一种真空渗透辅助农杆菌介导甘蔗遗传转化的方法

    公开(公告)号:CN103205459A

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201310088894.X

    申请日:2013-03-20

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域,提出一种真空渗透辅助农杆菌介导甘蔗遗传转化的方法,其包括步骤:(1)甘蔗心叶胚性愈伤组织的诱导及增殖;(2)含有目标基因的根癌农杆菌的活化与培养;(3)真空渗透辅助农杆菌侵染甘蔗胚性愈伤组织;(4)抗性材料的筛选与出苗;(5)抗性材料鉴定。本发明采用的真空渗透辅助农杆菌介导甘蔗遗传转化方法,在真空的情况下可促使农杆菌通过愈伤组织细胞间的空隙进入到深层的细胞,而且会在细胞的表面引起小伤口,致使植物分泌一些酚类物质以激活Ti质粒中T-DNA的剪切和转移,本发明完善了农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系。与普通农杆菌介导法相比,本发明显著提高了甘蔗的遗传转化率。

    去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法

    公开(公告)号:CN101361459B

    公开(公告)日:2012-03-07

    申请号:CN200810198634.7

    申请日:2008-09-19

    Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产,提供一种去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法,包括如下步骤:热水处理少量原种并生产、以其再生植株经斑点酶标免疫试验(DB-EIA)检测为阴性的茎尖为外植体,经诱导培养、继代增殖培养、促根培养、假植及二级或三级苗圃扩繁生产健康种苗,并在苗圃扩繁中注意砍种工具(蔗刀)的消毒,在种苗出圃用于大田生产用种前,抽样取蔗茎汁用DB-EIA检测RSD病菌,确保提供合格种苗。本发明的优点是:能彻底去除甘蔗种苗宿根矮病病原菌,年繁殖系数高达1万倍以上,且种苗无变异,具有快速、高效、安全的优点,适合工厂化、规模化、标准化生产甘蔗健康种苗。

    甘蔗组培一次成苗快速繁殖方法

    公开(公告)号:CN101401549A

    公开(公告)日:2009-04-08

    申请号:CN200810218883.8

    申请日:2008-11-04

    Abstract: 本发明涉及一种甘蔗组培一次成苗的方法。以健壮甘蔗的幼嫩心叶或茎尖生长锥作为外植体,一次成苗培养40-50天左右获得带少量蔗根的小苗后,将其转入生根培养基中经10-20天的促根处理后,然后进入炼苗和假植阶段。或在一次性成苗培养基中培养50-70天左右,获得根系长势较好的甘蔗完整小苗后直接进入炼苗和假植阶段。本发明不更换、或只更换一次培养基,有效减少了常规甘蔗侧芽或嫩叶诱导愈伤组织及分化过程中多次转接造成的污染,简化了甘蔗组培苗生产的程序,节约成本,成苗率高,显著缩短了甘蔗组培苗的生产周期,适用于甘蔗种苗工厂化快速繁殖。

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