表面展呈表达单一菌毛SEF14,可以避免出现背景非特异性反应的同时特异性检测肠炎沙门氏菌感染,具有快速、特异、敏感、简单和价廉等优点,同时满足现场和大规模检测的要求。本发明的SEF14功能性菌毛在惰性载体上表面展呈表达单一菌毛SEF14后可用于检测监测肠炎沙门氏菌感染鸡群,仅需5‑10μL上述检测样品和等体积的检测试剂,利用简单的玻板凝集反应,通过现场肉眼观察反应结果和准确判断动物是否被肠炎沙门氏菌感染。
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公开(公告)号:CN109486714B
公开(公告)日:2020-08-04
申请号:CN201811491200.6
申请日:2018-12-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明涉及一种鸡伤寒沙门氏菌弱毒分离株及其应用。所述分离株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏地址为中国北京,保藏编号为CGMCC No.16049,保藏日期为2018.07.02,分类命名为鸡伤寒沙门氏菌SalmonellaGallinarum。该菌株对不同年龄鸡均为弱毒,无致病性,可作为预防禽伤寒沙门氏菌感染和预防家禽(鸡)感染性疾病的菌株载体。本发明为评估沙门氏菌弱毒疫苗株的毒力及作为家禽(鸡)活疫苗的菌株载体的潜力提供了数据参考。
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公开(公告)号:CN111454872A
公开(公告)日:2020-07-28
申请号:CN202010180295.0
申请日:2020-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种禽致病性大肠杆菌VI型分泌系统clpV基因缺失株及其构建方法和应用,用于禽致病性大肠杆菌的致病机理的研究和防控。利用Red同源重组系统成功构建APEC TW-XM菌株的clpV基因缺失株,获得缺失株TW-XM△clpV。将clpV基因克隆到表达载体pBR322中,转化入缺失株TW-XM△clpV,获得相应的基因回补株TW-XMC△clpV。本发明通过腹腔注射大肠杆菌构建小鼠感染动物模型,检测发现脑、血、肺组织载菌量以及脑组织中脑膜炎相关炎症因子mRNA的表达均显著下降。证明clpV与APEC致病力密切相关。
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公开(公告)号:CN110257276A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910424381.9
申请日:2019-05-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种惰性载体大肠杆菌及其潜在应用,基于该大肠杆菌分离株具备惰性载体特性,有望开发成一种用于间接凝集试验的载体菌。所述惰性载体大肠杆菌已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏地址为中国北京,保藏编号为CGMCC No.17339,保藏日期为2019年3月18日,分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli),菌株代号SE1。该大肠杆菌分离株来自健康鸡群,在较高的工作浓度下的细菌数量与不同遗传背景的多种鸡源血清不发生任何肉眼可见的凝集反应,即与鸡源血清不产生非特异性凝集反应,我们称该大肠杆菌为惰性载体大肠杆菌。本发明为开发简便快速间接凝集检测方法提供了一种惰性载体菌和其潜在应用。
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公开(公告)号:CN110151761A
公开(公告)日:2019-08-23
申请号:CN201910269332.2
申请日:2019-04-04
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K31/4045 , A61P25/00 , A61P31/04 , A01K67/02
Abstract: 本发明提供了一种替代抗生素的药物--褪黑素预防患儿脑膜炎大肠杆菌病原感染的应用。脑膜炎型大肠杆菌从番鸭脑脊液中分离鉴定,利用此菌株首次构建3周龄ICR小鼠的脑膜炎模型,分别通过神经症状评分,死亡率差异统计,血脑屏障损伤程度,脑膜炎相关炎症因子表达等方面评估小鼠脑膜炎模型的成功构建。以抗生素作为参照,分别使用褪黑素和四种联合抗生素处理小鼠,一周后,检测脑膜炎小鼠发病的情况,结果显示褪黑素与联合使用抗生素均能降低脑膜炎小鼠的神经症状,提高脑膜炎小鼠存活率,褪黑素促进血脑屏障保持完整性,降低炎症细胞侵入中枢神经系统,经由脑肠轴作用预防小鼠脑膜炎的发病,为预防新生儿脑膜炎疾病提供新的抗生素替代品和治疗策略。
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