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公开(公告)号:CN111378654B
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202010161002.4
申请日:2020-03-10
Applicant: 山东大学 , 青岛龙鼎生物技术有限公司
IPC: C12N15/11 , C12N15/115 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种用于细胞内重组蛋白固定的三角形网状RNA支架,由二维的三角形网状RNA支架与可选择施加的适配体序列组成;其中所述RNA支架会指导相互作用的酶之间的亚层流动,限制交叉作用并提高顺序代谢反应的产量。本发明还公开了所述的用于细胞内重组蛋白固定的三角形网状RNA支架在细胞内固定核糖醇脱氢酶和甲酸脱氢酶中的应用,实验证实本发明方法构建的工程菌阿洛醇的产量能从3.036g/L提高到4.433g/L,有望在工业生产中,以节约成本,提高酶促反应效率的优势,最大化地提高产物的产量,经济价值和应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN107974474B
公开(公告)日:2020-11-20
申请号:CN201810018301.5
申请日:2018-01-09
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明公开了一种生产D‑塔格糖的方法,是以乳糖为原料,同时加入含固定化β‑半乳糖苷酶、L‑阿拉伯糖异构酶和葡萄糖氧化酶的复合酶制剂,利用其中的β‑半乳糖苷酶水解乳糖为半乳糖和葡萄糖,利用其中的L‑阿拉伯糖异构酶催化半乳糖生成D‑塔格糖以及利用其中的葡萄糖氧化酶氧化副产物葡萄糖为带负电荷的葡萄糖酸,并用离子交换树脂除去葡萄糖酸,实现副产物的去除,得到含D‑塔格糖的转化液。本发明方法工艺简单、操做方便、效率高,可降低D‑塔格糖的生产成本,工业化生产及应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN111378612A
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN202010160837.8
申请日:2020-03-10
Applicant: 山东大学 , 青岛龙鼎生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用重组胞内RNA支架固定重组酶促进细胞催化阿洛醇生产的方法,步骤包括(1)构建用于细胞内重组蛋白固定的三角形网状RNA支架;(2)构建三角形网状RNA支架中锚定核糖醇脱氢酶和甲酸脱氢酶的重组质粒;(3)构建利用三角形网状RNA支架固定重组酶催化阿洛醇的大肠杆菌工程菌;(4)利用步骤(3)构建的大肠杆菌工程菌发酵生产阿洛醇。本发明利用RNA支架锚定核糖醇脱氢酶和甲酸脱氢酶,缩短酶促反应的距离,高效促进了阿洛醇合成。实验证实本发明方法构建的工程菌阿洛醇的产量能从3.036g/L提高到4.433g/L,有望在工业实际应用中,最大化地提高产物的产量。
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公开(公告)号:CN103571781A
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201310600689.7
申请日:2013-11-22
Applicant: 山东大学
CPC classification number: Y02A50/2358 , Y02P10/234
Abstract: 本发明涉及一株嗜酸性喜温硫杆菌基因工程菌及其应用。嗜酸性喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus)MTH-04(pJRD215-tac-sor)基因工程菌,于2013年6月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,菌种保藏编号:CGMCC NO.7833。本发明所述的嗜酸性喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus)MTH-04(pJRD215-tac-sor)基因工程菌与野生型嗜酸性喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus)MTH-04相比较,其氧化硫的能力增强,在菌体生物量、硫加氧还原酶酶活和硫氧化系统关键酶的转录水平等方面均有提高。
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公开(公告)号:CN101016521A
公开(公告)日:2007-08-15
申请号:CN200610070170.2
申请日:2006-11-20
Applicant: 山东大学
CPC classification number: Y02P10/234
Abstract: 本发明公开了一株具有抗汞特性的喜温硫杆菌,该菌株于2006年6月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(中国科学院微生物研究所,中国北京),其保藏编号为CGMCC 1742。本发明还公开了所述的喜温硫杆菌抗汞基因工程菌的制备及在含汞培养基中的生长应用,其制备方法包括(1)抗汞质粒载体的构建,(2)抗汞基因工程菌A.caldus CGMCC 1742的构建及鉴定,(3)A.caldus CGMCC 1742的种子培养,(4)A.caldus CGMCC 1742的扩大培养,(5)A.caldus CGMCC 1742在含汞培养基中的生长应用及抗汞性能的检测等步骤;该喜温硫杆菌的抗汞基因工程菌较野生型的喜温硫杆菌在抗汞特性方面有很大的提高,且抗汞性能稳定,在对含汞矿粉的生物浸出领域具有很大的应用前景。
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公开(公告)号:CN117887782A
公开(公告)日:2024-04-16
申请号:CN202311779240.1
申请日:2023-12-22
Applicant: 青岛龙鼎生物技术有限公司 , 山东大学
IPC: C12P19/02 , C12P19/24 , C12P19/14 , C12N15/75 , C12N15/70 , C12N15/56 , C12N15/61 , C12N1/21 , C12R1/125 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种同时生产D‑阿洛酮糖和D‑塔格糖的方法。本发明构建了两种异源表达工程菌株:能够同时表达葡萄糖异构酶和D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的E.coli BL21(DE3)‑pET28a‑gi‑dpe;以及能够同时表达β‑半乳糖苷酶和L‑阿拉伯糖异构酶的B.subtilis WB800N‑pHT01‑araA‑lacZ;培养这两种工程菌株并离心收集菌体,用含有乳糖的底物溶液重悬收集到的菌体,恒温下反应结束后过滤,上清液中同时含有D‑阿洛酮糖和D‑塔格糖。本发明所述的方法细胞催化剂制备容易,反应条件温和,操作方法简单,且高效、低成本,对环境保护、经济发展和代糖生产具有重要意义。
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公开(公告)号:CN116790900A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310842796.4
申请日:2023-07-10
Applicant: 山东大学 , 广西森合高新科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种联合微生物和提金剂的绿色环保提金方法,属于黄金矿物加工领域。本发明利用高效的嗜酸菌群对矿石进行氧化和浸出处理:通过微生物氧化矿石中的硫、铁进行生长代谢产生三价铁和硫酸,同时将砷、锑等有毒重金属释放到溶液中;金单质由于其不溶性,和无法被生物氧化的二氧化硅等物质一起形成沉淀,因此通过固液分离的方法可以实现液体和固体物的分离。微生物浸出液中的重金属可以通过吸附、沉淀的方式回收,菌液可实现循环利用。微生物处理后的固体物实现了金的富集和有毒离子的去除,再利用环保低毒的提金剂对金进行提取,提取后的废渣由于毒性较低,对环境危害较小,同时大大提供了金浸出率。
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公开(公告)号:CN114908131B
公开(公告)日:2023-08-18
申请号:CN202210519372.X
申请日:2022-05-13
Applicant: 山东大学
IPC: C12P17/04 , C12N15/74 , C12N15/54 , C12N1/20 , C12N1/38 , C07D307/33 , G01N30/02 , G01N30/72 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种嗜酸性喜温硫杆菌中的信号分子,是嗜酸性喜温硫杆菌株中ACT类型群体感应系统产生的信号分子是3‑OH‑C14‑AHL。本发明还公开了所述嗜酸性喜温硫杆菌中的信号分子在加速菌株硫氧化或在调控硫代谢和生长中的应用。通过信号分子反添加实验证实,3‑OH‑C14‑AHL能够促进和提高敲除菌株A.caldus(Δact)胞外多糖的产生、生物被膜的形成及菌株的酸耐受能力,从而提高菌株的硫氧化能力。这种通过新型信号分子提高嗜酸性喜温硫杆菌硫氧化能力的策略为提高生物冶金工业中菌株浸矿效率奠定了理论基础,也为解决酸性矿水排放等环境污染问题提供了新思路,具有广阔的开发前景。
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公开(公告)号:CN110526532B
公开(公告)日:2021-08-10
申请号:CN201910919353.4
申请日:2019-09-26
Applicant: 山东大学 , 山东亿安生物工程有限公司
IPC: C02F11/02 , C02F11/00 , C02F11/122 , C02F11/04 , C05F7/00 , C02F101/30 , C02F101/20
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物无害化与减量化处理污泥制备园林用肥的方法,是通过(1)污泥减量化处理:利用减量化菌群(CMD)的微生物代谢作用消耗污泥中有机物质,降低污泥含水率,减小污泥体积;(2)污泥无害化处理:利用无害化菌群(CMB)产生的产生含铁离子的酸性环境将污泥中重金属有害物质浸出到溶液中,使用压滤法分离产生滤液和重金属含量达到国家标准的泥饼,然后通过处理滤液实现重金属的分离与回收;(3)污泥资源化制得园林用肥:利用资源化菌群(CMA)将分离出的泥饼进行厌氧发酵处理,然后添加有益菌制成园林用肥。本发明利用多种不同功能微生物菌群的联合作用,实现了对污泥的减量化、无害化和资源化的处理过程,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN110804622A
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201911159345.0
申请日:2019-11-22
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明公开了一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌浸矿能力的方法,是以野生型A.ferrooxidans ATCC No.23270基因组为基础,获得含有三个基因afeR,orf3,afeI的AfeI/R操纵子基因片段;将该基因片段连接到载体pJRD215上,获得重组质粒pJRD215-QS;再通过接合转移的方式将pJRD215-QS转移进入A.ferrooxidans,获得同时增加AfeI/R操纵子三个基因afeI,orf3,afeR的拷贝数的重组工程菌A.ferrooxidans(pJRD215-QS);将该重组工程菌与黄铁矿混合构成浸矿体系进行浸矿反应,浸矿过程采用静置堆浸方式,矿石粒径小于0.5cm3,常温下进行,操作简便。本发明方法对提高生物冶金工业的浸矿效率具有巨大的理论价值,现实意义和广阔的开发应用前景。
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